脂联素与肿瘤坏死因子-α在子痫前期发病患者胎盘组织中的表达水平及意义
明　芳　杨　洁　吕秀芳
深圳市宝安区妇幼保健院产科暨南大学附属深圳宝安区妇幼保健院，深圳　518000
［摘要］目的探讨脂联素（APN）与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在子痫前期（PE）发病患者胎盘组织中的表达水平及意义。 方法选取2014年2月～2015年4月本院收治的35例PE患者作为观察组，选取同期在本院进行体检的35例健康晚期妊娠妇女作为对照组，采用放射免疫分析法对两组胎盘组织中的APN、TNF-α表达情况进行检测，并对胎盘组织中APN与TNF-α的相关性进行分析。结果观察组胎盘组织中的APN阳性表达显著低于对照组，TNF-α表达显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组中的APN表达与TNF-α呈负相关（P＜0.05）。　结论胎盘组织中的APN与TNF-α表达对PE患者病情的发展起到一定作用。
［关键词］脂联素；肿瘤坏死因子-α；子痫前期
子痫前期（pre-ec1ampsia，PE）是妊娠期较为常见的疾病，发病率呈逐年上升趋势，其可能是由于孕妇全身血管内皮细胞广泛损伤、动脉粥样硬化、胰岛素抵抗及脂质代谢紊乱所致，主要临床表现为妊娠期出现高血压、蛋白尿等，对母婴健康造成较大影响［1］。脂联素（adiponectin，APN）是脂肪细胞特异性血浆激素蛋白，可通过调节内皮细胞炎性反应而抑制血管平滑肌细胞的增生，进而达到修复内皮损伤的目的，其对PE的发生、发展具有极为重要的意义［2］。肿瘤坏死因子-α（TNF-α）具有双重作用，一方面可作为机体免疫防护的重要介质，另一方面可参与机体的免疫病理损伤。此外，有研究［3］显示，TNF-α可促使血管内皮细胞功能受损，参与PE的发病过程。本研究通过分析APN、TNF-α在PE发病患者胎盘组织中的表达水平及临床意义，旨在探讨APN、TNF-α在PE患者发病机制中的作用。
1　资料与方法
1.1　一般资料
选取2014年2月～2015年4月本院收治的35例PE患者作为观察组，年龄（28.42±3.46）岁，孕周（37.68±1.7）周，孕前BMI为（23.68±3.92）kg/m2，出生体质量为 （2.98±0.27）kg，平均动脉压 （MAP）为 （80.24± 13.63）mmHg。所有患者均符合《妇产科学》（第6版）的相关诊断标准［4］。同时选取同期的35例健康晚期妊娠妇女作为对照组，年龄（27.92±3.63）岁，孕周（38.26± 2.13）周，孕前BMI为（22.91±3.46）kg/m2，出生体质量为（3.07±0.26）kg，MAP为（135.45±19.72）mmHg。两组以往均无高血压、心脏病、糖尿病及甲状腺功能亢进等；均无早产及感染现象。
1.2　检测方法
胎盘娩出后，即刻剪取胎盘中央脐带附着部对侧母体面约1 cm×1 cm×1 cm的胎盘组织，注意避开胎盘钙化区和梗死区。将选取的胎盘组织立即送到实验室，采用生理盐水将残存血液除去后放入中性甲醛溶液中固定24～48 h，然后常规脱水、二甲苯透明以及浸蜡后包埋。将包埋好的石蜡标本进行连续切片，切片厚度为4 μm。最后通过免疫组化SP法测定，PBS代替一抗为阴性对照，观察APN和TNF-α的表达强度。
1.3　表达结果判定
组织切片中滋养细胞免疫染色情况主要采用显微镜进行观察判定，APN和TNF-α表达情况根据染色强度和染色细胞所占面积积分之和进行判定，不染色为0分；轻度染色，明显高于背景色为1分；中度染色，存在较多棕黄色颗粒为2分；重度染色，存在大量深棕黄色颗粒且着色均匀为3分。根据阳性细胞所占百分比进行评价，无阳性细胞为0分，＜25%为1分，25%～50%为2分，＞50%为3分。根据上述两项积分之和进行评价，0～1分为阴性（-），2～3分为弱阳性（+），4～5分为中等阳性，＞5分为强阳性（+++）。
1.4　观察指标
比较两组的APN、TNF-α表达情况，分析APN 与TNF-α之间的相关性。
1.5　统计学处理
采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，相关性分析采用Spearman秩相关，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2　结果
2.1　两组胎盘组织中APN、TNF-α的表达情况
观察组胎盘组织中的APN表达显著低于对照组，TNF-α表达显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。
表1　两组胎盘组织中APN、TNF-α的表达情况（n）
2.2　APN与TNF-α在胎盘组织中的相关性分析
APN与TNF-α在胎盘组织中呈负相关 （r=-0.552，P＜0.05）。
3　讨论
PE是妊娠期特发的疾病，多发生在妊娠20周以后，其发病率达9.6%，是导致母婴死亡的主要原因之一［5］。PE对孕产妇的影响主要表现在肺水肿、凝血功能障碍、胎盘早剥、产后出血及急性肾功能衰竭等方面，严重时可导致死亡。其对胎儿的影响多为胎盘供血不足、胎儿窘迫、死胎及胎儿发育迟缓等。目前，临床多认为PE是由胎盘缺血、缺氧及血管内皮功能紊乱等因素所致［6-7］。APN是由脂肪细胞产生的一种激素蛋白，主要由3个外显子、2个内含子组成，其蛋白质由氨基酸组成，有氨基末端的信号肽、球形结构域及中间的胶原样结构域3部分，其不仅能有效改善胰岛素抵抗，增加胰岛素敏感性，对糖代谢平衡功能的维持也具有重要意义［8］。
国外学者［9］对PE患者胎盘组织中的APN表达水平进行测定，并与健康妊娠晚期孕妇胎盘组织中的APN表达水平进行对比，结果显示，PE患者胎盘组织中的APN表达水平明显低于健康妊娠晚期孕妇表达水平，同时通过对胎盘进行免疫组化检测发现，PE患者的胎盘绒毛血管内皮细胞中存在APN，提示APN在胎盘绒毛血管内皮损伤的修复中具有一定作用。
相关研究［10-11］显示，APN主要抑制巨噬细胞的活性及TNF-α的表达，具有良好的抗炎作用，能有效抑制内皮细胞产生生物活性因子。PE存在内皮功能障碍、脂质代谢紊乱及胰岛素抵抗，而APN属于内皮保护因子。血管内皮损伤是PE发病的主要环节，TNF-α可促进其他因子损伤内皮细胞，从而降低内皮细胞NO的分泌及增加内皮素的释放，这对血管收缩功能造成极为严重的影响，可参与PE的发病［12］。还有研究［13-14］显示，APN和TNF-α均由脂肪细胞分泌，均能够调节脂肪代谢，其中高浓度的TNF-α能使血管内皮细胞功能及滋养细胞受损，进而促进PE的发生。国外有学者［15］认为，TNF-α可阻碍APN在细胞中的表达，APN可抑制TNF-α在脂肪细胞中合成，两者呈显著的负相关。本研究结果显示，PE患者胎盘组织中的APN表达水平显著低于健康妊娠晚期妇女，TNF-α表达水平显著高于健康妊娠晚期妇女，APN的表达与TNF-α呈负相关，提示低浓度的APN可能与PE患者血管内皮细胞功能紊乱有关，APN可通过与TNF-α的互相调节参与到PE的发病机制中，进一步证实了APN、TNF-α均参与PE的发病机制，对判断PE的发病及预后具有极为重大的意义。
综上所述，PE患者胎盘组织中的APN与TNF-α具有显著相关性，APN通过与TNF-α的相互作用参与PE的发病，但能否作为敏感指标判断PE的发病及预后还有待进一步研究。
［参考文献］
［1］杨栋清，赖力云，廖燕飞，等.重度子痫前期患者71例临床特点分析［J］.实用临床医学，2015，16（1）：67-69.
［2］张雪茹，张文华，龙红，等.妊娠中期血清脂联素水平及胎盘组织中脂联素表达与子痫前期的关系［J］.中国临床研究，2013，26（12）：1301-1303.
［3］杜曲晓.MMPs、TNF-α、PLGF在子痫前期发病机制中的作用［J］.中国妇幼保健，2013，28（14）：2294-2296.
［4］乐杰.妇产科学［M］.6版.北京：人民卫生出版社，2004：99-100.
［5］Jad1i AS，Ghosh K，Shetty S.Preec1ampsia：simp1ified or sti11 mi1es to go？［J］.Am J Obstet Gyneco1，2016，214（5）：668-669.
［6］赵先兰，张苗苗.子痫前期患者胎盘和母血中脂联素及抵抗素mRNA的表达及意义［J］.中国妇幼保健，2011，26 （14）：2176-2179.
［7］DusseLM，GodoiLC，GomesKB，etal.Tissuefactor-dependent pathway in severe preec1ampsia revisited：a Brazi1ian cohort study［J］.B1ood Coagu1 Fibrino1ysis，2016，27（1）：124-129.
［8］朱颖，汪黎明，吴敏，等.脂联素受体2在子痫前期患者胎盘和大网膜脂肪组织中的表达［J］.中国妇幼保健，2014，29（12）：1929-1932.
［9］Büke B，Topcu HO，Engin-ustün Y，et al.Comparison of serum materna1 adiponectin concentrations in women with iso1ated intrauterine growth retardation and intrauterine growth retardation concomitant with pre-ec1ampsia［J］.J Turk Ger Gyneco1 Assoc，2014，15（3）：173-176.
［10］王小梅，张维倩，任梅江，等.子痫前期患者胎盘组织中TNF-α、Caspase-3表达的研究［J］.中国实用医药，2014，9（19）：75-77.
［11］韦敬锡，李妹燕，蒋柳艳.妊娠期高血压疾病脂联素和胎盘生长因子的表达及相关性研究［J］.中华全科医学，2013，11（5）：738，823.
［12］KhosrowbeygiA，AhmadvandH.Positivecorre1ationbetween serum 1eve1s of adiponectin and homocysteine in preec1ampsia［J］.J Obstet Gynaeco1 Res，2013，39（3）：641-646.
［13］张红云，张延丽，何玉洁，等.脂联素和TNF-α在子痫前期患者胎盘组织中的表达［J］.基层医学论坛，2009，13（16）：483-485.
［14］吴媛媛，乔福元.瘦素、脂联素与TNF-α在子痫前期胎盘中的表达及相关性研究［J］.中国优生与遗传杂志，2006，14（7）：10-12.
［15］OrakU，Ce1ikE，KavakSB，etal.TenascinC1eve1sinpatients with mi1d and severe preec1ampsia［J］.J Matern Feta1 Neonata1 Med，2016，29（2）：270-273.
ExPression level and significance of adiPonectin and tumor necrosis factor-α in Placental tissue in onset of Patients with Pre-eclamPsia
MING Fang　YANG Jie　LV Xiu-fang
Department of Obstetrics，Materna1 and Chi1d Hea1th Care Hospita1 of Baoan District in Shenzhen City；Materna1 and Chi1d Hea1th Care Hospita1 of Baoan District in Shenzhen Affi1iated to Jinan University　518000，China
［Abstract］Objective To exp1ore the expression 1eve1 and significance of adiponectin（APN）and tumor necrosis factorα（TNF-α）of p1acenta1 tissues in onset of patients with pre-ec1ampsia（PE）.Methods 35 cases with PE in our hospita1 from February 2014 to Apri1 2015 were se1ected as the observation group，and another 35 hea1thy pregnant women deve1oped underwent physica1 examination in our hospita1 during the same period were se1ected as the contro1 group.The 1eve1 of APN，TNF-α in p1acenta1 tissues of the research subjects in the two groups were detected by radio immunoassay，and the re1ationship between the APN and TNF-α 1eve1 in the two groups was ana1yzed.Results The expression 1eve1 of APN in p1acenta1 tissues in the observation group was 1ower than that in the contro1 group，the TNF-α 1eve1 in the observation goup was higher than that in the contro1 group，with significant difference　（P＜0.05）.The expression 1eve1 of APN in the study group was negative1y corre1ated with the 1eve1 of TNF-α　（P＜0.05）.Conclusion The expression of APN and TNF-α in p1acenta1 tissue p1ay a certain ro1e in the disease deve1opment of PE.
［Key words］Adiponectin；Tumor necrosis factor-α；Pre-ec1ampsia
［中图分类号］R714.24+5
［文献标识码］A
［文章编号］1674-4721（2016）05（a）-0098-03
［作者简介］明芳（1973-），女，四川省南充市人，硕士，主治医师，研究方向：围生医学
（收稿日期：2016-03-02本文编辑：祁海文）