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胃癌是常见恶性肿瘤之一，发病率与病死率均居高不下，特别是在东亚发展中国家其发病率攀升趋势明显，现阶段胃癌已经成为全球重要卫生问题[1]。该病起病隐匿，患病初期，因个体重视度不高，导致疾病诊出时，往往已处于中晚期，且存在合并转移、侵袭的可能，治疗欠及时，患者预后往往不达预期[2]。转移与侵袭是导致患者不良预后的主要原因。随着医学领域对胃癌疾病进展分子水平的不断深入探索，发现诸多蛋白如转录辅助因子退变样蛋白（vestigial-like family member 4，VGLL4）及促生长因子如再生基因（regeneration gene 1α，REG1α）在胃癌的发生、进展过程中有着举足轻重的地位[3]。本研究旨在通过观察胃癌组织中REG1α、VGLL4 表达及淋巴结转移情况，分析胃癌组织中REG1α、VGLL4 表达与淋巴结转移之间的相关性，以指导临床治疗，旨在改善患者预后。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取2019年10月至2020年10月上饶市人民医院收治的82 例胃癌患者作为研究对象，根据患者是否合并淋巴结转移分为转移组（55 例）与未转移组（27 例）。转移组中，男30 例，女25 例；年龄34～82 岁，平均（60.65±9.46）岁；贲门肿瘤34 例；非贲门肿瘤21 例；分化程度[5]：低分化38 例，中高分化17例；淋巴结转移41 例；临床分期[6]：Ⅰ～Ⅱ期26 例，Ⅲ～Ⅳ期29 例。未转移组中，男17 例，女10 例；年龄33～82 岁，平均（59.45±8.52）岁；贲门肿瘤18 例，非贲门肿瘤9 例；分化程度：低分化19 例，中高分化8 例；淋巴结转移20 例；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期12 例，Ⅲ～Ⅳ期15 例。两组的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。纳入标准：均符合胃癌相关诊断标准[4]；临床各方面无丢失和缺损；在本院行胃癌根治术者；未合并其他脏器严重疾病。排除标准：合并免疫、血液系统异障碍者；合并神经功能异常者；合并胃部分切除术病史者；凝血功能差。

1.2 方法

主要试剂：鼠抗人REG1α 单克隆抗体，购自美国Neomarkers 公司；兔抗人VGLL4 单克隆抗体，购自武汉博士德生物技术有限公司。链酶菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（streptomyces avidin peroxidase linkage，SP）试剂盒、胰蛋白酶及二氨基联苯氨酶底物显色试剂盒均购自福州迈新公司。标本准备：各组织标本均脱水，经10%甲醛固定，二甲苯透明；常规石蜡包埋，5 μm 连续厚切片。然后根据SP 免疫组化染色法对REG1α、VGLL4 蛋白进行检测，检测过程严格按照说明进行。一抗阴性对照使用磷酸盐缓冲液进行代替。

1.3 观察指标及评价标准

比较两组REG1α、VGLL4 阳性表达率，并分析上述蛋白表达与淋巴结转移的相关性。REG1α、VGLL4表达结果判断[7]：根据染色强度、阳性细胞百分比判定。①染色强度：阳性标准为在细胞核或细胞浆内出血棕黄色或褐色颗粒。无色记0 分，灰黄色记1 分，金黄色记2 分，棕褐色记3 分。②阳性细胞率计算：从每张切片中随机选取5 个高倍视野并计算、观察阳性细胞数，阳性细胞率=阳性细胞数/观察细胞数×100%。0 分：无阳性细胞，1 分：阳性细胞<10%，2 分：阳性细胞10%～50%，3 分：阳性细胞＞50%～75%，4 分：阳性细胞>75%。总积分：上述2 项评分的乘积。阳性：总积分>4 分。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（

±s）表示，两组间比较采用t 检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2 检验；采用Pearson 相关性分析对REG1、VGLL4 与淋巴结转移的相关性进行分析，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组REG1α、VGLL4 表达情况的比较

转移组REG1α 阳性表达率高于未转移组，VGLL4 阳性表达率低于未转移组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 两组REG1α、VGLL4 表达情况的比较[n（%）]

2.2 REG1α、VGLL4 与淋巴结转移的相关性

Pearson 相关性分析结果显示，REG1α 表达与胃癌淋巴结转移呈正相关，VGLL4 表达与胃癌淋巴结转移呈负相关（P＜0.05）（表2）。

表2 REG1α、VGLL4 与淋巴结转移的相关性

3 讨论

胃癌是人类第二位常见的恶性肿瘤，其发病率仅次于肺癌，70%以上的胃癌患者确诊时已是中晚期，预后较差[8]。胃癌主要是遗传、环境、社会等多种因素共同作用的结果，而转移与侵袭是导致患者不良预后的主要原因。胃癌淋巴结转移过程是一个多因素、多步骤作用的结果，诸多研究考虑在此过程中，是否可通过调控某种分子的表达，来延缓或者阻断淋巴癌转移，继而控制病情进展，为治疗争取时间窗口，以改善患者预后[9-10]。

REG1α 是新发现的生长因子，主要存在并集体于胃黏膜中，正常情况下表达低，只有在胃黏膜遭受各种理化因子损害时表达，具有修复黏膜的作用[11]。周群燕等[12]发现REG1α 的表达在正常胃黏膜、萎缩胃黏膜及胃癌组织中出现进行性加重现象，表明REG1α 极大可能在癌变过程中发挥举足轻重的作用，但具体机制尚不清楚。国外报道指出，REG1α 在低分化胃癌中呈高表达，而高表达REG1α 者预后较差[13]。但目前有关在胃癌组织中上调的机制尚未明确，但认为可能与胃泌素、白细胞介素-6、淋巴结转移等有关[14]。VGLL4 是新近发现的抑癌基因，诸多研究显示，VGLL4 在多种信号通路中发挥重要作用[15-17]。且VGLL4 可通过特殊通路竞争性阻断某种信号通路，继而在细胞增殖、分化、转移及上皮-间质转化等方面产生作用，最终达到控制肿瘤生长的目的。韩新影等[18]指出，VGLL4 在抑制胃癌疾病进展中具有重要作用。本研究转移组REG1α 阳性表达率高于未转移组，VGLL4 阳性表达率低于未转移组，差异有统计学意义（P＜0.05）；Pearson 相关分析结果显示，REG1α 表达与胃癌淋巴结转移呈正相关，VGLL4 表达与胃癌淋巴结转移呈负相关（P＜0.05），提示胃癌组织中REG1α 表达增高、VGLL4 表达下降可能提示胃癌发生转移。然而本研究样本量偏少，实验结果可能存在偏倚，后期有待进一步扩大样本深入研究。

综上所述，REG1α、VGLL4 可作为评估胃癌患者是否发生淋巴结转移的有效指标，且其表达情况与胃癌淋巴结转移存在显著相关性。

[参考文献]

[1]李仲，朱正秋.术前脂蛋白水平与胃癌淋巴结转移的相关性及其对胃癌预后的预测价值[J].现代肿瘤医学，2020，28（9）：1502-1507.

[2]韩永军，牛福勇.胃癌患者Slingshot-1 表达与预后的相关性研究[J].胃肠病学，2018，23（9）：28-31.

[3]闵丛丛，张静，王晔，等.术前预测胃癌淋巴结转移的分子标志物研究[J].中华消化杂志，2020，40（6）：373-379.

[4]Mickle MK，Adhikary G，Shrestha S，et al.VGLL4 inhibits YAP1/TEAD signaling to suppress the epidermal squamous cell carcinoma cancer phenotype[J].Mol Carcinog，2021，47（6）：445-447.

[5]汤代彬，马军，袁建伟，等.外科治疗的早期胃癌淋巴结转移危险因素分析[J].国际外科学杂志，2020，47（8）：518-522.

[6]赵璐，杜小明.血管内皮生长因子和性别决定区Y 框蛋白2在胃癌中的表达及与预后的关系[J].安徽医药，2020，24（4）：746-750.

[7]Ikoma N，Estrella JS，Blum M，et al.Central Lymph Node Metastasis in Gastric Cancer Is Predictive of Survival After Preoperative Therapy[J].J Gastrointest Surg，2018，22（5）：1-9.

[8]崔恒锋，吉巍巍.miR-660-3p 下调REG4 对胃癌细胞增殖，迁移，侵袭的影响及其机制研究[J].现代消化及介入诊疗，2020，25（1）：61-65.

[9]Link H，Angele M，Schüller M，et al.Extra-capsular growth of lymph node metastasis correlates with poor prognosis and high SOX9 expression in gastric cancer[J].Bmc Cancer，2018，18（1）：483.

[10]巫晓龙，陈小龙，许杰，等.胃癌患者外周血和肿瘤组织中Treg 细胞及其亚群表达的临床意义[J].中华普通外科杂志，2018，33（7）：616-617.

[11]王晖，赵亚刚.人胃癌组织中Runx3 表达水平与淋巴结转移的相关性研究[J].检验医学与临床，2020，17（5）：625-626.

[12]周群燕，葛洪超，李雅琳，等.胃癌中Reg1α 和STAT3 的表达水平与临床特征的关系[J].国际消化病杂志，2018，38（6）：70-73.

[13]Mireille M，Sylvaine HB，Nicolas C，et al.Regenerating isletderived 1α （REG-1α）protein increases tau phosphorylation in cell and animal models of tauopathies[J].Neurobiol Dis，2018，119（24）：815-817.

[14]纪雪华，秦小洁，齐卫卫．胃癌组织中轴蛋白、结肠癌转移相关基因1 蛋白的表达及临床意义[J].中国医药导报，2019，16（14）：92-95．

[15]陈萍，张钦华，刘琼茹.E-钙黏素及β-连环素在胃癌分型中的表达及临床意义[J].中国医药科学，2019，9（15）：14-17.

[16]段军，邓少华，邓涛，等.miR-211，LARP1，VGLL4 在胃癌组织中的表达及意义[J].临床与病理杂志，2018，38（11）：2343-2350.

[17]赵凯丰，刘慧英，江道亮，等．胃癌组织中FHIT、Bcl-2 蛋白表达与幽门螺杆菌感染的关系[J].中国医药导报，2019，16（5）：100-103，封4.

[18]韩新影，刘红正，孙杰，等.VGLL4 蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达及其临床意义[J].中国现代医学杂志，2018，28（11）：50-53.