抗核抗体与甲胎蛋白在原发性肝癌中的诊断及预后评估价值
周小娟 刘联斌 刘振华
江西省赣州市肿瘤医院检验科，江西赣州 341000
[摘要]目的 探究抗核抗体（ANA）与甲胎蛋白（AFP）在原发性肝癌中的诊断及预后评估价值。方法 选取2016年10月至2018年6月赣州市肿瘤医院收治的142例肝病患者为研究对象，根据患者病理检查结果分为原发性肝癌组（65例）和非肿瘤性肝病组（77例），分别采用电化学发光法和ELISA法检测AFP、ANA水平，比较两组AFP、ANA水平，计算各指标单独及联合的诊断价值，并分析AFP、ANA表达水平对原发性肝癌患者预后的预测价值。结果 原发性肝癌组患者血清ANA和AFP水平均高于非肿瘤性肝病组，差异有统计学意义（P＜0.05）。ANA和AFP联合诊断原发性肝癌的敏感度、特异度和准确度分别为84.62%、83.11%、83.80%，其敏感度和准确度均高于单项检测指标，差异有统计学意义（P＜0.05）；随访结束，65例原发性肝癌患者41例出现疾病进展，其中疾病进展患者的ANA和AFP水平均高于无疾病进展者，差异有统计学意义（P＜0.05）；ROC曲线分析显示，ANA、AFP单项及联合检测对原发性肝癌患者预后评估的AUC分别为0.759、0.789、0.892，联合检测AUC高于单项检测，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 ANA和AFP在原发性肝癌中存在异常表达，二者联合检测对于原发性肝癌的诊断和预后均有较高的评估价值。
[关键词]抗核抗体；甲胎蛋白；原发性肝癌；诊断；预后
原发性肝癌是全球常见的恶性肿瘤之一，死亡率极高，且患者接受根除术治疗后极易转移和复发，严重危害人类生命和健康[2]。目前，原发性肝癌尚无准确可靠的早期诊断方法，临床诊断主要依靠影像学和血清标志物检测，但仍存在一定漏诊和误诊的几率[3]，因此，原发性肝癌的早期诊断仍然是一个重难点。甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是经典的肝癌肿瘤标志物，但AFP在早期原发性肝癌中其灵敏度很低，检测阳性时患者可能已发展到中期或晚期[4-5]。抗核抗体（anti-nuclear antibody，ANA）主要用于系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的辅助诊断，但越来越多的研究发现ANA在恶性肿瘤中存在异常表达[6-7]。基于此，本研究将通过检测ANA和AFP表达情况，探索两指标对原发性肝癌诊断和预后的临床价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2016年10月至2018年6月赣州市肿瘤医院收治的142例肝病患者为研究对象，根据患者病理检查结果分为原发性肝癌组（65例）和非肿瘤性肝病组（77例）。原发性肝癌组中，男37例，女28例；年龄32～76 岁，平均（56.38±11.27）岁；平均病程（2.23±0.53）年。非肿瘤性肝病组中，男45例，女32例；年龄29～75 岁，平均年龄（58.41±10.65）岁；平均病程（2.37±0.68）年。两组患者的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究已通过医院医学伦理委员会审批，患者均签署知情同意书。
1.2 纳入及排除标准
纳入标准：入组患者经影像学、病理学检查确诊，其中原发性肝癌的诊断参照《原发性肝癌诊疗规范》[8]中的相关定义；依从性好，可完成随访。
排除标准：合并其他恶性肿瘤；伴有糖尿病、自身免疫性疾病等病情无法控制者；存在精神类疾病；处于妊娠、哺乳期女性。
1.3 方法
患者明确确诊后采集空腹外周血5 ml，室温下3000 r/m离心10 min，分离上层血清，置于-80℃冰箱待测。采用ELISA法检测血清ANA水平，试剂盒购自德国欧蒙医学实验诊断股份公司，ANA＞18 U/ml为阳性。采用电化学发光法检测血清AFP水平，试剂盒购自中国原子能科学研究所，AFP≥20 μg/L为阳性。
1.4 观察指标及评价标准
①比较两组的血清ANA和AFP水平。②分析ANA、AFP单独及二者联合对原发性肝癌的诊断效能，计算ANA、AFP诊断原发性肝癌的灵敏度、特异度及准确度，其中灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%， 特异度=真阴性/（假阳性+真阴性）×100%，准确度=（真阳性+真阴性）/总例数×100%。③对于原发性肝癌患者每隔3个月进行门诊复查，记录患者病情进展情况，其中出现肿瘤转移、复发或死亡即为疾病进展，末次随访时间为2020年10月31日。比较不同预后ANA和AFP表达水平，及其对预后的评估价值。
1.5 统计学方法
采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；绘制ROC曲线，计算AUC，明确最佳诊断阈值及诊断效能，AUC的比较采用Z检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者血清ANA和AFP表达的比较
原发性肝癌组患者血清ANA和AFP水平均高于非肿瘤性肝病组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表 1）。
表1 两组患者血清ANA和AFP表达的比较（±s）
2.2 ANA和AFP诊断原发性肝癌的效能
ANA与AFP联合检测诊断原发性肝癌的灵敏度、准确度高于二者单独检测，差异有统计学意义（P＜0.05）；而三者的特异度比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表 2）。
表2 ANA和AFP两项联合检测诊断原发性肝癌的效能[%（n/N）]
与 ANA 比较，aP＜0.05；与 AFP 比较，bP＜0.05
2.3 原发性肝癌患者不同预后ANA和AFP表达的比较
随访结束，65例原发性肝癌患者41例出现疾病进展，其中疾病进展患者的ANA和AFP水平均高于无疾病进展者，差异有统计学意义（P＜0.05）（表 3）。
表3 原发性肝癌患者不同预后ANA和AFP表达的比较（±s）
2.4 ANA和AFP对原发性肝癌患者预后的评估
ROC曲线分析显示，ANA、AFP单独及联合检测对原发性肝癌患者预后评估的AUC分别为0.759、0.789、0.892， 联合检测 AUC 高于单项检测（ZANA：2.326，P=0.020；ZAFP：2.287，P=0.022）（图 1，封三）。
图1 ANA和AFP对原发性肝癌患者预后评估的ROC曲线
3 讨论
肝癌发病隐匿，早期并无特异性临床症状，疾病进入晚期后逐渐表现出肝痛、乏力、消瘦、腹水等症状。血清AFP常用于原发性肝癌的临床诊断，但部分高分化或分化很差的肝癌患者可能不产生AFP，同时，在慢性肝炎等非肿瘤疾病中也存在AFP升高的现象[9]。还有研究显示，女性妊娠期间，AFP会出现生理性升高[10]。因此，仍需要更为灵敏的实验室指标，以降低原发性肝癌的临床误诊率。
自身抗体是机体产生针对自身正常组织抗原的相应抗体，其过度表达常与自身免疫性疾病的发生发展有关[11]。近年来，研究显示，自身抗体在多种肿瘤疾病中存在异常表达，肿瘤可刺激机体产生免疫反应，分泌抗相关抗原的自身抗体[12]。ANA是自身抗体中的重要成员，麦涛等[13]研究发现，肺癌患者血清ANA水平高于肺部良性疾病患者和健康对照，其联合肿瘤标志物对肺癌的早期诊断有较好的诊断效能。本研究结果显示，与非肿瘤肝病患者比较，原发性肝癌患者血清ANA、AFP水平升高，且两者联合检测可有效提高对原发性肝癌诊断的敏感度和准确度（P＜0.05）。提示ANA、AFP联合检测可作为一个临床检验项目组合作为对原发性肝癌的辅助诊断和警示。
肿瘤患者自身抗体的出现可能是机体的免疫监视作用，范素青等[14]通过间接免疫荧光法检测ANA表达，发现胃癌患者ANA表达高，其中均质型ANA表达患者预后较差。Skare等[15]研究显示，ANA水平可反映宫颈癌患者机体免疫功能状态，并对其预后有一定的评估价值。关于AFP与原发性肝癌的临床研究中发现，AFP水平与肿瘤大小、组织分型及预后不良密切相关[16-17]。但亦有研究报道，AFP与原发性肝癌患者预后无关[18]。进一步分析ANA、AFP表达与原发性肝癌患者预后的关系，发现疾病进展患者ANA和AFP水平均高于无疾病进展者。ROC曲线分析显示，ANA、AFP单项及联合对于原发性肝癌患者预后评估均有一定的价值，但联合检测AUC高于单项检测（P＜0.05），提示对原发性肝癌患者临床病情监测时，可加强自身免疫抗体的检测，ANA、AFP联合检测对于患者临床预后有较高的评估价值。
综上所述，ANA和AFP在原发性肝癌中存在异常表达，二者联合检测可提高原发性肝癌诊断的敏感度和准确度，且ANA、AFP联合检测可用于患者预后评估，这为临床的诊断和治疗提供更为有力的证据和方向，可减少患者不必要的检查，降低误诊率。但本研究纳入样本量较少，今后考虑加大样本量深入分析。
[参考文献]
[1]王双佳，李秀东，苏旭，等.原发性肝癌患者术后肝外转移复发分析[J].中华肝胆外科杂志，2018，24（5）：341-343.
[2]蔡宗洋，马洺远，林纲毅.肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌的预后及安全性分析[J].中国医药科学，2020，10（2）：213-215.
[3]孙智珺，夏天.CT联合血清AFP、TSGF、GP73水平检测对原发性肝癌诊断效能的影响[J].中国地方病防治杂志，2018，33（2）：229-231.
[4]吴迎澜，邓淑珍，洪欣，等.磁共振成像联合血清甲胎蛋白对原发性肝癌诊断的价值分析[J].中国当代医药，2019，26（21）：112-114.
[5]薛莎，张露，谢军，等.血清 FER、AFP 及 AFP-L3 对肝癌患者的诊断效果[J].中国医药科学，2017，7（15）：190-192.
[6]刘伟、田鹏飞、郭珊、李冰.抗核抗体与特异性自身抗体在自身免疫性疾病诊断中的价值[J].中国卫生检验杂志，2020，30（15）：19-21.
[7]Alexandru V，Sandra F，Gerardo GG，et al..Antinuclear antibodies and cancer：A literature review[J].Crit Rev Oncol Hematol，2018，127（1）：42-49.
[8]中华人民共和国卫生部.原发性肝癌诊疗规范（2011年版）[J].临床肝胆病杂志，2011，27（11）：1141-1159.
[9]孔令希，覃山子，秦雪，等.PIVKA-Ⅱ、AFP、RDW 联合检测在肝细胞癌中的诊断价值[J].广西医科大学学报，2018，35（6）：839-841.
[10]范丽.探讨孕中期血清甲胎蛋白、游离β人绒毛膜促性腺激素联合游离雌三醇（uE-3）对双胎妊娠母婴不良妊娠结局的预测[J].中国优生与遗传杂志，2020，28（8）：96-99.
[11]陈水绵，俞翀曌，李恩灵，等.自身免疫性疾病患者及健康体检者自身抗体相关实验室指标分析[J].检验医学，2018，33（1）：31-36.
[12]魏妙妙，蒲传强.恶性肿瘤相关的炎性肌病患者自身抗体研究进展[J].中华神经科杂志，2016，49（10）：802-805.
[13]麦涛，刘琳，王加强，等.抗核抗体联合肿瘤标志物在肺癌早期诊断中的应用价值[J].川北医学院学报，2019，34（4）：373-376.
[14]范素青，周彩莲，周芸，等.间接免疫荧光法检测抗核抗体对胃癌患者病情及预后的评价价值[J].中国卫生检验杂志，2019，29（17）：92-93，105.
[15]Skare TL，Neppel A，Machoski MCC，et al.Antinuclear antibodies in patients with cervical lesions and invasive cervical cancer[J].Immunol Lett，2019，208（5）：8-10.
[16]燕丽香，孙红梅，李源，等.甲胎蛋白水平对丙肝相关性肝癌患者TACE术后的预后价值[J].南京医科大学学报（自然科学版），2019，39（7）：1021-1023.
[17]Chen W，Peng J，Ye J，et al.Aberrant AFP expression characterizes a subset of hepatocellular carcinoma with distinct gene expression patterns and inferior prognosis[J].J Cancer，2020，11（2）：403-413.
[18]甘雨，于新发，周成宇，等.甲胎蛋白在原发性肝癌的诊断和预后判断中的临床价值[J].海南医学，2016，27（6）：891-894.
Diagnostic and prognostic value of antinuclear antibody and alpha-fetoprotein in primary liver cancer
ZHOU Xiao-juan LIU Lian-bin LIU Zhen-hua
Department of Laboratory Medicine,Ganzhou Cancer Hospital,Jiangxi Province,Ganzhou 341000,China
[Abstract]Objective To explore the value of anti-nuclear antibody(ANA)and alpha-fetoprotein(AFP)in the diagnosis and prognosis evaluation of primary liver cancer.Methods A total of 142 patients with liver disease admitted to Ganzhou Cancer Hospital from October 2016 to June 2018 were selected as the research subjects,and divided into primary liver cancer group(65 cases)and non-neoplastic liver disease group(77 cases)according to the pathological examination results.The levels of AFP and ANA were detected by electrochemiluminescence and ELISA,respectively.The levels of AFP and ANA were compared between the two groups,and the diagnostic value of each index alone and combined was calculated.The prognostic value of AFP and ANA expression levels in patients with primary liver cancer was analyzed.Results The levels of serum ANA and AFP in primary liver cancer group were higher than those in nontumor liver disease group,the differences were statistically significant(P＜0.05).The sensitivity,specificity and accuracy of ANA combined with AFP in the diagnosis of primary liver cancer were 84.62%,83.11% and 83.80%,respectively.Its sensitivity and accuracy were higher than those of single index,the differences were statistically significant(P＜0.05).At the end of follow-up,there were 41 cases with disease progression in the 65 patients with primary liver cancer.The levels of ANA and AFP in patients with disease progression were higher than those without disease progression,the differences were statistically significant(P＜0.05).ROC curve analysis showed that the AUC values of ANA,AFP and their combination for evaluating prognosis of patients with primary liver cancer were 0.759,0.789 and 0.892,respectively.AUC of combined detection was significantly higher than that of single index,the difference was statistically significant(P＜0.05).Conclusion ANA and AFP are abnormally expressed in primary liver cancer.The combined detection of the two indexes is of high value in the diagnosis and prognosis evaluation of primary liver cancer.
[Key words]Anti-nuclear antibody;Alpha-fetoprotein;Primary liver cancer;Diagnosis;Prognosis
[中图分类号]R735.7
[文献标识码]A
[文章编号]1674-4721（2021）11（c）-0170-04
[基金项目]江西省赣州市指导性科技计划项目（GZ2016ZSF 196）。
（收稿日期：2021-03-29）