谷胱甘肽过氧化物酶在牙周炎患者龈沟液和血清中的水平研究
王丹
广东省口腔医院，广州　510800
［摘要］目的 研究谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）在牙周炎患者龈沟液和血清中的水平。方法 选取2015年1月～2016年2月我院接收的41例活跃期及27例静止期慢性牙周炎及同期接收的30例牙周健康者（对照组）作为研究对象，比较三组患者龈沟液和血清中GSH-Px、牙周病变程度。统计分析GSH-Px水平与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失相关性。结果 慢性牙周炎患者（活跃期与静止期）龈沟液体积、牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失均显著高于牙周健康对照组（P＜0.05）；慢性牙周炎活跃期患者龈沟液体积、牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失均显著高于静止期患者（P＜0.05）。慢性牙周炎患者（活跃期与静止期）龈沟液及血清中GSH-Px水平均显著高于牙周健康对照组（P＜0.05）；慢性牙周炎活跃期患者龈沟液及血清中GSH-Px水平均显著高于静止期患者（P＜0.05）。龈沟液中GSH-Px与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失呈负相关（r值分别为-0.627、-0.459、-0.563，P＜0.05），血清中GSH-Px与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失呈负相关（r值分别为-0.443、-0.618、-0.538，P＜0.05）。结论 对龈沟液中GSH-Px实施动态监测，能够为深入了解牙周疾病发病机制及评估疾病程度提供可靠的参考资料。
［关键词］慢性牙周炎；活跃期；龈沟液；谷胱甘肽过氧化物酶
目前，部分学者认为牙周组织正常的氧化/还原反应的动态平衡被破坏，会诱发产生大量的细胞因子及生长因子，促进了牙周炎的发生与发展。谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力反映了机体抗氧化能力［1-2］，但是临床上对于不同牙周状态患者龈沟液及血清中GSH-Px水平及其与牙周病变程度的关系未见报道。本文选取活跃期及静止期慢性牙周炎及牙周健康者作为研究对象，对其龈沟液和血清中GSH-Px进行检测，旨在为牙周病发病机制及治疗研究提供参考。
1　资料与方法
1.1一般资料
选取2015年1月～2016年2月我院接收的41例活跃期及27例静止期慢性牙周炎患者为研究对象，诊断均符合《牙周病学》［3］制定的诊断标准。根据庄炤霞等［4］报道的活跃期与静止期标准，分为慢性牙周炎活跃期41例，静止期27例。活跃期男性23例，女性18例；年龄28～65岁，平均（42.7±5.09）岁。静止期男性16例，女性11例；年龄25～64岁，平均（43.1±4.76）岁。同期接收的30例牙周健康者作为对照组，其中男性17例，女性13例；年龄29～68岁，平均（43.0±4.97）岁。三组基础资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。
纳入标准：①年龄18～70岁；②知情同意；③口内余留牙≥20颗，全身健康无系统性疾病；④无激素类疾病，非妊娠期、哺乳期及月经期等。
排除标准：①既往牙体病变、有填充物，侵袭型牙周炎、正畸治疗、牙周治疗、吸烟患者；②3个月内使用过新生血管抑制剂、免疫调节剂及抗生素类药物等。
1.2方法
1.2.1牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失的测定　将钝头牙周探针放置于牙龈边缘龈沟开口处，轻轻触及，观察出血情况，根据Loe和Silness制定的标准记录牙龈指数。采用带有Williams统一刻度的牙周探针，来测定牙周袋深度及附着丧失：从牙周袋底或者龈沟底到龈缘的距离记为牙周袋深度；测得釉牙骨质界到龈缘的距离，将袋深度减去该距离即为附着丧失的程度，若两数相减为零，或不能探到釉牙骨质界，说明无附着丧失；若牙龈退缩使龈缘位于釉牙骨质界的根方，则应将两个读数相加，得出附着丧失的程度。
1.2.2龈沟液及血清中GSH-Px水平测定　本次生化检验均严格按照 《医疗机构临床实验室管理办法》中相关规定进行，在检验之前完全保证检测系统的完好性和精密。在实施本次研究之前，相关人员已经做好充分的检测准备，确保仪器设备检验的精准度，并确定设备质量合格。收集血清样本及根据Lamste描述的滤纸条称重法收集龈沟液样本后，采用酶联免疫吸附法检测，GSH-Px，BIOTEK ELX800型酶标仪（美国宝特）购自于济南来宝医疗器械有限公司，试剂盒购自于北京方程佰金生物科技股份有限公司，检测均严格按照仪器和试剂盒使用要求进行。
1.3观察指标
比较三组患者龈沟液中GSH-Px水平，牙周病变程度（龈沟液体积、牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失）。统计分析GSH-Px水平与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失的相关性。
1.4统计学分析
采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行分析，计量资料用均数±标准差表示，采用F检验或t检验，计数资料采用χ2检验，相关性采用Spearman分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2　结果
2.1三组牙周病变程度的比较
慢性牙周炎患者（活跃期与静止期）龈沟液体积、牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失均显著高于牙周健康对照组（P＜0.05）；慢性牙周炎活跃期患者龈沟液体积、牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失均显著高于静止期患者（P＜0.05）（表1）。
表1　三组龈沟液体积、牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失的比较
与对照组比较，※P＜0.05；与静止期比较，#P＜0.05
2.2三组龈沟液及血清中GSH-Px水平的比较
慢性牙周炎患者（活跃期与静止期）龈沟液及血清中GSH-Px水平均显著高于牙周健康对照组 （P＜0.05）；慢性牙周炎活跃期患者龈沟液及血清中GSHPx水平均显著高于静止期患者（P＜0.05）（表2）。
表2　三组龈沟液及血清中GSH-Px水平的比较［U/ml，］
与对照组比较，※P＜0.05；与静止期比较，#P＜0.05
2.3龈沟液及血清中GSH-Px水平与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失的相关性分析
龈沟液中GSH-Px与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失呈负相关 （r值分别为-0.627、-0.459、-0.563，P＜0.05），血清中GSH-Px与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失呈负相关（r值分别为-0.443、-0.618、-0.538，P＜0.05）。
3　讨论
慢性牙周炎是牙科常见及多发的非特异性感染性疾病之一，其主要发病机制为菌斑微生物及其代谢产物引起牙龈缘的炎症反应，炎症及肿胀有助于致病菌的滋生及扩延，当机体防御功能与病原微生物增殖失衡时，其扩延至深部牙周组织造成牙周袋形成［5］。慢性牙周炎具有危害大、迁延不愈等特点，因此如何早期诊断及治疗成为临床研究的热点。
目前，临床上对于牙周病变程度的主要监测指标为牙龈指数等［6-7］。本研究中三组牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失比较，差异有统计学意义，且从高到低依次为：慢性牙周炎活跃期＞慢性牙周炎静止期＞牙周健康者，提示其能够较为客观地反映牙周组织状况。部分文献［8-10］报道，虽然牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失能够用于评估牙周病变程度，但其是较为粗糙的临床指征，特异性相当低，尚不够灵敏，如出血在牙龈炎及牙周炎均可出现，易出现假阳性反应，因此，寻找高度敏感又高度特异的指标区分牙周不同病变组织便成为临床工作者亟待解决的重要问题之一。随着分子生物学及分子免疫学的发展发现，GSH-Px在诊断牙周病及确定其严重程度方面具有重要意义［11-13］。徐巍巍［14］报道慢性牙周炎龈沟液及血清中GSH-Px水平显著低于健康组，本研究中慢性牙周炎患者龈沟液及血清中GSH-Px水平均显著高于牙周健康对照组（P＜0.05），提示GSH-Px能够反映深部牙周支持组织的氧化应激水平。此外，龈沟液及血清中GSH-Px与牙龈指数、牙周袋深度及附着丧失呈负相关，提示深入研究GSH-Px水平可以作为牙周破坏程度及严重性的判断指标。研究［15］表明，慢性牙周炎呈间断爆发模式，根据其牙周组织（牙槽骨、牙周膜纤维等）破坏将其分为活跃期及静止期，在活跃期由于致病菌活动加剧，导致临床建议慢性牙周炎治疗的关键在于预测和控制活动期，终止活动期有助于防止牙周支持组织丧失。本研究中，慢性牙周炎活跃期患者龈沟液及血清中GSH-Px水平均显著高于静止期患者（P＜0.05），提示GSH-Px水平能够反映牙周活动性。龈沟液是由于龈沟内分泌物渗透压发生变化，液体从血清或者邻近结缔组织中渗入，其中80%以上的成分来源于血清，与血清基本一致。本研究对龈沟液中GSH-Px水平进行监测，有助于了解牙周炎病程期间牙周组织的代谢状况，对于指导治疗、及时控制病情、监测复发具有重要意义。
综上所述，对龈沟液及血清中GSH-Px实施动态监测，能够为深入了解牙周疾病的发病机制及评估疾病程度提供可靠的参考资料。
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Study on the levels of glutathione peroxidase in gingiva crevicular fluid and serum of patients with periodontitis
WANG Dan
Stomatological Hospital of Guangdong Province，Guangzhou　510800，China
［Abstract］Objective To study the levels of glutathione peroxidase　（GSH-Px）in gingival fluid and serum of patients with periodontitis.Methods 41 cases of patients with chronic periodontitis in the active period and 27 cases in the diastasis period and 30 patients received the same period of periodontal health　（control group），who were treated in our hospital from January 2015 to February 2016 and selected as the research objects.Then，the levels of GSH-Px in gingival fluid and serum of three groups were compared，and correlation among GSH-Px levels and gingival index，periodontal pocket depth，attachment loss were statistically analyzed.Results The gingival fluid volume，gingival index，periodontal pocket depth and attachment loss of patients with chronic periodontitis in the active period and diastasis period were significantly higher than those in the control group（P＜0.05）；The gingival fluid volume，gingival index，periodontal pocket depth and attachment loss of patients with chronic periodontitis in the active period were significantly higher than those in the diastasis period（P＜0.05）.The levels of GSH-Px in gingival fluid and serum of patients with chronic periodontitis in the active period and diastasis period were significantly higher than those in the control group　（P＜0.05）；The level of GSH-Px in gingival fluid and serum of patients with chronic periodontitis in the active period were significantly higher than those in the diastasis period　（P＜0.05）.In addition，there was negative correlation among GSH-Px and gingival index，periodontal pocket depth，attachment loss in gingival fluid（r values respectively was-0.627，-0.459，-0.563，P＜0.05），there was negative correlation among the serum GSH-Px and gingival index，periodontal pocket depth，attachment loss（r values respectively was-0.443，-0.618，-0.538，P＜0.05）.Conclusion The implementation of dynamic monitoring of GSH-Px in gingival fluid，which can provide a reliable reference for further understanding the pathogenesis of periodontal disease and assessing the extent of disease.
［Key words］Chronic periodontitis；Active phase；Gingival fluid；Glutathione peroxidase
［中图分类号］R781.4+2
［文献标识码］A
［文章编号］1674-4721（2016）06（b）-0104-03
［基金项目］广东省医学科研基金（B2014027）
（收稿日期：2016-04-10 本文编辑：方菊花）