吴观土　李　波
广东省惠州市龙门县人民医院泌尿外科，广东龙门　516800

［摘要］目的探讨慢性睾丸疼痛大鼠外周痛阈变化及其意义。方法选择24只Wistar大鼠，根据随机数字表法分为对照组、模型组及假手术组，模型组采用免疫诱导法建立大鼠睾丸纤维化慢性疼痛模型，造模前及造模10周后检测3组大鼠的外周热刺激潜伏期（HPL）、机械刺激阈值（PWT）。比较3组大鼠的HPL、PWT。结果3组大鼠造模前的外周HPL、PWT差异无统计学意义（P＞0.05），造模10周后，对照组及假手术组的HPL、PWT较造模前无明显变化，模型组的HPL短于造模前，HPL低于造模前（P＜0.05）；造模10周后，模型组的HPL短于对照组及假手术组，PWT低于对照组及假手术组（P＜0.05），对照组及假手术组的HPL、PWT差异无统计学意义（P＞0.05）。结论慢性睾丸疼痛大鼠外周疼痛阈值降低，其可能同慢性疼痛的致敏作用有关。

［关键词］慢性睾丸疼痛；睾丸纤维化；外周痛阈；热刺激潜伏期；机械刺激阈值

Study of PeriPheral Pain threshold change in rats with chronic orchialgia

WU Guan-tu LI Bo
Department of Uro1ogy，Longmen Peop1e's Hospita1 of Huizhou City in Guangdong Province，Longmen 516800，China

［Abstract］Objective To investigate the change of periphera1 pain thresho1d in rats with chronic orchia1gia and it significance. Methods 24 Wistar rasts were se1ected and divided into contro1 group，mode1 group and sham operation group.Mode1 group was given immune induction way to make the chronic pain mode1 of testicu1ar fibrosis.Periphera1 hot p1ate 1atency (HPL) and paw withdrawa1 thresho1d (PWT) was detected respective1y before mode1ing and after 10 weeks mode1ing.HPL and PWT among three groups was compared respective1y. Results There was no statistica1 difference of periphera1 HPL and PWT before mode1ing among three groups (P＞0.05).After 10 weeks mode1ing，compared with before mode1ing，HPL and PWT had no obvious change after 10 weeks mode1ing in contro1 group and sham operation group，HPL of mode1 group was shorter than that before mode1ing，PWT was 1ower than that before mode1ing (P＜0.05)；after 10 weeks mode1ing，HPL of mode1 group was shorter than that of contro1 group and sham operation group (P＜0.05)，PWT was 1ower than that of contro1 group and sham operation group (P＜0.05).There was no significant difference in contro1 group and sham operation group (P＞0.05). Conclusion Periphera pain thresho1d is decreased in rats with chronic orchia1gia，and it may be re1ated to the sensitization ro1e of chronic pain.

［Key words］Chronic orchia1gia；Testicu1ar fibrosis；Periphera1 pain thresho1d；Hot?p1ate 1atency；Paw withdrawa1 thresho1d

慢性睾丸疼痛是临床常见的泌尿系统疾病，多病程持久，对患者的生活及工作影响较大，临床治疗也颇为困难，严重者甚至需要切除睾丸及附睾进行治疗，存在影响患者性能力、生殖能力的风险[1]。近年来的研究表明[2-4]，局部的慢性疼痛能够引起全身的反应，如内分泌失衡及神经心理障碍等，其与慢性疼痛引起的内分泌神经机制的变化有关，为进一步探讨慢性睾丸疼痛对外周痛阈的影响，本文就慢性睾丸疼痛大鼠模型外周痛阈的变化进行研究。

1.1　材料及仪器

动物实验台、电子天平、移液器、DM.7-YLS-21A冷热板测痛仪（北京达美科技有限公司），Vonfrey丝测痛套件（Aesthesio，Danmic/美国），研磨器，百日咳杆菌、卡介苗、生理盐水等。

1.2　造模方法及分组

选择24只Wistar大鼠（中山大学动物实验室），清洁级，4周龄，（200±25）g，室温饲养，定量给食，自由饮水，间隔光照，适应环境后随机分为对照组、假手术组及模型组，每组8支，分笼饲养，模型组采用免疫诱导法建立睾丸纤维化慢性疼痛模型[5]，模型组及假手术组取左侧睾丸，称重，研磨捣碎，加0.9%氯化钠溶液制成匀浆，浓度为0.5 g/m1，采用等体积福氏佐剂乳化，制备大鼠睾丸组织抗原，大鼠夹脊部位注射0.8 m1致敏大鼠，模型组同时股静脉注射百日咳杆菌1×1010个，同时右侧睾丸注射卡介苗0.1 m1，间隔15 d重复免疫2次，假手术组大鼠模拟免疫过程采用生理盐水。对照组大鼠采用空白对照，不给予药物及手术干预。3组大鼠分别饲养10周。

1.3　热刺激潜伏期（HPL）测定

HPL测定采用DM.7-YLS-21A冷热板测痛仪，分别与造模前及造模10周后进行，检测时间为上午8:00～12:00，大鼠置于室温25℃适应环境30 min，冷热板测痛仪设定温度（52±0.5）℃，预热至恒定温度后，大鼠置于测痛仪观察箱检测平板上，观察大鼠舔爪情况，大鼠放置检测平板至舔爪时间记录为HPL，隔日检测，共检测3次，取平均值。

1.4　机械刺激阈值测定

机械痛阈值测定采用Vonfrey丝测痛套件，分别与造模前及造模10周后进行，检测时间为上午8:00～12:00，大鼠置于室温25℃适应环境30 min，放置于1 mm×1 mm的网格底部的检测箱内，20 min大鼠适应环境安静后，自下往上采用不同刻度的Vonfrey丝刺激大鼠足底部，逐渐增加刺激强度，直至大鼠缩足舔爪的强度，间隔15 min重复刺激3次均为阳性的刺激强度为机械刺激阈值（PWT），3次取平均值。

1.5　统计学处理

数据采用SPSS 11.5统计学软件进行分析，计量资料采用方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1　3组大鼠造模前后HPL的比较

3组大鼠造模前的HPL差异无统计学意义（P＞0.05），造模10周后，对照组及假手术组的HPL较造模前无明显变化，模型组的HPL短于造模前（P＜0.05）；造模10周后，模型组的HPL短于对照组及假手术组（P＜0.05），对照组及假手术组的HPL差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。

表1　3组大鼠造模前后HPL的比较（s，±s）

 

与对照组及假手术组比较，*P＜0.05

2.2　3组大鼠造模前后PWT的比较

3组大鼠造模前的PWT差异无统计学意义（P＞0.05），造模10周后，对照组及假手术组的PWT较造模前无明显变化，模型组的PWT低于造模前（P＜0.05）；造模10周后，模型组的PWT低于对照组及假手术组（P＜0.05），对照组及假手术组的PWT无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

表2　3组大鼠造模前后PWT的比较（g，±s）

 

与对照组及假手术组比较，*P＜0.05

慢性睾丸疼痛是临床常见的泌尿外科疾病，又称为顽固性睾丸疼痛，病程呈现慢性进展过程，其发病机制目前尚缺乏统一的认识，有学者认为，慢性睾丸疼痛与睾丸支配节段神经元的感染、沃勒变性和α2-肾上腺受体激活有关，这些部位的神经元的病变可能导致其对神经末梢的传入信号过度敏感，引发慢性疼痛[6-7]，也有人认为，与睾丸的慢性病变导致的神经末梢刺激以及精索静脉曲张时精索内温度过高引起伴行的生殖股神经缺血、缺氧引起的损伤有关[8-9]。由于目前对发病机制缺乏统一的认识，临床治疗也颇为困难，患者往往病程较长，反复采用非甾体类抗炎药物镇痛治疗，能够缓解部分临床症状，但多难以取得满意的效果，患者的疼痛往往呈现慢性渐进性发展，最终影响其工作和生活，甚至需要进行精索静脉结扎、神经离断、附睾切除等外科治疗[10-11]，而且慢性睾丸疼痛的临床疗效目前尚存在争议，是泌尿外科及男科颇为棘手的慢性疾病。

慢性疼痛的发生目前认为与刺激信号引起外周脊髓背根神经和大脑中枢神经致敏有关。慢性疼痛对机体的影响不仅与局部的疼痛刺激有关，而且对相关的外周和中枢神经致敏作用能够引起全身神经内分泌机制变化和相应脊髓节段的神经功能异常[12-14]，如有研究发现[15-16]，在慢性前列腺炎盆腔疼痛综合征的大鼠脊髓中，炎性介质的表达明显升高，而且与相应脊髓节段支配区域的痛觉过敏有关，而在脊髓损伤的大鼠，其中枢性疼痛程度与脊髓背根中P物质的表达有关，说明脊髓背根神经及其递质的表达水平变化在慢性疼痛致敏的发生过程中具有重要的作用，而且能够引起对应部位的牵涉痛或者器官功能障碍，甚至由于中枢神经递质的表达变化引起情感障碍[17-18]，并发抑郁或焦虑等情感或心理障碍，可见慢性疼痛对机体的影响是广泛的，不仅表现在对生理功能的影响，也表现在对心理功能的影响，其对生理功能的影响可能在相应脊髓支配的牵涉部位表现得更明显。本研究在对慢性睾丸疼痛大鼠模型的研究中发现，慢性睾丸疼痛大鼠模型外周痛阈发生明显变化，造模10周后，模型组大鼠的HPL较对照组及假手术组缩短，PWT较对照组及假手术组降低，说明慢性睾丸疼痛刺激对大鼠外周热刺激及机械刺激痛觉具有易化作用，可引起大鼠外周痛阈降低，其可能与慢性疼痛刺激对脊髓背根神经和中枢神经系统的致敏作用有关[19-20]。既往的研究证实[21-23]，在疼痛发生时，脊髓背根神经中多种与疼痛刺激相关的蛋白表达发生变化，并且与疼痛致敏作用有关，能够为相关蛋白的拮抗剂拮抗，其可能在慢性睾丸疼痛时外周痛阈变化的过程中起关键作用。

综上所述，慢性睾丸疼痛大鼠外周疼痛阈值降低，其可能与慢性疼痛的致敏作用有关。

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收稿日期：（2015-10-29　本文编辑：许俊琴）

［基金项目］广东省惠州市科技局立项资助项目（2014Y272）

［中图分类号］R332　

［文献标识码］A　

［文章编号］1674-4721（2O16）O2（c）-OO43-O3