施振岗

江西省景德镇市第三人民医院检验科，江西景德镇 333001

[摘要]目的分析比较电化学发光免疫法（ECLIA）和酶联免疫法（ELISA）检测乙型病毒性肝炎（HBV）标志物检测结果的准确性。方法选取2015年1月～2017年1月在我院就诊的160例乙型肝炎患者，随机分为观察组（80例）和对照组（80例）。观察组使用ECLIA法，对照组使用ELISA法，比较两组的HBV标志物阳性率，再在观察组中选取HBsAg/Ab和（或）HBeAg/Ab双阳性的患者，采用ELISA法检测，观察其检测结果。结果观察组的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb阳性率分别为 100.0%、52.5%、76.3%、78.8%，均高于对照组的 92.5%、45.2%、52.5%、50.0%，差异有统计学意义（P＜0.05）；ECLIA法对s和（或）e系统双阳性的患者检出76例，相比之下，ELISA法只检出9例。结论ECLIA法检测乙肝病毒感染的结果较ELISA法更准确，值得临床推广应用。

[关键词]电化学发光免疫法；酶联免疫法；乙型病毒性肝炎

我国的乙型肝炎发病率较高，约有12%为平时无自觉症状的乙肝病毒表面抗原（HBsAg）携带者[1]，乙肝感染者如不及时治疗，可发展为肝炎、肝硬化、肝癌等重大疾病[2]，因而准确地诊断乙肝病毒（HBV）标志物，选取敏感度和特异度高的检测方法，对及时防治乙肝有着重要的意义。以前在临床多采取酶联免疫吸附法 （ELISA）检测乙肝的5项病毒标志物，即检测HBsAg、乙肝表面抗体（HBsAb）、乙肝 e 抗原（HBeAg）、乙肝 e抗体（HBeAb）和乙肝核心抗体（HBcAb）来判断患者的病情及治疗效果；但其仅为定性分析，对患者病情和疗效的动态监测效果不甚理想，比如在样本HBsAg浓度过高时的假阴性和浓度过低时因灵敏度差而漏诊，对于复杂感染的乙肝患者还会出现误诊[3]。目前的电化学发光免疫法（ECLIA法）因其操作使用方便，快速，灵敏度和特异性均较为理想等优势被逐渐应用于临床。研究显示，ECLIA检测HBV感染的灵敏度已超过放射免疫的水平。ELISA法检测乙肝五项时，表面抗原/抗体以及e抗原/抗体同时阳性者发生率低，而有报道称ECLIA法检测时该情形的发生率有所上升。本研究通过分析两种检测方法结果的准确性，得出了与预期相符的结果，现报道如下。

1.1 一般资料

随机抽取2015年1月～2017年1月在我院感染科就诊并确诊的160例乙型肝炎患者，所有入选患者均经本人或其监护人知情同意，诊断和分型按中华医学会的相关病毒性肝炎防治方案[4]，其中男104例，女56 例；年龄 17～64 岁，平均（41．2±4．9）岁。 采用随机数字表法将入选患者分为观察组和对照组，各80例。对照组中，男 52 例，女 28 例；年龄 17～61 岁，平均（43．5±4．8）岁。 观察组中，男 52 例，女 28 例；年龄 23～64 岁，平均（39．1±3．5）岁。两组的性别、年龄及其他乙肝相关指标等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方法

所有患者当天空腹抽血，抽取静脉血5 ml，快速离心分离血清后置于－60℃的冰箱内保存。患者血清样本均未出现溶血、胆红素高、血脂高等症状，于抽取2 d内检测HBV标志物，其中观察组使用ECLIA法，采用罗氏公司的Elecsys 2010全自动电化学发光免疫分析仪及相应的试剂盒、定标液、质控品；对照组使用ELISA法，采用厦门新创公司的试剂及芬兰Rayto的MK3酶标仪，以上操作严格遵循产品的使用手册进行检测，安排专人完成。比较两组标志物的阳性率，然后选取观察组ECLIA法检测者HBsAg和HBsAb均阳性和（或）HBeAg和HBeAb均阳性的患者，采用ELISA法检测乙肝5项，分析其结果。

1.3 评价标准

各项病毒标志物阳性标准[5]如下：HBsAg和HBeAg的COI≥1为阳性，其中＜20为弱阳性，＜1为阴性；HBsAb的COI≥10 IU/L为阳性，其中＜50 IU/L为弱阳性，＜10 IU/L为阴性；HBeAb和 HBcAb的 COI≤1为阳性，＞1为阴性，其中＞0.5为弱阳性，这是因为ECLIA法测血清乙肝抗体HBeAb和HBcAb的手段为竞争法原理，即让血清乙肝抗体与试剂中标记过的抗体竞争相应抗原，再将未结合的物质清洗下来，然后用电极加压、光电倍增、与定标液对比的方法对化学发光进行定量测定，所以发光强表示血清乙肝抗体阴性，反则阳性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 15.0统计学软件对数据进行分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，采用 t检验，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 两组相关标志物阳性率的比较

观察组的 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 阳性率分别为100.0%、52.5%、76.3%、78.8%，均高于对照组的92.5%、45.2%、52.5%、50.0%，差异有统计学意义（P＜0.05）（表 1）。

表1 两组相关标志物阳性率的比较[n（%）]

2.2 ELICA法检测乙肝s和（或）e系统双阳性结果分析

如表2所示，序号1～6组即在观察组符合要求的76例患者中，有72例标志物的某一项为弱阳性，在用ELISA法检测时，只有序号2、4、5的结果共计9例s和（或）e系统双阳性，其余67例为序号7～10组的检测结果。

表2 ELICA法测乙肝s和（或）e系统双阳性结果分析（n）

目前对HBV在体内长期生存，逃离机体免疫的机制尚不清楚，因而及时、准确地诊断HBV的感染，防止HBV的传播十分重要。ELISA法的定性检测敏感性、特异性易受各种因素影响，出现假阴性结果[6]。ECLIA法标志物为二价的三联吡啶钌[7]，其与HBV抗体、抗原结合，电极加压后，发生电化学发光，且发光强度与被检物的浓度成线性关系[8]。由于该标志物稳定性好，是液相反应，反应体系稳定[9]，使得ECLIA法具有敏感、特异、精密、稳定、快速、自动等特点[10]。

本研究结果显示，ECLIA法定量检测80例HBV标志物，结果阳性率高于ELISA法，其中有76例存在HBsAg/Ab和（或）HBeAg/Ab双阳性，将这76例血清采用ELISA法定性检测，只出现9例HBsAg/Ab和（或）HBeAg/Ab同时阳性，提示曾经广泛应用的ELISA法检测HBV标志物对上述情形的检出率较低，而ECLIA法的检出率较高，较为合理的解释是灵敏度的差异所致[11]，因此要更深一步地认识HBV血清学模式，如患者处于病毒急性感染的恢复期或慢性期，形成了免疫复合物；或是体内存在大于等于两种亚型的感染、病毒株变异等[12]。ECLIA检测HBsAb可帮助预防接种乙肝疫苗的判断，如已接种乙肝疫苗的健康者在用ELISA法检测HBsAb时，相关研究显示，HBsAb＜35 mU/ml者会出现假阴性的结果[13]，这可能会被误以为接种疫苗后未产生抗体，实际被检者体内已产生抗体，且当HBsAb＞10 mU/ml时即可对HBV感染起到保护作用，通过ECLIA法可避免这一情况的出现，从而更加准确地动态监测疫苗接种后HBsAb的变化[14]。

ECLIA法对HBsAg检测的灵敏度高，可检出低于1 ng的HBsAg，而ELISA法的灵敏度为1 ng，从表2也可看出，76例采用ECLIA法检出均为HBsAg阳性的标本，在用ELISA法时有6例为阴性。这在无偿献血的筛查过程中也有着重要的意义，ECLIA法可以更加有效地保证血液质量。ECLIA法不仅灵敏度高，其稳定性、仪器的精密程度都要好于ELISA法，重复性也很好，最快在半小时内即可出检测结果，提高了检测效率；仪器的自动化及一次性加样头大大减少了交叉污染的可能；标志物半衰期长，可长期稳定地于自然条件下保存[15]，以上诸点均体现了ECLIA之于ELISA的改良之处，值得临床检测HBV的推广应用。但ECLIA法的缺点为检测费用较高，因此，在用ELISA法检测时，如出现HBsAg阴性，但HBeAb、HBcAb阳性时，可考虑做ECLIA以排除HBsAg的假阴性可能。

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Comparison of the accuracy of electrochemiluminescence immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay in the detection of hepatitis B virus markers

SHI Zhen-gang
Department of Clinical Laboratory,the Third People′s Hospital of Jingdezhen City in Jiangxi Province,Jingdezhen 333001,China

[Abstract]ObjectiveTo analyze and compare the accuracy of electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA)and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)in the detection of hepatitis B virus(HBV)markers.Methods160 patients with HBV treated in our hospital from January 2015 and January 2017 were selected as research targets,and were randomly divided into the observation group(n=80)and the control group(n=80).The observation group was given ECLIA and the control group was given ELISA,the positive rates of HBV markers were compared between the two groups.Then in the observation group,HBsAg/Ab and/or HBeAg/Ab double positive patients were selected and detected by ELISA method,and the results were observed.ResultsThe positive rates of HBsAg,HBsAb,HBeAg and HBeAb in the observation group were 100.0%,52.5%,76.3%and 78.8%respectively,which was higher than 92.5%,45.2%,52.5%,50.0%in the control group,with significant difference(P＜0.05).The number of patients with the s and/or e system double positive detection results by the method of ECLIA were 76 cases,but the number by the method of ELISA were comparatively 9 cases.ConclusionCompared with ELISA,ECLIA is more accurate in the detection of HBV infection,therefore,it is worthy of wide clinical promotion and application.

[Key words]Electrochemiluminescence immunoassay;Enzyme-linked immunosorbent assay;Hepatitis B virus

[中图分类号]R512.6+2

[文献标识码]A

[文章编号]1674-4721（2017）06（c）-0111-03

（收稿日期：2017-04-07 本文编辑：祁海文）

[作者简介]施振岗（1973-），男，江西浮梁人，本科，主管检验师，研究方向：A群轮状病毒感染状况及流行病研究