杨永怀1曾媛媛2

1.广东省汕尾市人民医院检验科，广东汕尾 516600；2.广东省汕尾市中心血站，广东汕尾 516600

[摘要]目的研究ABO疑难血型的鉴定方法及效果，为临床输血的安全性和有效性提供重要保障。方法于2012年1月～2015年12月，在37 264份无偿献血者的血液标本中选取83份ABO疑难血型的血液标本作为研究对象，对这83份ABO疑难血型血液标本进行血清学检测，分别采用盐水试管法、聚凝胺法以及吸收放散试验对血型正、反定型进行检测，计算盐水试管法、盐水试管法+聚凝胺法、盐水试管法+聚凝胺法+吸收放散试验对血型正、反定型的符合率，并对盐水试管法检测ABO疑难血型正、反定型不符合的原因进行分析。结果83份ABO疑难血型血液标本中，盐水试管法检测共37份标本血型正、反型符合，符合率为44.58%，盐水试管法+聚凝胺法的符合率为50.60%，盐水试管法+聚凝胺法+吸收放散试验的符合率为75.90%，三种检测方法联合检测的符合率高于单一的盐水试管法、盐水试管法+聚凝胺法（P＜0.05）。盐水试管法鉴定ABO疑难血型正反型不符合的原因主要为AB亚型、弱A抗原、弱B抗原、不规则抗体阳性等。结论采用盐水试管法、聚凝胺法、吸收放散试验联合检测对ABO疑难血型进行鉴定，能够准确鉴定血型正、反型。

[关键词]ABO疑难血型；鉴定；输血

ABO血型的鉴定较为困难，被称为ABO疑难血型。据调查数据显示，ABO血型的鉴定失误导致输血无效的概率＞4%，容易造成严重后果。由于ABO血型的准确鉴定是确保临床输血安全及治疗有效的重要前提，因此，临床上应对ABO疑难血型的鉴定方法进行积极研究，以保障临床输血的安全和有效[1-2]。本研究选取我院ABO疑难血型的血液标本进行鉴定和分析，分别采取盐水试管法、聚凝胺法以及吸收放散试验对血型正、反定型进行检测，旨在探讨ABO疑难血型的鉴定方法及效果，以期能够为临床输血的安全性和有效性提供重要保障，现报道如下。

1.1 一般资料

于2012年1月～2015年12月在我院37 264份无偿献血者的血液标本中选取83份ABO疑难血型的血液标本作为研究对象，血液标本来源包括男性41例，女性42例；年龄为25～49岁，平均（37.15±10.62）岁；其中血站送检标本65份，医院送检标本18份。

1.2 方法

试剂分别为抗-A试剂、抗-B试剂、抗-IgG试剂、聚凝胺试剂、C3d试剂，均购自上海血液生物医药有限责任公司。对这83份ABO疑难血型血液标本进行血清学检测，分别采用盐水试管法、聚凝胺法以及吸收放散试验对血型正、反定型进行检测，先对血液标本进行盐水试管法检测，进一步采用聚凝胺法、吸收放散试验进行检测，均按照《全国临床检验操作规程》《中国输血技术操作规程》中的规范流程进行操作。

1.3 观察指标

计算盐水试管法、盐水试管法+聚凝胺法、盐水试管法+聚凝胺法+吸收放散试验对血型正、反定型的符合率，并对盐水试管法检测ABO疑难血型正、反定型不符合的原因进行分析。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析，计数资料以百分数表示，采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 不同检测方法对ABO血型正、反型检测结果符合情况的比较

83份ABO疑难血型血液标本中，盐水试管法检测共37份标本血型正、反型符合，符合率为44.58%；盐水试管法+聚凝胺法共有42例符合，符合率为

50.60 %；盐水试管法+聚凝胺法+吸收放散试验共有

63例符合，符合率为75.90%。三种检测方法联合检测的符合率高于单一的盐水试管法、盐水试管法+聚凝胺法，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 盐水试管法检测ABO血型正、反型不符合的原因分析

对46例盐水试管法鉴定血型正、反型不符合的标本进行分析后发现，盐水试管法鉴定ABO疑难血型正反型不符合的原因主要为AB亚型、弱A抗原、弱B抗原、不规则抗体阳性等，分别有9例（19.57%）、7例（15.22%）、6例（13.04%）、7例（15.22%），其余原因还有无抗-B抗体A型、无抗体O型、低抗-B效价、低抗-A效价、低抗-B效价O型、B亚型，分别有5例 （10.87%）、4例 （8.70%）、3例 （6.52%）、2例（4.35%）、2例（4.35%）、1例（2.17%）。

ABO血型是一种血型系统，在输血过程中，这种血型容易引发溶血性输血反应，进而导致贫血、肾功能衰竭、休克等严重后果的发生，严重时还会导致死亡[3]。在临床输血过程中，常能遇到ABO血型正、反型出现不一致的情况，这给ABO血型的鉴定和临床血液输注均带来严重影响，ABO血型鉴定失误，容易造成输血无效，对临床治疗较为不利，尤其是部分危急重症患者，可能会导致患者发生失血性休克，进而导致患者死亡[4-5]。相关数据显示，ABO血型的鉴定失误导致的输血无效率约为4%。对ABO血型进行准确鉴定是保障临床输血安全有效的重要前提，因此，临床上应对ABO血型的鉴定进行深入研究，以寻求有效的鉴定方法，提高ABO血型鉴定的准确性，进而提高临床输血的安全性[6-7]。

目前，临床上鉴定ABO血型主要采取血清学检测方法，主要是通过对红细胞以及血清的正、反定型不一致进行检测，检测方法主要有盐水试管法、聚凝胺法、吸收放散试验。本研究采取这三种检测方法进行血型鉴定后发现，83份ABO疑难血型血液标本中，盐水试管法检测共37份标本血型正、反型符合，符合率为44.58%；盐水试管法+聚凝胺法的符合率为50.60%，盐水试管法+聚凝胺法+吸收放散试验的符合率为75.90%，三种检测方法联合检测的符合率高于单一的盐水试管法、盐水试管法+聚凝胺法（P＜0.05）。三种检测方法联合鉴定的符合率最高，且高于单一的盐水试管法、盐水试管法联合聚凝胺法检测，提示在对ABO血型鉴定时，应采取多种检测方法进行综合鉴定，以减少误差，进一步提高ABO血型鉴定的准确性，以确保临床输血的安全性和抢救的有效性[8-9]。

在ABO血型鉴定过程中，由于红细胞抗原出现异常，如红细胞表面抗原减弱，往往会导致血型正、反型鉴定出现差错，而血型正、反型鉴定准确是ABO血型鉴定准确的重要前提，故有必要对血型正、反型鉴定出现差错的原因进行分析，以采取有效的控制措施，确保血型正、反型鉴定的准确性。临床诸多研究显示，血型正、反型鉴定差错的原因较为复杂，通过洗涤红细胞、延长反定型反应时间、反定型加做O型混合红细胞和不规则抗体检测以及吸收放散试验后发现，血型正、反型差错主要和冷凝集素、红细胞表面抗原减弱、血清抗体缺失、红细胞致敏等有关[10-13]。 本研究对46份经盐水试管法检测后血型正、反型不符合的标本进行分析后发现，盐水试管法鉴定ABO疑难血型正反型不符合的原因主要为AB亚型、弱A抗原、弱B抗原、不规则抗体阳性等，其占比分别为19.57%、15.22%、13.04%、15.22%，这主要是因为ABO正、反定型检测时采用的反定型细胞以混合细胞为主，ABO以外抗原成分相对复杂，一旦血液标本血清中存在不规则抗体或自身抗体，容易导致反定型细胞发生凝集反应，对血型鉴定结果造成影响，这提示在ABO血型鉴定过程中，应注意对AB亚型、弱A抗原、弱B抗原、不规则抗体阳性等问题予以重视，严格按照规范流程进行操作，对于存在不规则抗体的血液标本，应在对其不规则抗体进行鉴定的基础上，选用与不规则抗体相应抗原阴性的红细胞作为鉴定对照物；在红细胞洗涤时，应采用温度为37℃的生理盐水对红细胞进行5～6次反复洗涤，直至洗涤到显微镜下未出现红细胞凝集后才可进行ABO血型正、反定型检测；对于含自身抗体或AB亚型的血清标本，其红细胞容易发生致敏效应，该类血液标本的鉴定较为困难，因此，在这类血清标本的血型正、反型进行检测时，往往会出现血清学检测结果误差或疑问，此时，应适当结合分子生物学基因分型技术进行辅助鉴定，以进一步减少其检测误差，提高血型正、反型鉴定的准确性[14-18]。

综上所述，采用盐水试管法、聚凝胺法、吸收放散试验联合检测对ABO疑难血型进行鉴定，能够准确鉴定血型正、反型，对于部分ABO正、反型检测较为困难的血液标本，可适当结合分子生物学基因分型技术进行辅助鉴定，以对ABO疑难血型进行快速准确的鉴定，避免ABO疑难血型鉴定结果受到自身抗体、不规则抗体等干扰。

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Analysis and report of ABO difficult blood group identification

YANG Yong-huai1ZENG Yuan-yuan2
1.Clinical Laboratory,People′s Hospital of Shanwei City in Guangdong Province,Shanwei 516600,China;2.Blood Center of Shanwei City in Guangdong Province,Shanwei 516600,China

[Abstract]ObjectiveTo study the method and effect of identification of suspicious ABO blood group,to provide an important guarantee for the safety and effectiveness of clinical blood transfusion.MethodsFrom January 2012 to December 2015,83 cases of suspicious ABO blood samples in 37 264 blood specimens of blood donors were selected as the research object,the 83 suspicious ABO blood specimens were carried out serological detection,saline tube method,Polybrene method and absorption elution test of blood group positive and negative stereotypes were detected.The coincidence rate of saline tube method,saline tube method+Polybrene method,saline tube method+Polybrene method+absorption elution test of blood group positive and negative stereotypes were calculated,the inconformity reason of saline tube method in detecting suspicious ABO blood group positive and negative stereotypes was analyzed.ResultsIn the 83 cases of suspicious ABO blood samples,a total of 37 specimens of blood samples were consistent of positive and negative, and the coincidence rate was 44.58%,the coincidence rate of saline tube method and Polybrene method was 50.60%,the coincidence rate of saline tube Polybrene method+absorption elution test was 75.90%.The coincidence rate of combined detection of the three methods was higher than that of the single saline test tube method,the saline tube test method and the Polybrene method (P＜0.05).The main inconformity cause of saline tube test identification of ABO blood group were the AB subtype,weak A antigen,weak B antigen,irregular antibody positive.ConclusionThe saline tube method,Polybrene method,absorption elution test of combined detection of suspicious ABO blood group identification can accurately identify the positive and negative blood type.

[Key words]ABO difficult blood group;Identification;Blood transfusion

[中图分类号]R446.11

[文献标识码]A

[文章编号]1674-4721（2017）02（c）-0112-03

（收稿日期：2016-12-22 本文编辑：祁海文）