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中药白术为菊科植物白术（Atractylodes macrocephala Koidz.）的干燥根茎。味甘、苦，性温，归胃、脾经，具有燥湿利水、健脾益气、安胎、止汗的功效，常用于治疗腹胀泄泻，痰饮眩悸，脾虚食少，胎动不安，自汗，水肿等证[1]。白术作为传统中药材，具有利尿、镇痛、抗炎、抗衰老、抗肿瘤等药理作用[2-4]。据文献报道，白术中主要含有挥发油、苷类和多糖类等成分，其中挥发油成分主要为倍半萜类，如苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ等[5-12]。2015年版《中华人民共和国药典》[1]（以下简称《中国药典》）麸炒白术饮片仅用鉴别、检查、浸出物作为其质量控制项，不能完全真实地反映其内在质量。目前国内文献对白术研究主要集中在生药和生饮片[13-20]，同时测定麸炒白术饮片中多种挥发性成分的研究报道较少。本实验对麸炒白术饮片中的苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ含量进行同时测定，能更好地控制麸炒白术饮片质量，可为制定麸炒白术的质量标准提供实验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Perkin Elmer Series 200 高效液相色谱仪（四元高压梯度泵、自动进样器、真空脱气机、紫外检测器）；Total Chrom 色谱工作站；AB104-L 分析天平（德国梅特勒公司）；KQ-500E 型医用超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试药

苍术酮对照品（批号131207）、白术内酯Ⅱ对照品（批号130921）购于上海江莱生物科技有限公司，白术内酯Ⅰ对照品（批号MUST-13012005）、白术内酯Ⅲ对照品（批号MUST-13012007）购于成都曼思特生物科技有限公司。

白术样品购自我国浙江省、湖南省、湖北省、江西省，经南京中医药大学药学院巢建国教授鉴定为菊科植物白术（Atractylodes macrocephala Koidz.）的干燥根茎。分别取净白术按2015年版《中国药典》[1]白术饮片制法项下制得各产地相应的麸炒白术饮片。白术产地、来源和批号见表1。甲醇、甲酸、乙腈为色谱纯，水为自制高纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Dikma Diamonsil C8（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：水（A）-乙腈（B），梯度洗脱：0～10 min，40%A；10～25 min，40%～5% A；25～35 min，40% A；流速1.0 mL/min；检测波长：白术内酯Ⅰ采用275 nm；苍术酮、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ采用220 nm；柱温30℃，进样量20 μL。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的配制精密称取苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ对照品适量，分别置于5 mL容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。分别精密量取单个组分对照品溶液，加乙醇配成含苍术酮476.00 mg/L、白术内酯Ⅰ13.04 mg/L、白术内酯Ⅱ11.26 mg/L、白术内酯Ⅲ17.40 mg/L 的混合对照品储备液。再精密吸取混合对照储备液2.0 mL，置于10 mL 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度分别为95.20、2.61、2.25、3.48 mg/L 的苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ混合对照品溶液。

表1 白术产地、来源和批号

2.2.2 供试品溶液的配制精密称取0.5 g 麸炒白术饮片粉末，置于50 mL 量瓶中，加入50 mL 甲醇，称定重量，超声提取30 min，补足减失的量，用微孔滤膜（孔径为0.22 μm）过滤，所得的滤液作为供试品溶液。

2.3 专属性试验

分别取供试品溶液、混合对照品溶液各20 μL，按“2.1”项下色谱条件，注入高效液相色谱仪中，色谱图见图1。结果显示：苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ分离良好，在各出峰处均无干扰，表明该方法的专属性良好。

2.4 标准曲线及线性范围

精密吸取混合对照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL，分别置于10 mL 量瓶内，加流动相稀释至刻度，制得系列对照品溶液。每个质量浓度分别进样2 次，以对照品质量浓度为横坐标（X），峰面积积分值为纵坐标（Y），进行线性回归，得到线性回归方程、相关系数和线性范围，结果见表2。

图1 麸炒白术高效液相色谱图

1：白术内酯Ⅲ；2：白术内酯Ⅱ；3：白术内酯Ⅰ；4：苍术酮
A：混合对照品；B：样品

表2 对照品的标准曲线、相关系数及线性范围

2.5 精密度试验

取同一混合对照品溶液20 μL，按“2.1”项下色谱条件连续进样6 次，测定苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的峰面积值，计算得其相对标准偏差（RSD）分别为1.8%、1.2%、1.6%、1.7%，表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验

取批号为ZJPA180203 的样品粉末0.5 g，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，分别在0、2、4、8、12、24 h 进样20 μL，进行测定，结果显示：苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的RSD 分别为2.28%、2.16%、2.04%、2.05%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.7 重复性试验

取批号为ZJPA180203 的样品粉末0.5 g，精密称定，按“2.2.2”项方法制备供试品溶液，平行制备6 份，按“2.1”项色谱条件进样测定，计算苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ峰面积的RSD 值，结果分别为2.13%、1.49%、2.29%、2.51%，表明该方法重复性良好。

2.8 加样回收率试验

精密称取9 份批号为ZJPA180203 的麸炒白术粉末0.25 g，精密加入95.20 mg/L 苍术酮、2.61 mg/L 白术内酯Ⅰ、2.25 mg/L 白术内酯Ⅱ、3.48 mg/L 白术内酯Ⅲ对照品溶液6、8、10 mL（每个质量浓度取3 份），按供试品溶液项下方法制备样品，注入高效液相色谱仪中，色谱条件同“2.1”项，计算加样回收率。结果表明，苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的平均回收率分别为99.98%、99.63%、99.15%、99.79%，RSD 分别为0.03%、1.70%、1.57%、1.10%，具体见表3。

表3 加样回收率试验结果

2.9 样品含量测定

取不同产地的麸炒白术饮片，粉碎，过三号筛，精密称取粉末0.5 g，按“2.2.2”项方法制备供试品溶液，按“2.1”项色谱条件进样测定，结果见表4。

表4 不同产地麸炒白术中各成分的含量测定结果（n＝3）

3 讨论

本研究结果表明，不同产地麸炒白术中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量存在差异，总体上浙江磐安产麸炒白术中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量较高，这与浙江磐安是白术道地药材产区一致。同产地不同时期炒白术中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量差别不大，表明同一产区内一般来说具有一致性。

本研究建立了高效液相色谱法测定不同产地麸炒白术饮片中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量方法，确定以甲醇为提取液，超声提取30 min，色谱柱为Dikma Diamonsil C8 柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为水-乙腈（梯度洗脱）；流速1.0 mL/min；柱温30℃，进样量20 μL；检测波长白术内酯Ⅰ采用275 nm，苍术酮、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ采用220 nm；苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ分别在47.600～142.800、1.304～3.912、1.126～3.378、1.740～5.220 mg/L 时与色谱峰面积线性关系良好，平均加样回收率分别为99.98%、99.63%、99.15%、99.79%，RSD 分别为0.03%、1.70%、1.57%、1.10%，该方法更准确、灵敏。

2015年版《中国药典》[1]仅要求对白术饮片作鉴别、检查、浸出物检测，而白术有浙江、湖南、湖北、江西、安徽等诸多产地，这造成药物成分和有效成分含量差异，所以仅仅检测鉴别、检查、浸出物不能有效控制白术饮片质量。本实验采用高效液相色谱法梯度洗脱对麸炒白术饮片中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ含量进行同时测定，并对不同产地麸炒白术饮片中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量进行比较，实验方法准确、快速、重复性好，可作为评价麸炒白术饮片中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ等成分的可靠分析方法，能更好地控制麸炒白术饮片质量，旨在为制定麸炒白术饮片质量标准提供理论依据。

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