塞来昔布对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型炎症因子的影响

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摘要目的建立脂多糖（LPS）诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型，探讨塞来昔布对其分泌炎症因子的影响。方法培养小鼠RAW 264.7巨噬细胞，采用1 μg/ml的LPS刺激小鼠RAW 264.7巨噬细胞24 h后，收集细胞培养基，采用Griess法测定一氧化氮（NO）及ELISA法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）、前列腺素E2（PGE2）的含量，从而建立LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型。采用MTT法检测塞来昔布对LPS刺激的RAW 264.7巨噬细胞的毒性作用后，选用8.00 μmol/L塞来昔布预处理细胞1 h，再加入1 μg/ml LPS刺激细胞24 h，收集细胞培养基，测定培养基中炎症因子NO、TNF-α及PGE2的含量。结果1 μg/ml的LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞24 h后，细胞形态出现明显变形，细胞培养基中炎症因子NO及TNF-α、PGE2含量均较正常对照组明显增高（P＜0.01）。与DMSO溶剂对照组相比，8.00 μmol/L塞来昔布组能明显抑制LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎性因子NO、TNF-α及PGE2的释放（均P＜0.01）。结论成功建立LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型，塞来昔布可明显抑制其炎症因子NO、TNF-α及PGE2的分泌。

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关键词 ：塞来昔布, RAW 264.7巨噬细胞, 脂多糖, 一氧化氮, 肿瘤坏死因子&alpha, 前列腺素E2

Abstract：Objective To investigate the influence of Celecoxib on the secretion of inflammatory cytokines in RAW 264.7 macrophages model induced by lipopolysaccharide(LPS).Methods Mouse RAW 264.7 macrophage was cultured. 24 h after mouse RAW 264.7 macrophage was stimulated by LPS 1 μg/ml,then cell culture medium was collected.NO was tested by using Griess and the content of TNF-α and PGE2was tested by ELISA.Then the RAW 264.7 macrophage inflammation model was established.The toxic effect of celecoxib on LPS stimulated RAW 264.7 macrophages assayed by MTT.8.00 μmol/L Celecoxib was used to pretreat cell for 1 h,following of 1 μg/ml LPS added to stimulate cell for 24 h. Cell culture medium was collected to test the content of inflammatory factors NO,TNF-α and PGE2in culture medium. Results After 1 μg/ml of LPS stimulated RAW macrophages for 24 h,cell morphology changed obviously,the content of inflammatory factors NO,TNF-α and PGE2in culture medium were obvious higher than those of the control group(P＜0.01).Compared with DMSO control group,8.00 μmol/L Celecoxib group could significantly inhibit the release of inflammatory cytokines NO,TNF-α and PGE2induced by LPS in RAW 264.7 cells(P＜0.01).Conclusion Establishment of LPS induced macrophage model of RAW 264.7 and celecoxib can obvious inhibit the release of inflammatory cytokines NO,TNF-α and PGE2.

Key words： Celecoxib RAW 264.7 macrophage Lipopolysaccharide NO TNF-&alpha PGE2

基金资助:国家自然科学基金项目（81360056）；
广西壮族自治区南宁市科学研究与技术开发计划项目（20153105）

通讯作者: 郭哲（1975-），男，本科，主治医师，研究方向：心脑血管急诊；何萍（1975-），女，博士，教授，研究方向：心脑血管药理学

作者简介: 庞逸敏（1991-），女，硕士，研究方向：心脑血管药理学

引用本文:

庞逸敏；甘露；王献哲；苏棋；郭哲；何萍. 塞来昔布对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型炎症因子的影响[J]. 中国当代医药, 2017, 24(10): 4-7.
PANG Yi-min；GAN Lu；WANG Xian-zhe；SU Qi；GUO Zhe；HE Ping. Influence of Celecoxib on inflammatory cytokines of inflammation model in RAW 264.7 macrophages induced by lipopolysaccharide. 中国当代医药, 2017, 24(10): 4-7.

链接本文:

http://dangdaiyiyao.com/CN/ 或 http://dangdaiyiyao.com/CN/Y2017/V24/I10/4

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