泌尿生殖道感染女性患者宫颈分泌物和白带常见病原微生物的感染情况及特点
徐洁玲 方运香 余锦燕
广东省惠州市惠东县人民医院,广东惠东 516300
[摘要]目的 探讨泌尿生殖道感染女性患者宫颈分泌物中淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)与白带常见病原微生物的感染情况及特点。方法 选择2015年1月~2017年9月我院收治的100例泌尿生殖道感染女性患者展开研究,采用实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)、常规培养法、革兰染色法等方法检测,观察患者宫颈分泌物中NG、CT、UU和白带常见病原微生物的感染情况与特点。结果UU的阳性检出率均明显高于NG、CT,差异有统计学意义(P<0.05)。在对患者白带进行检测中,革兰阳性小杆菌的阳性检出率更高(P<0.05)。在混合感染阳性检出率中,仅检出CT+UU混合感染类型,而在白带混合感染呈阳性检测中,相对于其他类型,革兰阳性小杆菌+革兰阴性杆菌混合感染阳性检出率表现更突出 (P<0.05)。结论 泌尿生殖道感染女性患者宫颈分泌物中,NG、CT、UU和白带常见病原微生物均存在程度不一的感染表现,其检出率亦存在明显差异,经混合感染后更加复杂,提示临床需重视。
[关键词]泌尿生殖道感染;淋病奈瑟菌;沙眼衣原体;解脲脲原体;白带病原微生物;感染情况;感染特点
随着临床研究的不断深入,针对性传播疾病(STD)的病原菌已逐渐清晰,其中淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)是现阶段临床公认的主要病原菌,可引起妇女泌尿生殖道感染,是导致不孕的主要因素之一[1-2]。本研究选择我院收治的100例泌尿生殖道感染女性患者展开研究,探讨泌尿生殖道感染女性患者宫颈分泌物中NG、CT、UU与白带常见病原微生物的感染情况及特点,旨在为临床治疗工作提供参考,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2015年1月~2017年9月我院收治的100例泌尿生殖道感染女性患者展开研究,年龄18~60岁,平均(30.8±5.1)岁;既往无生育史者39例,有生育史者61例。纳入标准:本组患者入院均行病理学、影像学检查确诊,符合临床对泌尿生殖道感染的诊断标准,本研究经医院医学伦理委员会审核批准,患者对于研究内容知情并自愿签署同意书。排除标准:伴有其他类型阴道疾病者;伴有全身血液性疾病者;伴有精神疾病者;存在意识不清晰或依从性较差者。
1.2 方法
①采用荧光定量PCR仪(罗氏LightCycler 480型)行实时荧光定量PCR法,对NG、CT予以检测,即在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,生成SYBR定量PCR扩增荧光曲线图与PCR产物熔解曲线图。所用试剂分别为NG、CT核酸检定试剂盒(上海之江生物科技股份有限公司提供);阳性判定标准:FAM通道CT不足38,且显示扩增曲线呈“S线”型[3-4]。②采用常规培养法对UU检测,选择郑州安图生物工程股份有限公司提供的UU检测试剂盒,依据试剂盒说明书内容操作;阳性判定依据:培养液由黄色转变红色,且培养液保持透明清澈为准。③采用淋球菌选择性巧克力平板 (法国梅里埃产品)及NH鉴定板条(法国梅里埃产品)对宫颈分泌物进行NG的培养及鉴定。④对于白带的检测采用革兰染色法完成,采用无菌棉拭子对患者阴道后穹隆处与宫颈口等部位分泌物采集,随后将其涂抹玻片,待干染色后镜检[5],染色试剂由珠海贝索有限公司提供。
1.3 统计学方法
采用SPSS 21.0统计学软件对数据进行分析,正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验,计数资料以率表示,采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 患者病原微生物阳性检出率分析
UU的阳性检出率均明显高于CT、NG,差异有统计学意义(P<0.05)。在对患者进行白带检测中,革兰阳性小杆菌的阳性检出率更高(P<0.05)(表 1)。
表1 患者病原微生物阳性检出率分析
与UU比较,*P<0.05;与革兰阳性小杆菌比较,#P<0.05
2.2 患者混合感染阳性检出率分析
本组共检出27例混合感染阳性,其中仅检出CT+UU混合感染类型;而在白带混合感染呈阳性检测中,相对于其他类型,革兰阳性小杆菌+革兰阴性杆菌混合感染阳性检出率表现更突出(P<0.05)(表2)。
表2 患者混合感染阳性检出率分析
与CT/UU比较,χ2=4.19,*P<0.05;与革兰阳性小杆菌/革兰阴性杆菌比较,▽χ2=5.27,▽P<0.05;与革兰阳性小杆菌/革兰阴性杆菌比较,#χ2=7.18,#P<0.05; 与革兰阳性小杆菌/革兰阴性杆菌比较,△χ2=9.62,△P<0.05
3 讨论
随着临床对泌尿生殖道感染研究的不断深入,STD致病微生物、病原菌愈发明确,较为突出表现在NG、CT、UU三种[6]。其中NG又有淋球菌之称,属于严格类型的人体寄生菌种类,多见于急性尿道炎、阴道炎等疾病脓性分泌物的白细胞内,此菌种形态染色与脑膜炎球菌类似,经感染后可引起泌尿生殖系统化脓性感染,形成性传播疾病,即淋病[7]。NG的微生物学检查主要采取尿道脓性分泌物涂片,后经革兰染色镜检确诊,如在中性粒细胞中发现革兰阴性双球菌时,诊断价值确切。CT则属于微生物类型,可经性接触传播,这与沙眼生物变种D~K血清型机制有关[8]。现阶段的研究发现其存在15个血清型,随着血清型的不同,可引起不同类型的疾病。人类是沙眼衣原体自然宿主,CT主要寄生于机体黏膜上皮细胞内,随着临床检验学的进步,沙眼衣原体可于细胞培养液中生长,现多采用McCoy或HeLa229细胞株,在接种衣原体前,以X线照射细胞,或于细胞培养中加入代谢抑制如细胞松弛素B、DEAE葡聚糖呈放线菌酮,其目的在于减缓细胞生长代谢,以利于衣原体的寄生性生长[9]。UU属于泌尿生殖道感染的主要病原体之一,多数患者为表面感染,正常情况下不会侵入血液,但对于其致病机制尚未完全阐述,目前多数认为可能与侵袭性酶和毒性产物有关[10]。
本研究中,UU呈阳性检出率较高,其次为NG,相对而言CT检出率较低,这与蓝惠华等[10]的研究结果存在一定差异。分析原因,除了本次研究样本量较少外,地区感染、感染情况、病原体不同等因素导致阳性检出率亦存在一定差异,建议进一步大样本研究证实。此外,在混合病原菌微生物方面,CT+UU检出呈阳性率更高,这可能与泌尿生殖道微生物与宿主间相互作用有关,CT多寄生于人体真核细胞内,受到感染后,泌尿生殖道黏膜出现破损,人体抵抗能力逐渐下降,加上UU的黏附,故更易被检出[11]。两者持续感染后,可引起子宫内膜炎症反应,吞噬细胞不断聚集,加上白细胞大量浸润,并不断吞噬炎性子宫内膜细胞,进一步诱发自身免疫反应,引起白带异常[12]。本组患者白带方面提示泌尿生殖道混合感染相对复杂,需要进一步深入的微生物学研究。此外,王丽[13]的研究显示,在年龄方面,CT、UU感染峰值突出在20~40岁,这与应小君等[14-15]的研究结果一致。分析原因,这与该年龄阶段正处于性行为活跃的育龄阶段有关,导致CT、UU感染风险增加。
综上所述,泌尿生殖道感染女性患者宫颈分泌物中NG、CT、UU和白带常见病原微生物均存在程度不一的感染表现,其检出率亦存在明显差异,经混合感染后更加复杂,且各年龄阶段感染率均较高,提示临床需重视。
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Infection and characteristics of common pathogenic microorganisms in cervical secretions and leucorrhea in female genitourinary tract infection
XU Jie-ling FANG Yun-xiang YU Jin-yan
People′s Hospital of Huidong County of Huizhou City in Guangdong Province,Huidong 516300,China [Abstract]Objective To investigate the infection and characteristics of cervical secretions including Neisseria gonorrhoeae(NG),Chlamydia trachomatis(CT),Ureaplasma urealyticum(UU)and common pathogenic microorganisms from leucorrhea in genitourinary tract infection women.Methods From January 2015 to September 2017,a total of 100 female patients with genitourinary tract infection admitted to our hospital were studied.By real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction(FQ-PCR),conventional culture,Gram staining,the infection and characteristics of cervical secretions including NG,CT,and UU and common pathogenic microorganisms from leucorrhea were observed.Results The positive rate of UU was significantly higher than that of NG and CT,with statistical differences(P<0.05).In detection of leucorrhea,the positive rate of Gram-positive dialister bacteria was higher(P<0.05).In the positive detection rate of mixed infection,only mixed type of CT+UU was detected.For positive detection of leucorrhea mixed infection,compared with other types,the positive detection rate of mixed infection of Gram-positive dialister bacteria+Gram-negative bacteria was more prominent(P<0.05).Conclusion NG,CT,UU of cervical secretions and common pathogenic microorganisms of leucorrhea in female genitourinary tract infection patients all display varying degrees of infection.The detection rate is also significantly different.After mixed infection,it is more complicated,suggesting that it should be paid attention in clinic.
[Key words]Genitourinary tract infection;Neisseria gonorrhoeae;Chlamydia trachomatis;Ureaplasma urealyticum;Leucorrhea pathogenic microorganism;Infection;Infection characteristics
[中图分类号]R446.5
[文献标识码]A
[文章编号]1674-4721(2018)3(c)-0120-03
(收稿日期:2017-12-25
本文编辑:祁海文) |