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血浆为血液的重要组成成分，包含多种物质，如蛋白质、水分、氨基酸、糖类、无机物等，是制备各种血液制剂必不可少的原料，在临床中发挥重要作用[1-3]。新鲜冰冻血浆是制备冷沉淀凝血因子的起始血液。而肇庆市无偿献血的全血采集范围多为县、市、区及街头等，这在一定程度上影响了新鲜冰冻血浆的制备数量和质量。随着临床对冷沉淀凝血因子的需求量不断增加，为最大限度地开发利用血液资源，选用合理的方法制备更多的冷沉淀凝血因子，本研究针对单采新鲜冰冻血浆在制备冷沉淀凝血因子中的应用效果进行了探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年4～10月肇庆市中心血站采集的48袋血浆，所有血浆均来自符合《献血者健康检查要求》的无偿献血人群，采用随机数字表法分为实验组（24 袋）与对照组（24 袋）。本研究经肇庆市中心血站学术委员会审核批准。

1.2 方法

实验组采用单采新鲜冰冻血浆、对照组采用全血制备的新鲜冰冻血浆，做好相应的标识，均采用虹吸法制备成冷沉淀凝血因子。于检测当天分别取实验组和对照组的冷沉淀凝血因子放入37℃恒温水浴箱中，待其融化后应立即检测，不能立即检测的应将其放至2～6℃冰箱存放,贮存时间不超过2 h，避免反复冻融；按照质管科标准操作规程使用C2000-A 全自动血凝仪对Ⅷ因子（FⅧ）和纤维蛋白原（Fg）进行检测，FⅧ试剂盒（西门子医疗诊断产品有限公司）、APTT 试剂（上海太阳生物技术有限公司）、缓冲液（上海长岛生物技术有限公司）、纤维蛋白原含量测定试剂盒（上海长岛生物技术有限公司）等，均在有效期内使用。

1.3 观察指标及评价标准

依据《全血及成分血质量要求GB18469-2012》[4]中冷沉淀凝血因子质量控制项目和要求：来源于400 mL全血、200 mL 单采新鲜冰冻血浆。

①观察两组冷沉淀凝血因子中FⅧ、Fg 含量。②观察组冷沉淀凝血因子质量检测结果。冷沉淀凝血因子外观呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况，血袋完好，并保留注满血浆经热合的导管至少10 cm，FⅧ含量≥80 U、Fg 含量≥150 mg，无细菌生长，则表明符合质量要求，即为合格，计算合格率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（

±s）表示，两组间比较采用t 检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2 检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组冷沉淀凝血因子中FⅧ、Fg 含量的比较

实验组FⅧ含量高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组Fg 含量比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。

表1 两组冷沉淀凝血因子中FⅧ、Fg 含量的比较（

±s）

2.2 两组冷沉淀凝血因子质量检测结果的比较

实验组冷沉淀凝血因子合格率为100%（24/24），对照组合格率为83.3%（20/24）。实验组合格率高于对照组，差异有统计学意义（χ2=4.364，P＜0.05）。

2.3 肇庆市近五年采血情况的统计

如表2 所示，肇庆市中心血站迈科网络血站信息系统数据统计，2015～2019年肇庆市机采量呈上升趋势，随机采集的单采新鲜冰冻血浆容量较大，若作为原料浆制备冷沉淀凝血因子，每年至少可增加冷沉淀凝血因子800～1600 U。

表2 2015～2019年肇庆市采血情况的统计

3 讨论

2020年初，受新型冠状病毒肺炎疫情的影响，肇庆市参加无偿献血的人数骤减，献血招募和血液供应面临着严峻挑战。血液是治病救人的重要保障，也是抗击疫情、防疫治病的后勤保障资源。而冷沉淀凝血因子作为一种血液成分在临床患者疾病救治中占有越来越重要的地位，它是从新鲜冰冻血浆中所得的凝血因子与纤维蛋白原浓缩物，能激活内源性凝血系统，同时还能增强血小板黏附作用，增强血小板凝聚功能，将其适量输入患者机体中，能改善患者血循环，提升FⅧ、Fg 含量，达到缩短凝血时间，纠正凝血异常现象，减轻患者出血症状，尤其是对出血量较大患者提供及时的血液支持，同时为血液系统疾病患者生存质量提供保障[5-6]。目前，肇庆市每天有近百名患者急需输血救治，全市平均每天用血量180 袋（约36 000 mL）以上，而肇庆市中心血站的血液大多来源于外采，由于新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ凝血活性系数（FⅧ∶C）是不稳定因子[7]，外采时间不固定，耗时长，血液温度波动较大，影响因素多，制备质量不稳定。肇庆市中心血站曾在2014年针对不同制备时间新鲜冰冻血浆对冷沉淀凝血因子中FⅧ和Fg 含量的影响进行研究，使用13～18 h 速冻的新鲜冰冻血浆作为制备冷沉淀凝血因子的原料浆，虽然在一定程度上保证了冷沉淀凝血因子的质量、缓解了临床用血的压力，但近年来临床对冷沉淀凝血因子的需求量不断增加，仍需要最大限度地开发利用血液资源，在保证血液质量的同时制备更多的冷沉淀凝血因子。

单采新鲜冰冻血浆是指使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血浆分离出并在6 h 内速冻呈固态的单采成分血，采集地点在站内，制备过程短，温度波动小，要留作冷沉淀凝血因子时，只需通过无菌接管机连接另一个空袋，将单采新鲜冰冻血浆转移至空袋中并标识好，放置于-50℃以下速冻机在1 h 内速冻成块[8-9]。本研究中，实验组FⅧ含量高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组Fg 含量比较，差异无统计学差异（P＞0.05）。与既往研究结果相似，采用单采新鲜冰冻血浆进行冷沉淀凝血因子制备获取的FⅧ更多[11-12]。分析原因有可能是，原料新鲜冰冻血浆中凝血因子含量与制备时间存在一定关系，单采新鲜冰冻血浆采集后会快速对其进行速冻，其时间更短，致使血浆中凝血因子损失更少，而全血采集，尤其是在街头、县区等地点进行血液采集时，会先对血液进行保存，在一定程度延长制备时间，造成凝血因子的消耗[13]。全血制备新鲜冰冻血浆的时长参差不齐，也造成冷沉淀凝血因子的制备质量相对来讲也不稳定。

抗凝剂用量不同也会影响凝血因子的含量。无论是在全血采集或单采过程中，为了确保血液不凝固，均要添加抗凝剂进行混合，即使采用相同抗凝剂，但终产品中抗凝剂的含量存在差异，而手工分离制备的新鲜冰冻血浆较单采新鲜冰冻血浆的抗凝剂含量多。研究报道，血浆中抗凝剂所占比例越小，凝血因子所受影响也越小，更能发挥作用[14-16]。

本研究发现，冷沉淀凝血因子的制备质量容易受各个环节的影响，在原料新鲜冰冻血浆的选择上，单采新鲜冰冻血浆经历的过程较少，而全血制备的新鲜冰冻血浆经历的过程较多，如外采血液的保存、运输、白细胞过滤等等，若其中任一环节出现误差，均会影响冷沉淀凝血因子的质量，继而影响临床应用效果。从肇庆市中心血站近五年的机采情况来看，充分利用单采新鲜冰冻血浆作为原料浆每年至少可增加冷沉淀凝血因子800～1600 U，在一定程度上可缓解冷沉淀凝血因子的供应压力。

综上所述，单采新鲜冰冻血浆在制备冷沉淀凝血因子中的应用价值较高，所得凝血因子活性更好，质量更佳。

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