桥本甲状腺炎（HT）合并甲状腺乳头状癌（PTC）发病率逐年上升，主要临床症状为无痛性颈部肿块及甲状腺结节等，当癌肿增大时可压迫气管、食管，从而导致患者呼吸困难、吞咽困难，危及患者生命[1-2]。目前，临床主要以抑制血管生成来治疗肿瘤，但由于缺乏特异性的淋巴管内皮细胞标记物，导致与肿瘤转移的淋巴管研究进展缓慢[3]。环氧化酶-2（COX-2）属于反应性即刻反应蛋白，在正常组织中的表达量较低，当细胞受到相应刺激时表达水平升高。临床已在多种肿瘤细胞中发现COX-2 存在异常高表达现象，且已证实COX-2 与结肠癌及卵巢癌的发生密切相关，但COX-2 与HT 合并PTC 的发生关系尚未明确[4-5]。鉴于此，本研究旨在探讨HT 合并PTC 中COX-2 的表达及临床意义，以期为临床诊疗提供指导，现报道如下。

收集2019年7月～2020年7月辽宁省健康产业集团本钢总医院病理科85 例HT 合并PTC 患者石蜡标本。其中男22 例，女63 例；年龄36～81 岁，平均（43.15±5.17）岁；体重指数18.12～25.27 kg/m2，平均（22.43±0.42）kg/m2；肿瘤数目：多发9 例，单发76 例；肿瘤大小：肿瘤直径＜1 cm 27 例，肿瘤直径≥1 cm 58 例；TNM 肿瘤分期：Ⅰ期9 例，Ⅱ期22 例，Ⅲ期48例，Ⅳ期6 例；包膜侵犯情况：有包膜侵犯37 例，无包膜侵犯48 例；淋巴结转移（LNM）情况：有LNM 35例，无LNM 50 例。本研究经医院医学伦理委员会审核批准，患者自愿签署知情同意书。

纳入标准：①所有病例均为首次发病；②所有石蜡标本均经病理学证实，且临床资料齐全；③术前无颈部放射接触史。

排除标准：①合并其他系统肿瘤患者；②合并其他甲状腺疾病患者；③存在肝功能异常、心血管等系统障碍；④合并凝血功能障碍；⑤术前接受过放疗、化疗。

①将含有＞70%肿瘤组织的石蜡标本进行切片，使用DNA 提取试剂盒提取切片后石蜡标本内的DNA 基因，DNA 提取试剂盒购自上海睿时生物科技有限公司，严格按照说明书操作。②采用免疫组化法分别检测癌组织、癌旁组织中COX-2 的表达。具体步骤如下：将石蜡切片放入酒精浸泡，4 min 后展开，然后将展开的石蜡切片放入烘箱中，经常规脱蜡、水化，COX-2 用柠檬酸盐抗原修复液修复15 min，加入3%过氧化氢去除内源性过氧化物酶，磷酸盐缓冲溶液（PBS）冲洗，加入5%非免疫性动物血清温10 min，加入一抗，置于4℃冰箱过夜，次日使用蒸馏水、PBS 冲洗，加入二氨基联苯胺显色剂，使用PBS 冲洗终止显色，蒸馏水冲洗，DAB 显色，苏木素复染，封片后镜下观察。③分析不同病理特征（肿瘤数目、肿瘤最大径、TNM 分期、包膜侵犯、LNM）患者癌组织COX-2 的表达并进行比较。

COX-2 主要表达于细胞浆，根据染色强度和阳性细胞数进行评分，其中染色强度可分为0 分（无染色，阴性）、1 分（黄色，弱阳性）、2 分（褐色，阳性）；阳性细胞数可分为0 分（无阳性细胞）、1 分（1%～25%阳性细胞）、2 分（＞25%细胞数）。评分标准：两项评分总分≥2 分即为阳性，＜2 分则为阴性。选取2 名经验丰富的医师分别对检测结果进行评估，若结果存在差异，则经商讨后得出最终结果。

采用SPSS 21.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用独立样本t 检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2 检验；采用多因素Logistic 进行回归分析检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

HT 合并PTC 患者癌组织COX-2 阳性表达率高于癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 癌组织与癌旁组织的COX-2 阳性表达率[n（%）]

有包膜侵犯的HT 合并PTC 患者癌组织COX-2阳性表达率高于无包膜侵犯患者，有LNM 的HT 合并PTC 患者癌组织COX-2 阳性表达率高于无LNM癌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。不同肿瘤数目、直径、TNM 分期癌组织COX-2 阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

表2 COX-2 在淋巴结癌组织中的阳性表达率[n（%）]

将COX-2 表达作为自变量（1=阳性，0=阴性），将经病理特征分析得到的差异有统计学意义的变量作为因变量[包膜侵犯（1=是，0=否），LNM（1=是，0=否）]，Logistic 回归分析检验显示，COX-2 表达阳性可能是HT 合并PTC 患者癌组织包膜侵犯、LNM 的影响因素（OR＞1，P＜0.05）（表3）。

表3 COX-2 表达对HT 合并PTC 患者癌组织包膜侵犯、LNM 的影响

 

“-”表示无数据

PTC 的发生机制尚不明确，临床认为主要是与P53 基因突变、7 号染色体部分缺失或移位、TSH 受体基因缺陷及TSH、雌激素长期分泌过多促进癌细胞生长等因素有关，还可能是由HT 发展而来[6]。目前，临床治疗HT 合并PTC 主要以手术治疗为主，但若发生局部浸润及远处转移则会导致患者预后较差，易复发PTC，因而早期检测PTC 中的肿瘤标志物对于早期治疗及改善PTC 患者预后具有重要意义[7]。

COX-2 属于诱导型酶,正常情况下，COX-2 在多数人体组织中不表达，但当COX-2 受到生长因子、癌基因等刺激因素作用时，COX-2 可因受到诱导而增加表达。有研究证实，COX-2 与结直肠癌的发生发展具有紧密的联系，且与肿瘤大小、淋巴结转移情况等有一定关系[8]。由此推测，COX-2 表达可能与PTC 的发生发展也有一定的关联。本研究中，HT 合并PTC患者癌组织COX-2 阳性表达率高于癌旁组织，表明COX-2 异常高表达与HT 合并PTC 的病情发展及LNM 密切相关。分析其原因可能在于，COX-2 广泛存在人体组织细胞中，在正常组织细胞内的活性极低，但当细胞受到炎症刺激时，炎症细胞中的COX-2 水平升高，从而引起前列腺素2（PGE2）的含量增加[9-10]。而PGE2 可以抑制免疫细胞活性，引起免疫抑制，促进肿瘤细胞的增殖，故推测COX-2 可通过促进细胞增生，促进血管形成等参与HT 合并PTC 肿瘤的发生和发展[11]。

本研究分析比较不同病理特征HT 合并PTC 患者癌组织COX-2 阳性表达率发现，有包膜侵犯HT合并PTC 患者癌组织COX-2 阳性表达率高于无包膜侵犯患者，有LNMHT 合并PTC 患者癌组织COX-2阳性表达率高于无LNM 癌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。进一步经Logistic 回归分析检验提示，COX-2 表达阳性可能是HT 合并PTC 患者癌组织包膜侵犯、LNM 的影响因素。分析原因可能在于，COX-2可通过癌旁组织增加自身表达，当COX-2 高表达时可加重机体正常组织损伤，导致机体免疫功能下降，从而促进癌细胞生成，加重PTC 病情[12-13]。COX-2 水平过高可增加金属蛋白酶-2 的活性，从而激活金属蛋白酶-2 降解癌细胞外基质，并促进血管生成因子水平升高，导致肿瘤细胞的侵袭能力增加，最终促进癌细胞侵袭淋巴结而发生LNM[14-15]。COX-2 不仅能对肿瘤细胞产生刺激作用，促进肿瘤细胞的增殖，而且可以通过PI3K/Akt 信号通路的调控和反作用于PI3K/Akt 信号通路，使Akt 活性提升，刺激肿瘤血管生成，诱导包膜侵犯[16]。蔡海瑜等[17]研究显示，COX-2的表达的升高会促进癌细胞增殖，加快癌症进展，与本研究结论相符。

综上所述，COX-2 异常高表达与HT 合并PTC的病情发展密切相关，提示包膜侵犯及LNM 的发生，可依据COX-2 的表达情况预测HT 合并PTC 的病情严重程度。

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Expression and clinical significance of cyclooxygenase-2 in Hashimoto′s thyroiditis complicated with papillary thyroid carcinoma

DU Jia-wei
Department of General Surgery,Bengang General Hospital of Liaoning Provincial Health Industry Group,Liaoning Province,Benxi 117000,China

[Abstract]Objective To explore the expression and clinical significance of cyclooxygenase-2(COX-2)in Hashimoto′s thyroiditis(HT)combined with papillary thyroid carcinoma(PTC),in order to provide guidance for clinical diagnosis and treatment.Methods The paraffin specimens of 85 patients with HT and PTC in the Department of Pathology of Bengang General Hospital of Liaoning Health Industry Group from July 2019 to July 2020 were collected to detected the expression of COX-2.The positive expression rates of COX-2 in cancer tissues and adjacent tissues were compared,the clinical data of the patients were analyzed,the positive expression rate of COX-2 in cancer tissues of patients with different pathological characteristics [tumor number,tumor diameter,TNM stage,capsule invasion,lymph node metastasis(LNM)]were compared.Results The positive expression rate of COX-2 in cancer tissues of patients with HT combined with PTC was higher than that in adjacent tissues,the difference was significant statistically(P＜0.05).The positive expression rate of COX-2 in HT and PTC patients with capsule invasion was higher than that in patients without capsule invasion,the positive expression rate of COX-2 in HT patients with PTC and LNM was higher than that in patients without LNM,the differences were statistically significant(P＜0.05).There was no significant difference between the positive expression rate of COX-2 in cancer tissues of different tumor number,tumor diameter,TNM stage(P ＞0.05).Logistic regression analysis showed that the positive expression of COX-2 might be the influencing factor of capsule invasion and LNM in HT patients with PTC(OR＞1,P＜0.05).Conclusion The abnormally high expression of COX-2 is closely related to the disease development of HT combined with PTC,which may indicate the occurrence of LNM and capsule invasion.The severity of HT combined with PTC can be predicted based on the expression of COX-2.

[Key words]Hashimoto′s thyroiditis;Papillary thyroid carcinoma;Cyclooxygenase-2;Capsule invasion;Lymph node metastasis

[作者简介]杜佳伟（1983-），男，满族，辽宁铁岭人，硕士，主治医师，研究方向：普外科

（收稿日期：2020-09-28）