龋病是口腔临床常见和多发的细菌性疾病，我国的平均患龋率在38%左右，儿童的患龋率可高达76.6%[1-2]。口腔的主要致龋菌种为变形链球菌，参与龋病的发生与发展，并且在早期产生菌斑生物膜的过程中起到不可忽视的作用[3]。因此，对菌斑的产生进程进行有效抑制，阻碍变形链球菌等致龋菌的出现、繁殖可有效防治龋病。当前，氯已定、氟化物等在口腔领域内是公认的有较强抗菌能力的药物，若长期使用会造成口腔菌群紊乱，口苦、着色等不良反应，具有一定的局限性[4]。五倍子越来越被广泛用于龋病的防治中，但其浓度的选择不尽相同。本研究回顾性分析100 例龋病患者的临床资料，探讨不同浓度五倍子提取液对变形链球菌的影响，现报道如下。

回顾性分析2015年6月～2019年1月于我院治疗的100 例龋病患者的临床资料，根据患者治疗方式的不同将其分为A 组（n=40）、B 组（n=30）和C 组（n=30）。A 组中，男20 例，女20 例；年龄6～25 岁，平均（12.16±2.09）岁；病程1～5年，平均（2.50±0.49）年。B组中，男15 例，女15 例；年龄5～26 岁，平均（12.11±2.14）岁；病程1～6年，平均（2.52±0.44）年；C 组中，男16 例，女14 例；年龄6～25 岁，平均（12.15±2.10）岁；病程1～4年，平均（2.54±0.46）年。三组的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。

纳入标准：①患者均经临床确诊为龋病；②患者病历资料完整。排除标准：①合并其他口腔疾病者；②患传染性疾病者；③口腔严重感染者；④患有精神及意识障碍，不能配合采集口腔唾液者。

A 组患者使用院内自制的含氟漱口液漱口，使用中性或者酸性氟化钠配方，0.2% NaF（900 mg/LF-），10 ml/次，含漱1 min 后吐出，半小时内不进食或漱口，1 次/周。

B 组患者使用液体二倍稀释法稀释为16 mg/ml浓度的五倍子提取液漱口，10 ml/次，含漱1 min 后吐出，半小时内不进食或漱口，1 次/周。五倍子提取液的提取方法：五倍子可购于中药材市场；将1 kg 五倍子粉碎后置于60～70℃下用3 L 去离子水进行10 h 的水浴，并多次振摇、过滤，合并滤液，将活性碳加入其中脱色、过滤，直至滤液浓缩为稠膏状，获取五倍子原药；置入95%乙醇中后进行搅拌溶解、过滤，乙醇液减压浓缩得类白色粉末状物，然后冷冻干燥，获取五倍子水提取物纯品干粉；依据具体需求配制不同浓度五倍子水提取物溶液，分装后钴（Co）-60 照射备用，并放于棕色玻璃瓶4℃下避光储存[5]。

C 组患者使用液体二倍稀释法稀释为32 mg/ml浓度的五倍子提取液漱口，10 ml/次，含漱1 min 后吐出，半小时内不进食或漱口，1 次/周。五倍子提取液的提取方法同B 组。

三组患者均连续治疗3 个月，并进行为期半年的随访。

比较三组的细菌培养基中变形链球菌菌落数、不良反应发生情况及随访期间复发情况。

①变形链球菌菌落数：分别于治疗前后取患者口腔唾液制作细菌培养基，将口腔唾液样本在BHI 琼脂培养基上接种，放于37℃恒温厌氧箱（85% N2，10%H2，5% CO2）中培养24 h；选取单克隆菌株转种于内有5 ml BHI 培养液试管内，放于37℃YQX-Ⅲ型号的恒温厌氧箱中（上海乔跃电子科技有限公司）持续培养24 h，制备菌悬液，调整浓度为100 CFU/ml 备用。对变形链球菌菌落数进行计数，每组实验重复3次，取平均值。②不良反应总发生率：统计并比较三组患者治疗期间口腔神经损伤、氟牙症、氟中毒等并发症总发生率。③复发率：统计并比较三组患者随访期间龋病复发情况，龋病治愈后又开始发展为浅龋（外表白垩色或黑褐色，探之有粗糙感或表面缺损、质地松软），或出现自觉症状（对冷、酸、热、甜可出现激发性痛，刺激去除，症状消失）为复发。

采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，三组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用独立样本t 检验，组内比较采用配对样本t 检验； 计数资料用率表示，组间比较采用χ2 检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

治疗前，三组细菌培养基中的变形链球菌菌落数比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，三组细菌培养基中的变形链球菌菌落数均少于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，C 组的细菌培养基中变形链球菌菌落数少于A、B 组，差异有统计学意义（P＜0.05）； 治疗后，B 组细菌培养基中的变形链球菌菌落数少于A 组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

三组患者均未出现氟中毒，C 组患者治疗期间的不良反应总发生率低于A 组，差异有统计学意义（P＜0.05）；B 组患者治疗期间的不良反应总发生率低于A组，差异有统计学意义（P＜0.05）；C 组患者治疗期间的不良反应总发生率与B 组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

C 组患者随访期间的复发率为0.00%（0/30），低于A 组的20.00%（8/40），差异有统计学意义（χ2=6.774，P=0.009）；B 组患者随访期间的复发率为3.33%（1/30），低于A 组，差异有统计学意义（χ2=4.250，P=0.039）；C组患者随访期间的复发率与B 组比较，差异无统计学意义（χ2=1.017，P=0.313）。

龋病是口腔临床常见和多发的细菌性疾病，是导致中国人失牙的第二大病因[6]。引发口腔疾病的主要致龋菌为变形链球菌、黏性放线菌、血链球菌等。其中变形链球菌在龋病的产生中起到最为主要的作用，在早期产生菌斑生物膜中作用也十分明显。一般而言，没有致龋菌，就不会引起龋病。菌斑生物膜这种特定的生态环境是致龋菌赖以生存的基础，因此对菌斑的形成进行控制，对变形链球菌等致龋菌的生长繁殖进行有效的抑制能有效防治龋病[7]。

以往临床多使用氟化物防龋，氟可以较为明显的降低患龋率，是当前全球范围内公认的最有效的防龋手段之一[8]。但如果对水、牛奶及食盐中的有效浓度不能严格进行控制会引发氟牙症、氟骨症等，且长时间使用含氟牙膏会产生耐氟菌株，不利于防龋。因此，寻求一种无毒副作用并具有防龋功能的方式来防治龋病十分重要。中草药为自然生药，其抗菌作用一般比抗生素和化学药剂弱，但对机体副作用小，有着较弱的耐药性，且对需氧菌以及厌氧菌抗菌效果好，故用中草药治疗感染性疾病有较大的优势[9-10]。其中五倍子对细菌的抑制作用早已得到证实，在口腔领域中的应用已备受关注。五倍子具有敛肺降火、 涩肠止泻、收湿敛疮等功效，抗菌性能好，且毒副作用相对较小[11-12]。同时五倍子提取物不但能抑制致龋菌，也能对牙齿硬组织产生影响。因为五倍子中主要化学成分为鞣质，有抑制细菌、络合、抗氧化等多重功效，口腔科学者们将五倍子用于口腔领域，发现其对各种口腔常见致病菌有抑制作用，同时能够抑制脱矿，促进再矿化[13-14]。且有体外和动物实验研究表明在五倍子对龋病防治、牙周病治疗、根管消毒等方面有着巨大的潜力[15]。本研究结果显示，治疗后，三组细菌培养基中的变形链球菌菌落数均少于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，B、C 组细菌培养基中的变形链球菌菌落数少于A 组，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，C 组细菌培养基中的变形链球菌菌落数少于B 组，差异有统计学意义（P＜0.05）；B、C 组患者治疗期间的不良反应总发生率均低于A 组，差异有统计学意义（P＜0.05）；B、C 组患者随访期间的复发率均低于A 组，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示32 mg/ml的高浓度五倍子提取液用于龋病患者的临床治疗中，能有效减少变形链球菌菌落数，对变形链球菌的抑菌作用更强，且能有效降低不良反应总发生率以及复发率，安全性较高，治疗效果较好。

综上所述，在龋病患者中使用32 mg/ml 高浓度五倍子提取液的抑菌效果较好，能有效提高抑制链球菌的效果，降低不良反应发生率以及复发率，安全性较高。

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In vitro study on the effect of different concentrations of Gallnut extract on streptococcus mutans

YU Jing DENG Wei▲
Department of Stomatology, the First Hospital of Nanchang City, Jiangxi Province, Nanchang 330008, China

[Abstract] Objective To investigate the effect of different concentrations of Gallnut extract on streptococcus mutans.Methods The clinical data of 100 patients with caries who were treated in our hospital from June 2015 to January 2019 were retrospectively analyzed and divided into group A (rinse the mouth with fluoride mouth rinse, 40 cases), group B(rinse the mouth with 16 mg/ml Gallnut extract, 30 cases) and group C (rinse the mouth with 32 mg/ml Gallnut extract,30 cases) according to the different treatment methods. The saliva of the patients was taken to make bacterial culture medium before treatment and after treatment for 3 months. The number of streptococcus mutans colony in bacterial culture medium, the total incidence of adverse reactions and the recurrence rate during follow-up were compared among the three groups. Results The number of streptococcus mutans colony in bacterial culture medium in three groups after treatment was fewer than those before treatment, and the differences were statistically significant (P＜0.05). The number of streptococcus mutans colony in bacterial culture medium in group B and C after treatment was fewer than those in group A, and the differences were statistically significant (P＜0.05). The number of streptococcus mutans colony in bacterial culture medium in group C after treatment was fewer than that in group B, and the difference was statistically significant (P＜0.05). The total incidence rates of adverse reactions in group B and C were lower than those in group A, and the differences were statistically significant (P＜0.05). The recurrence rates during follow-up in group B and C were lower than those in group A, and the differences were statistically significant (P＜0.05). Conclusion Applying 32 mg/ml of high concentration of Gallnut extract to the clinical treatment of patients with caries can effectively decrease the number of streptococcus mutans colony, have a stronger antibacterial effect on streptococcus mutans, and reduce the incidence of adverse reactions and recurrence rate, which has higher safety and better curative effect.

[Key words] Caries; Gallnut extract; Different concentrations; Number of streptococcus mutans colony; Bacterial culture; Antibacterial; Adverse reactions; Recurrence

[中图分类号] R781.1

[文献标识码] A

[文章编号] 1674-4721（2020）10（b）-0130-04

[基金项目]江西省南昌市指导性科技计划项目（[2014]196 号）

[作者简介]余晶（1984-），女，汉族，江西吉安人，硕士，主治医师，主要从事牙体牙髓方向的研究

▲通讯作者：邓蔚（1972-），女，汉族，江西南昌人，本科，主任医师，主要从事牙体修复方向的研究

（收稿日期：2020-02-25）