白花曼陀罗根、茎和叶的显微鉴别研究
龚力民 周 英 潘清平 刘塔斯 肖冰梅
湖南中医药大学药学院,湖南长沙 410208
[摘要]目的研究白花曼陀罗的根、茎和叶显微鉴别特征,为进一步完善白花曼陀罗的形态学鉴别以及扩大药用资源提供基础。方法对白花曼陀罗的根、茎、叶横切面组织构造和粉末特征进行显微鉴别(徒手切片法、叶表皮撕片法和粉末制片法)。结果根横切面维管束外韧型,形成层环列明显;茎横切面表维管束径向排列,木纤维多角形,髓部常呈空洞状;叶横切面嫩叶可见众多簇晶,老叶可见众多柱晶。根粉末中可见草酸钙簇晶、网纹导管、木纤维、木栓细胞等;茎粉末中可见细小草酸钙簇晶、具缘纹孔导管、腺毛、非腺毛等;叶粉末中可见草酸钙簇晶、柱晶、螺纹导管、腺毛、非腺毛、不等式气孔等;叶显微常数:气孔平均长度为21.34μm,平均宽度为16.20μm,气孔平均密度为176.8个/mm2,栅表比为1.4,脉岛数为20.3个/mm2。结论白花曼陀罗药材显微鉴定特征明显,可为白花曼陀罗的显微鉴定标准的制定提供参考。
[关键词]白花曼陀罗;组织构造;显微鉴别
白花曼陀罗为茄科曼陀罗属植物,其各部位均可入药,具有很高的药用价值[1],可用于祛风除湿,止咳平喘,解痉镇痛及麻醉[2]。舒波等[3]对白花曼陀罗的炮制方法进行研究发现,其能够有效降低生物碱含量,而且能够降低药学毒性。韩晓琳等[4]对新疆产的白花曼陀罗种子进行化学成分研究,分离鉴定了10种化合物,其中异嗪皮啶和滨蒿内酯为茄科植物首次发现。苏玉彤等[5]对曼陀罗的栽培管理进行了报道。吴亚男等[6]利用ITS 2序列对曼陀罗属药用植物进行分子鉴定,发现两属样本被聚为三大支。
但有关白花曼陀罗根、茎和叶显微鉴别研究未见报道,因此,为了更好地利用开发这一药用资源,本文对白花曼陀罗根、茎、叶进行了显微鉴别研究,为鉴别白花曼陀罗及其进一步开发、制定相关的质量标准提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药
Motic 500万像素数码一体化显微镜系统 (麦克奥迪实业集团有限公司);载玻片\盖玻片(秦皇岛市秦宁玻璃有限公司);乙醇(天津市北辰方正试剂厂,批号:20151009);水合氯醛(天津市科密欧化学试剂有限公司,批号:20160921)。
1.2 实验材料
白花曼陀罗自采于湖南中医药大学松霖药植园,经湖南中医药大学药学院中药鉴定教研室肖冰梅教授鉴定为茄科植物白花曼陀罗。
1.3 制片方法
①取新鲜药材,徒手切片法制片,透化。②用镊子撕取叶上下表皮,水装片。③分别将根茎叶的粉末用水合氯醛试液经酒精灯加热透化后稀甘油封片,置显微镜下观察,拍照,测量。④栅表比:即一个表皮细胞下的平均栅栏细胞数目;脉岛数:即每平方毫米面积中的脉岛个数[7-10]
2 结果
2.1 白花曼陀罗组织结构显微特征
2.1.1 白花曼陀罗根的横切面 木栓层细胞数列,呈狭长类长方形疏松排列,栓内层细胞类方形,壁稍厚,木栓化,可见中柱鞘;韧皮部狭窄;形成层环列明显;木质部导管稀疏,径向排列;薄壁细胞含有淀粉粒(图1)。

 
图1 白花曼陀罗根横切面图
2.1.2 白花曼陀罗茎的横切面 表皮为一列长方形细胞,外被角质层,可见非腺毛和小腺毛,腺毛有短柄,头部类球形;皮层薄壁细胞数列,排列疏松,皮层与表皮之间有数列厚角组织;中柱鞘明显;韧皮部狭窄,形成层成环,木质部发达,维管束呈径向排列,导管类圆形,木纤维多角形,射线宽窄不一;维管束周围薄壁细胞含较多草酸钙砂晶;髓部薄壁细胞大,常呈空洞状(图2)。

 
图 2白花曼陀罗茎横切面图
2.1.3 白花曼陀罗叶的横切面 上下表皮均有气孔及毛茸,腺毛有短柄,头部类球形;上表皮内侧有栅栏组织,下表皮内侧有海绵组织,在栅栏组织下方侧脉附近,叶肉细胞中,嫩叶中含有众多草酸钙小簇晶,老叶中含有众多草酸钙柱晶,稀有簇晶,或柱晶簇晶同时存在;主脉向下突出,维管束双韧型,木质部略呈U形;薄壁细胞中含有草酸钙砂晶,上下两侧有厚角组织,幼叶上表皮方的厚角组织发育不完全(图3)。
2.2 白花曼陀罗粉末显微特征
2.2.1 白花曼陀罗根的粉末 粉末黄白色。①草酸钙簇晶较多;②网纹导管直径为12~77μm;③木纤维单个散在或成束,呈长梭形,直径为12~26μm;④木栓细胞呈类长方形;⑤淀粉粒单粒,类圆形或类椭圆形,脐点明显,点状、短缝状和人字形,层纹不明显,直径为2~51μm(图4)。

 
图 3白花曼陀罗叶横切面简图
2.2.2 白花曼陀罗茎的粉末 粉末淡绿色。①草酸钙小簇晶较多,细小;②可见具缘纹孔导管、网纹导管和螺纹导管,直径为14~55μm;③腺毛较多,腺头呈球形或类球形倒卵形,腺柄3~5个细胞,完整者长为380~1549μm;④木纤维单个散在或成束,长梭形,直径为7~30μm;韧皮纤维单个散在,孔沟明显,直径为14~42μm(图5)。

 
图4 白花曼陀罗根粉末图(×40)

 
图5 白花曼陀罗茎粉末图(×40)
2.2.3 白花曼陀罗叶的粉末 粉末为草绿色或黄绿色。①草酸钙簇晶、柱晶多见,散布于叶肉细胞中,簇晶直径为4~18μm,柱晶长为2~10μm;②螺纹、环纹导管多见,直径为3~41μm;③腺毛两种,一种单个散在或位于表皮处,腺头呈倒卵形,腺柄4~5个细胞,长120~380μm,直径为22~38μm;一种腺头呈球形或类球形,有2~6个细胞,直径为9~32μm,腺柄短,单细胞;④表皮细胞呈不规则形或类长多角形,上表皮垂周壁波状弯曲或稍平直,下表皮垂周壁波状弯曲;气孔长圆形或类圆形,为不等式(图6)。
图6 白花曼陀罗叶粉末图(×40)
2.3 白花曼陀罗叶表面显微常数分析
白花曼陀罗叶的气孔主要为不等式气孔,气孔的平均长度为21.34μm,平均宽度为16.20μm,气孔密度平均密度为176.8个/mm2,平均栅表比为1.4,平均脉岛数为20.3个/mm2
3 讨论
白花曼陀罗是一种历史悠久的中药,全株有毒,且毒性大,以果实特别是种子毒性最大,嫩叶次之。现代医学和临床医学研究表明,白花曼陀罗含有莨菪碱和东莨菪碱等多种活性成分[11-17]。据文献报道,白花曼陀罗酒局部配合热敷可治疗颈椎病,86例患者中,痊愈67例,有效11例,无效8例[18]。徐宁等[19]测定了曼陀罗属中的曼陀罗和多刺曼陀罗种子对小鼠的毒性,试鼠对曼陀罗和多刺曼陀罗的耐受量范围分别是12~30 g/kg和8~40 g/kg。朱红霞等[20]测定了曼陀罗茎、叶和种子的乙醇提取物对10种植物病原真菌的抑菌活性,曼陀罗茎、叶乙醇提取物抑菌活性较弱,种子抑菌活性较强,且对供试植物病原真菌具有很强的选择性,在不同病原菌之间抑制效果差异较大,曼陀罗种子提取物能够完全抑制小麦赤霉病菌的生长,对辣椒疫霉病菌的抑制率达到96.91%。
本实验对白花曼陀罗根、茎和叶的横切面组织构造和粉末显微特征进行了研究,发现白花曼陀罗植物中纤维多成束,在茎中较多;多含草酸钙簇晶,柱晶和砂晶亦可见,嫩叶中簇晶极多,老叶柱晶极多,大多分布在叶脉附近,其显微特征具有较好的专属性;导管常见有螺纹、网纹、具缘孔纹导管三种类型,叶中螺纹导管较多,茎和根中网纹、具缘孔纹导管较多;叶的气孔为不等式;叶表皮和茎表皮有腺毛和非腺毛,腺毛头部类球形,短柄。栅表比卫1.4,脉岛数为20.3个/mm2,由于同种植物的栅表比和脉岛数通常是恒定的,且不受植物的年龄和叶片的大小而变化。以上鉴别特征稳定可靠,具有鉴别意义,可作为白花曼陀罗显微鉴别的参考依据。
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Study on microscopic identification of root,stem and leaf of Datura Stra-monium
GONG Li-min ZHOU Ying PAN Qing-ping LIU Ta-si XIAO Bing-mei▲
School of Pharmacy,Traditional Chinese Medicine University of Hunan City,Changsha 410208,China
[Abstract]Objective To study themicroscopic identification features of root,stem and leaf of Datura stramonium so as to provide the basis for further improvement of themorphology and identification of Datura stramonium and expansion ofmedical resources.Methods The microscopic identification of the cross section and powder characteristics of root,stem and leaf of Datura stramonium were made (hand sectioning method,leaf epidermis tearing method and powder production method).Results The transverse section of root had collateral vascular bundles and formed an obvious layer ring;in the cross section of the stem,vascular bundles were radially arranged with polygonal wood fiber and cavitary pith;in the cross section of the leaf,many visible crystals were seen in new leaves and lots of columnar crystals were seen in the old leaves.The calcium oxalate crystals,murus,wood fiber and cork cells could be found in root powder;the small calcium oxalate crystals,bordered pit,glandular hairs and non-glandular hairs could be seen in stem powder;the calcium oxalate crystals,column crystals,thread tube,glandular hairs,non-glandular hairs,anisocytic type stoma could be found in leaf powder.Themicroscopic constant of leaf included,the average stomatal length was 21.34μm,the average width was 16.20μm,the average pore density of 176.8/mm2,palisade ratio was 1.4,vein islet number was 20.3/mm2. Conclusion Themicroscopic identification ofmedicinal characteristics of Datura stramonium provides reference for criteria formulation of themicroscopic identification of Datura stramonium.
[Key words]Datura stramonium;Tissue structure;Microscopic identification
[中图分类号]R616.2
[文献标识码]A
[文章编号]1674-4721(2016)09(c)-0007-05
(收稿日期:2016-07-18本文编辑:顾雪菲)
[基金项目]湖南省十三五药学重点学科资助项目(湘教发[2011]76号)
[作者简介]龚力民(1980-),男,硕士,讲师,研究方向:中药资源与质量研究
▲通讯作者:肖冰梅(1968-),女,博士,教授,研究方向:中药质量与资源研究