曾尚干

南昌大学第一附属医院胸外科，江西南昌 330006

[摘要]目的探讨食管癌患者治疗前后外周血淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法选取2012年1月～2014年12月在我院治疗的47例食管癌患者的临床资料进行回顾性分析，检测患者治疗前后的外周血淋巴细胞亚群，分析不同分期、是否有淋巴结转移、随访是否发生复发或转移患者外周血淋巴细胞亚群的水平。结果治疗后的CD3+、CD4+水平高于治疗前，CD8+、CD56+水平低于治疗后，差异有统计学意义（P＜0.05）。Ⅰ～Ⅱ期患者治疗前的外周血淋巴细胞CD3+、CD4+水平显著高于Ⅲ～Ⅳ期，差异有统计学意义（P＜0.01）。Ⅰ～Ⅱ期患者治疗后的CD4+水平显著高于Ⅲ～Ⅳ期治疗后，差异有统计学意义（P＜0.01）。无淋巴结转移患者治疗前的外周血淋巴细胞CD56+水平显著低于有淋巴结转移患者，差异有统计学意义 （P＜0.01）。无淋巴结转移患者与有淋巴结转移患者治疗后的CD3+、CD4+、CD8+、CD56+、CD19+水平比较，差异无统计学意义 （P＞0.05）。治疗前及治疗后无转移或复发患者的CD4+水平显著高于发生转移及复发患者，CD8+、CD56+及CD19+水平显著低于转移或复发患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论食管癌患者存在明显的细胞免疫抑制情况，检测淋巴细胞亚群水平可用于监测患者免疫状态，评估患者的病情，预测患者复发及转移风险。

[关键词]食管癌；外周血；淋巴细胞亚群

食管癌是临床常见的恶性肿瘤，患者预后差。近年来我国食管癌的发病率有上升趋势。T细胞免疫在抗肿瘤过程中发挥重要的作用，CD4+辅助T细胞/诱导T细胞、CD8+抑制/细胞毒T淋巴细胞是常见的参与抗肿瘤免疫的T细胞亚群[1-2]。本研究旨在分析肺癌患者T淋巴细胞亚群变化及临床意义，现报道如下。

1.1 一般资料

选取2012年1月～2014年12月在我院治疗的47例食管癌患者的临床资料进行回顾性分析，其中男41例，女6例，年龄为40～75岁，平均（62.1±10.3）岁；TNM分期：15例Ⅰ～Ⅱ期，32例Ⅲ～Ⅳ期；40例无淋巴结转移，7例有淋巴结转移。所有患者均为鳞状细胞癌，均采用化疗联合三维适形放疗治疗，均为首次确诊及治疗，在本次入院前未经抗肿瘤治疗，病理组织以及血样的采集均知情同意。

1.2 检测方法

采集患者治疗前2 d内、治疗后3 d晨起空腹静脉血2 ml，置于EDTA-Na2试管，分别取50 μl，与荧光素标记鼠抗人单克隆抗体、20 μl CD45/CD（16+ 56）/CD19/CD3以及20 μl CD45/CD4/CD8/CD3混匀，避光，室温，反应30 min，分别加溶血素600 μl，混匀，避光15～30 min，1 h内检测，计算T淋巴细胞亚群细胞表达百分比。

1.3 统计学方法

采用SPSS 11.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 治疗前后外周血淋巴细胞表达水平的比较

治疗后的 CD3+、CD4+水平高于治疗前，CD8+、CD56+水平低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗前后的CD19+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。

表1 治疗前后外周血淋巴细胞表达水平的比较（）

2.2 不同分期患者治疗前后外周血淋巴细胞亚群表达的比较

Ⅰ～Ⅱ期患者治疗前的外周血淋巴细胞CD3+、CD4+水平显著高于Ⅲ～Ⅳ期，差异有统计学意义（P＜0.01）。Ⅰ～Ⅱ期患者治疗后的CD4+水平显著高于Ⅲ～Ⅳ期治疗后，差异有统计学意义（P＜0.01）（表2）。

表2 治疗前后不同分期患者外周血淋巴细胞亚群表达的比较（%，）

2.3 是否有淋巴结转移患者治疗前后外周血淋巴细胞亚群表达的比较

无淋巴结转移患者治疗前的外周血淋巴细胞CD56+水平显著低于有淋巴结转移患者，差异有统计学意义（P＜0.01）。无淋巴结转移患者与有淋巴结转移患者治疗后的CD3+、CD4+、CD8+、CD56+、CD19+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表3）。

表3 治疗前后是否有淋巴结转移患者外周血淋巴细胞亚群表达的比较（%，）

2.4 随访是否转移或复发患者治疗前后外周血淋巴细胞表达水平的比较

随访1年，35例患者未发生转移或者复发，12例患者发生转移或复发。无转移或复发患者治疗前及治疗后的 CD4+水平显著高于发生转移及复发患者，CD8+、CD56+及CD19+水平显著低于发生转移或复发患者，差异有统计学意义（P＜0.05或 P＜0.01）（表4）。

表4 治疗前后随访是否转移或复发患者外周血淋巴细胞表达水平的比较（）

免疫抑制反应与细胞毒效应总和高于特异性免疫诱导，提示癌症的发生可能与自身免疫能力下降、抗肿瘤细胞作用降低、肿瘤细胞逃逸免疫攻击有关[3-5]。目前关于肺癌免疫功能紊乱的研究较多，而关于食管癌免疫功能紊乱的报道相对较少。患者淋巴细胞亚群变化、机体抗肿瘤机制改变、淋巴细胞亚群数量改变及功能失调均与肿瘤的发生、发展及预后密切相关[6]。

CD3+分子在人全部的T淋巴细胞上均有表达，是T细胞识别抗原的识别单位，可标记外周血成熟T淋巴细胞的总量，用于鉴定 T淋巴细胞[7-8]。CD4+辅助T淋巴细胞的主要作用为协助细胞免疫及体液免疫，当CD4+细胞水平下降时，则免疫反应诱导作用下降，特异性的抗肿瘤作用也下降[9]。细胞毒T淋巴细胞表面缺乏T、B细胞膜表面的特异性标志，具有部分T细胞分化抗原[10]。CD56+是NK细胞特异性的标志，CD56+表达量与NK细胞的杀伤作用密切相关[11]。CD19+被认为是在B细胞发育过程中存在阶段较长的最可靠的标志物，在正常及恶性B淋巴细胞中都有表达[12-13]。CD4+标记的Th细胞亚群，表面糖蛋白能特异性识别抗原，是免疫细胞活化必须分子[14]。CD4+细胞辅助B细胞产生抗体，协同效应T细胞，促使生成细胞毒T淋巴细胞，还能够协同巨噬细胞，在肿瘤抗原刺激下，促使T细胞产生巨噬细胞分化因子，与巨噬细胞结合，发挥杀伤肿瘤细胞的作用[15-18]。

本研究结果显示，治疗后患者CD3+、CD4+水平升高，CD8+、CD56+水平下降，差异有统计学意义 （P＜0.05），提示患者经过治疗后机体免疫功能得到改善，这可能与经过治疗后癌细胞大量坏死，癌细胞产生的免疫抑制因子减少，从而在一定程度上改善免疫功能有关。治疗前对不同分期患者的外周血淋巴细胞亚群变化进行分析，结果显示Ⅰ～Ⅱ期患者的外周血淋巴细胞CD3+、CD4+水平显著高于Ⅲ～Ⅳ期，提示分期越晚的患者，免疫功能下降情况越明显。治疗前无淋巴结转移患者的CD56+细胞（NK细胞）水平低于有淋巴结转移患者，提示在疾病进展过程中，NK细胞被大量激活，其抗肿瘤作用可能在疾病进展过程中发挥了重要作用。随访1年，发生转移或者复发患者的CD4+水平较未复发或转移患者低，而CD8+、CD56+以及CD19+水平要高，提示免疫功能下降明显的患者在治疗后更容易复发，而患者的免疫功能也可以预测患者的预后情况。

综上所述，食管癌患者存在明显的细胞免疫抑制情况，检测淋巴细胞亚群水平可用于监测患者免疫状态，评估患者病情，预测患者复发及转移风险。

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Analysis of changes of peripheral blood lymphocyte subsets in patients with esophageal cancer before and after treatment

ZENG Shang-gan
Department of Thoracic Surgery,the First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China

[Abstract]ObjectiveTo explore the changes of peripheral blood lymphocyte subsets in patients with esophageal cancer before and after treatment.MethodsThe clinical data of 47 patients with esophageal cancer who were treated in our hospital from January 2012 to December 2014 were retrospectively analyzed.Lymphocyte subsets in peripheral blood of patients before and after treatment were detected.The levels of peripheral blood lymphocyte subsets in patients with different stages,lymph node metastasis and follow-up whether recurrence or metastasis were analyzed.ResultsThe level of CD3+,CD4+after treatment was higher than that before treatment,the level of CD8+,CD56+after treatment was lower than that before treatment,with significant difference(P＜0.05).The levels of CD3+and CD4+of peripheral blood lymphocytes in stageⅠ andⅡ before treatment was higher than that in stageⅢ andⅣ,with significant difference (P＜0.01).The levels of CD3+and CD4+of peripheral blood lymphocytes in stageⅠ andⅡ after treatment was higher than that in stageⅢ andⅣ,with significant difference (P＜0.01).The level of CD56+of peripheral blood lymphocytes before treatment in the patients without lymph node metastasis was lower than that in the patients with lymph node metastasis,with significant difference (P＜0.01).There was no significant difference in the level of CD3+,CD4+,CD8+,CD56+,CD19+of peripheral blood lymphocytes after treatment between the patients without lymph node metastasis and lymph node metastasis(P＞0.05).The level of CD4+in patients of no recurrence or metastasis before and after treatment was higher than that in patients of recurrence or metastasis,the level of CD8+,CD56+,CD19+in patients of no recurrence or metastasis before and after treatment was lower than that in patients of recurrence or metastasis,with significant difference (P＜0.05).ConclusionPatients with esophageal cancer have obvious cellular immune suppression.Detection of lymphocyte subsets can be used to monitor the immune status of patients,and assess the patient′s condition and predict the recurrence and metastasis of esophageal cancer patients.

[Key words]Esophageal cancer;Peripheral blood;Lymphocyte subset

[中图分类号]R735.1

[文献标识码]A

[文章编号]1674-4721（2017）01（b）-0054-04

（收稿日期：2016-10-13 本文编辑：祁海文）