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肺癌是临床上常见的恶性肿瘤，病死率位居我国恶性肿瘤首位[1]。手术治疗肺癌是临床上常见的方法，但由于肺癌早期病情隐匿，无显著特征，多数患者确诊时已至中晚期，错过了手术治疗最佳时期[2]。对于中晚期肺癌患者而言，缓解临床症状、延长生存期、提高生活质量是治疗的关键所在。化疗是治疗中晚期肺癌的常见方法，其能够延长患者的生存时间，但化疗周期漫长，化疗过程中易引起多种不良反应，患者往往难以耐受[3]，故需寻找有效的治疗方案以提高其生活质量。杀伤细胞（CIK）作为新型的治疗手段，被广泛应用于恶性肿瘤的治疗中，能显著提高患者的免疫力[4]。但对CIK 联合化疗能否显著改善中晚期肺癌患者的免疫功能，学界鲜有研究。基于此，本研究选取上海市某医院收治的110 例中晚期肺癌为研究对象，旨在探讨CIK 细胞联合化疗治疗的临床应用价值，现将结果汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年5月～2019年4月上海市某医院肿瘤科收治的110 例中晚期肺癌患者为研究对象，采用双盲法将入选患者分为联合组与化疗组，每组各55例。联合组中，男37 例，女18 例；年龄35～70 岁，平均（61.12±7.81）岁；肿瘤分期：Ⅲ期30 例，Ⅳ期25 例；病理类型：腺癌29 例，鳞癌16 例，腺鳞癌4 例，小细胞癌6例。化疗组中，男35 例，女20 例；年龄35～71 岁，平均（61.23±7.97）岁；肿瘤分期：Ⅲ期32 例，Ⅳ期23 例；病理类型：腺癌28 例，鳞癌17 例，腺鳞癌5 例，小细胞癌5 例。两组患者的一般资料如年龄、性别、病理分型及肿瘤分期等比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经患者及家属知情同意，且经医院医学伦理委员会批准同意。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：①经病理活检确诊为肺癌；②符合美国国立综合癌症网络（NCCN）指南相关诊断标准[5]；③Karnofsky 功能状态评分（KPS）＞60 分；④临床资料完整；⑤心电图结果显示正常。排除标准：①精神疾病者；②合并其他恶性肿瘤者；③凝血功能障碍；④自身性免疫性疾病者；⑤入组本实验前接受放化疗者；⑥妊娠期女性；⑦哺乳期女性；⑧本实验化疗药物过敏者。

1.3 方法

化疗组给予1000 mg/m2 的吉西他滨（南京正大天晴制药有限公司，国药准字H20093404，生产批号：20100303）治疗，静脉注射，1 h 内注射完成；第1 天和第8 天，给予75 mg/m2 的顺铂（齐鲁制药有限公司，国药准字H37021362，生产批号：2015613）治疗，静脉注射，第1～3 天。每3 周重复上述治疗方法1 次，21 d为1 个疗程，连续治疗4 个疗程。

联合组在化疗的基础上联合CIK 治疗，在无菌层流实验室进行CIK 的制备，抽取患者空腹外周血5 ml，从血液中提取单核细胞，依据细胞计数结果调整刺激细胞活化扩增混合培养液的体积，将接种细胞的浓度保持在1×106/ml。进行培养细胞，48 h 后，等体积补加含白介素-2（IL-2）的无血清培养基，以后根据细胞取样计数结果，补充适量含IL-2 的无血清培养基。7 d后，细胞表型变化情况采用流式细胞仪进行检测，并对细胞密度进行调整，在细胞培养14 d 后收获细胞。在化疗的基础上给予患者CIK 治疗，分次给患者回输CIK，每次回输的细胞数量在3×109/ml 以上，回输后，根据患者的免疫状态给予其适量的皮下注射IL-2 及胸腺肽，每周给患者回输CIK 细胞1 次，4 次为1 个疗程，连续治疗3 个疗程。

1.4 观察指标及评价标准

比较两组的疗效，观察两组患者治疗前后的免疫功能、B7H4 蛋白水平，具体如下。

1.4.1 疗效判定标准治疗后，肿瘤完全消失为完全缓解；治疗后，肿瘤消退50%以上，未产生新病灶为部分缓解；治疗后，肿瘤消退在50%及以下为稳定；治疗后，肿瘤增大24%以上或产生新病灶为进展[6]。总有效率=（完全缓解+部分缓解）例数/总例数×100%。

1.4.2 免疫功能抽取患者治疗前后的外周血5 ml，采用流式细胞仪（美国BD 公司）对两组患者的CD4+、CD4+/CD8+指标水平进行检测，比较患者的免疫功能。同时采用酶联免疫吸附试验对肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）进行检测。

1.4.3 B7H4 蛋白采用酶联免疫吸附试验（海哈灵生物科技有限公司）对两组患者治疗前后外周血中B7H4蛋白水平进行检测。

1.5 统计学方法

采取SPSS 22.0 统计软件对数据进行分析。其中，计量资料以均数±标准差（

±s）表示，采用t 检验，计数资料采用频数或百分率表示，采用χ2 检验，等级资料采用秩和检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者疗效的比较

联合组的总有效率高于化疗组，疗效优于化疗组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 两组患者疗效的比较[n（%）]

2.2 两组患者治疗前后免疫功能及CEA 水平的比较

两组患者治疗前的CD3+、CD4+/CD8+水平及CEA水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，联合组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平高于本组治疗前及化疗组，CEA 水平低于本组治疗前及化疗组，差异有统计学意义（P＜0.05）；化疗组治疗后的CD3+、CD4+/CD8+水平高于治疗前，CEA 水平低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；化疗组治疗前后的CD4+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

表2 两组患者治疗前后免疫功能及肿瘤标志物CEA 水平的比较（

±s）

2.3 两组患者治疗前后B7H4 蛋白水平的比较

两组患者治疗前的B7H4 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组患者治疗后的B7H4 水平低于治疗前，且联合组治疗后的B7H4 水平低于化疗组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表3）。

表3 两组患者治疗前后B7H4 蛋白水平的比较（

±s）

3 讨论

肺癌属于恶性肿瘤，约占总体癌症的11.6%[7]，本病死亡率也较高，约占总体癌症死亡总数的18.4%。研究统计显示，在新增肺癌210 万例中，有180 万人死亡。肺癌中，约85%的患者为非小细胞肺癌，肺腺癌及鳞状癌均是最常见的亚型[8]。肺癌病因较为复杂，考虑与环境、激素、基因变异、吸烟等密切相关，但其主要发病因素与患者的吸烟史有关。研究显示，约有80%以上的肺癌患者存在长期吸烟行为[9]。手术是治疗肺癌的有效方法，随着社会的发展，虽然治疗肺癌技术日益成熟，但由于本病早期无显著特征，一经确诊，患者已到中晚期，手术治疗无法将肿瘤完全切除[10-12]，故化疗成为了术后常见的治疗方法。化疗主要以吉西他滨、卡铂、顺铂类等药物作用于肿瘤部位，可延长患者生存期，但化疗过程较为痛苦，易产生多种不良反应，故需寻找有效的治疗方法。

CIK 具有T 淋巴细胞强大的抗肿瘤活性与限制性杀死肿瘤的特点[13]，其与化疗联合应用能减轻毒副作用，提高患者的生活品质，在肝癌、肺癌、宫颈癌等各类癌症中均得到了广泛的应用，且疗效显著[14]。本研究显示，与化疗组相比，联合组的总有效率显著提高，提示在化疗的基础上联合CIK 治疗中晚期肺癌效果显著。

有研究显示，肿瘤患者外周血的T 淋巴细胞亚群数量存在明显异常，其中CD3+、CD4+数量明显减少[15]。肿瘤患者的细胞免疫功能受到抑制，无法识别和杀死肿瘤细胞，故造成肿瘤的复发与转移，提示有效评价T 淋巴细胞亚群有助于了解患者自身的免疫状态，可以帮助医师进行合理的后续治疗。本研究显示，两组治疗前的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，联合组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均高于化疗组（P＜0.05），提示CIK 联合化疗可显著提高中晚期肺癌患者的免疫功能。究其原因在于CIK 输注后，T 淋巴细胞比例显著增高或接近正常，患者免疫功能显著增强。

B7H4 蛋白在各种肿瘤组织中呈现高表达[16-17]，其与T 细胞表面受体相结合，使得T 细胞活化功能产生抑制，导致机体免疫功能下降[18]。研究显示，B7H4 表达与肿瘤预后成负相关[19-20]，故检测B7H4 蛋白水平可有效评估肿瘤患者的预后情况。本研究显示，治疗后，化疗组的B7H4 蛋白水平呈现下调趋势，与化疗组比较差异显著（P＜0.05），提示CIK 联合化疗能显著下调B7H4 蛋白水平，改善患者预后。

综上所述，CIK 联合化疗应用于中晚期肺癌中具有理想的疗效，能显著提高患者的免疫功能，促进患者预后。

[参考文献]

[1]刘畅，赵晓珍，王中奇，等.肺岩宁方联合抗瘤增效方对中晚期肺腺癌患者化疗后癌因性疲乏、免疫功能及肿瘤标志物影响的临床研究[J].上海中医药杂志，2019，52（6）：49-53.

[2]苏越，宋涛.心理干预对中晚期肺癌患者心理痛苦、行为功能及生活质量的影响[J].癌症进展，2019，17（4）：117-119.

[3]童琳，丁宁，李佳旻，等.晚期肺癌患者胸腔积液上清液中肿瘤游离DNA 检测肿瘤突变负荷的研究[J].中华结核和呼吸杂志，2019，42（8）：596-601.

[4]Portan DV，Deligianni DD，Papanicolaou GC，et al.Combined Optimized Effect of a Highly Self-Organized Nanosubstrate and an Electric Field on Osteoblast Bone Cells Activity[J].Biomed Res Int，2019，21：7574635.

[5]2015 版美国国立综合癌症网络（NccN）指南：非小细胞肺癌更新要点[J].实用心脑肺血管病杂志，2015，3（2）：55.

[6]王蓉，郭伟，宋霞.血清癌胚抗原水平及表皮生长因子受体突变状态与晚期肺腺癌患者脑转移的关系[J].肿瘤研究与临床，2019，31（8）：556-559.

[7]Mariglia J，Momin S，Coe IR，et al.Analysis of the cytotoxic effects of combined ultrasound，microbubble and nucleoside analog combinations on pancreatic cells in vitro[J].Ultrasonics，2018，9（89）：110-117.

[8]李晓黎，吴坤荣，尹影，等.奈达铂致肺癌患者骨髓抑制的危险因素研究[J].药物不良反应杂志，2020，22（4）：239-246.

[9]Schmidt J，Appold S，Troost EGC.Impact of prophylactic cranial irradiation on overall survival of patients with advanced non-small-cell lung cancer[J].Strahlenther Onkol，2019，195（5）：453-456.

[10]白馨雅，张金梦，孙洋，等.免疫检查点抑制剂在晚期非小细胞肺癌综合治疗中的应用[J].国际肿瘤学杂志，2019，46（8）：500-504.

[11]刘玉娟.综合护理干预对中晚期肺癌患者生活质量的影响[J].西部中医药，2018，31（3）：116-119.

[12]安青，吴燕波，李伟兵，等.补精解毒方联合化疗治疗老年中晚期非小细胞肺癌40 例[J].西部中医药，2018，31（10）：76-79.

[13]Arbour KC，Jordan E，Kim HR，et al.Effects of co-occurring genomic alterations on outcomes in patients with KRASmutant non-small cell lung cancer[J].Clin Cancer Res，2018，24（2）：334-340.

[14]王大权，毕楠，王绿化.局部晚期非小细胞肺癌放疗剂量提升研究进展[J].中华放射肿瘤学杂志，2019，28（10）：788-791.

[15]张政，杨金红，荆晨晨，等.肺癌晚期患者死亡风险预测评分系统的构建及评价[J].护士进修杂志，2019，34（23）：2122-2126.

[16]Lei CS，Hou YC，Pai MH，et al.Effects of quercetin combined with anticancer drugs on metastasis-associated factors of gastric cancer cells： in vitro and in vivo studies[J].J Nutr Biochem，2018，51：105-113.

[17]李恩谦，张亚明，廖子静.中西医结合治疗中晚期肺癌患者的疗效[J].中国肿瘤临床与康复，2019，26（2）：80-82.

[18]黄建清，何爱国，李亮，等.复方斑蝥胶囊联合GP 方案治疗中晚期肺鳞癌的临床效果[J].实用癌症杂志，2019，34（6）：968-970.

[19]帕哈尔丁·白克热，黄伍奎，刘墨，等.CT 引导下125I 粒子植入联合化疗治疗中晚期肺癌的疗效及对血清肿瘤标志物影响[J].疑难病杂志，2019，18（8）：795-799.

[20]苏宁，张贤兰，黄惠怡，等.晚期肺腺癌驱动基因分布及其一线治疗现状——单中心真实世界研究[J].实用医学杂志，2019，35（4）：537-540.