肺结核是传染性疾病，传播的范围较大，因此在发现疾病时需要对患者实施积极治疗，患者发生肺结核疾病时，若治疗不及时会发展为肺纤维化，还容易导致肺部形成干酪样变或者形成空洞，容易对患者的肺部造成不可逆的伤害，若结核病菌伤害到大血管，还有可能引起患者咳血或者肺部囊肿，对患者的身体伤害非常大，虽然现在的医疗水平可以治疗[1]，但是治愈后对患者的日常生活会造成一定的影响，使患者生活质量降低，因此对于肺结核患者的治疗原则为早发现早治疗，预防对肺部造成损伤。肺结节也是常见疾病，容易使患者多系统受累，具有多种临床表现，由于上述两种疾病具有相似之处，常常发生误诊情况，而实施一项有效的诊断较为重要，因此，本研究对结核分枝杆菌T 细胞斑点试验及肺泡灌洗液T 细胞亚群检测在肺结节病和肺结核鉴别诊断中的作用进行分析。

选取2019年3月至2020年3月江西省胸科医院结核科收治的60 例肺部疾病患者作为研究对象，根据疾病的类型不同，将其分为观察组（肺结节病，30 例）和对照组（肺结核病，30 例）。观察组中，男20 例，女10 例；年龄30～70 岁，平均（56.17±1.21）岁；病程3～8 个月，平均（5.33±0.54）个月。对照组中，男21 例，女9 例；年龄29～69 岁，平均（56.19±1.23）岁；病程3～8 个月，平均（5.31±0.51）个月。两组患者的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审核批准，参与研究者知情同意。纳入标准：对照组患者符合肺结核诊断标准[2]；观察组患者伴有低热、盗汗、乏力等症状，符合肺结节诊断标准[3]，经过影像学检查证实。排除标准：①心脏肝肾等重要器官功能严重不全者；②精神类疾病或者痴呆者；③全身免疫性疾病者。

结核分枝杆菌T 细胞斑点试验：采用江西省胸科医院的结核感染T 细胞检测试剂，使用酶联免疫斑点试验，将诊断结果详细记录。肺泡灌洗液T 细胞亚群检测：采用江西省胸科医院的FACSCanto Ⅱ型流式细胞仪（上海实维实验仪器技术有限公司）实施检测，新鲜的肺泡灌洗液经过尼龙布经痰液和杂质过滤后，离心洗涤2 次，计数并对细胞数进行调节，加入荧光抗体室温避光孵育20 min，加入2 ml 红细胞裂解液，避光10 min，3000 r/min 离心5 min，离心半径为10 cm，加入离心洗涤剂，使用0.5 ml PBS 重悬细胞，采用效准仪器将分辨率调至最佳工作状态，使用软件分析并且获取数据，调节电压，获取细胞总数10 000 个，根据同型对照分析细胞表达情况（CD8+、CD4+、CD3+），计算CD4+/CD8+。

比较两组的阳性率及CD4+/CD8+、CD8+、CD4+、CD3+水平。T 细胞斑点试验阳性率诊断标准：当空白对照孔内斑点数＜6 时，任一实验孔斑点数减去空白孔斑点数≥6，结果即为阳，如果空白对照孔斑点数＞6，那么任一实验孔斑点数大于空白孔斑点数的两倍，结果也表示阳性。

采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t 检验；计数资料用率表示，两组间比较采用χ2 检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

观察组患者结核分枝杆菌T 细胞斑点试验中，结核感染T 细胞斑点试验阳性患者2 例，阳性率为6.67%；对照组患者结核分枝杆菌T 细胞斑点试验中，结核感染T 细胞斑点试验阳性患者11 例，阳性率为36.67%。观察组的结核分枝杆菌T 细胞斑点试验阳性率低于对照组，差异有统计学意义（χ2=11.4621，P=0.0137）。

观察组患者的CD4+/CD8+、CD8+低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），CD4+、CD3+高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 两组患者CD4+/CD8+、CD8+、CD4+、CD3+水平的比较

相关研究显示，结核分枝杆菌是寄生菌的一种，一般需要在活细胞内才能成活，通过飞沫、尘埃传播，患者通过呼吸道吸入病菌从而感染发病，结核杆菌也称作为结核杆菌、结核菌[4-6]，感染病菌后可导致人体发生结核病，一般以肺结核疾病较为常见，结核杆菌进入人体时不会立刻发病，当人体出现免疫力下降或者吸毒后，病菌容易发生病变，导致肺结核形成，结核分枝杆菌为抗酸性杆菌[7-10]，对于营养环境要求较为严格，采取培养法进行病菌培养，具有繁琐、时间较长等不足，但是结果比较准确，能够通过肉眼直接观察到形成的菌落，作为肺结核诊断、治疗的依据，但是由于培养菌落不具备生长繁殖能力，因此只能实施药敏试验、菌型鉴定等[11-13]。在机体免疫细胞内，T 细胞具有多种优势，例如功能强、数量多等，具有抗感染相关作用，成熟的T 细胞包括两个亚群（CD4+以及CD8+），CD4+主要在辅助T 细胞上表达，能对抗原信号转导进行识别；CD8+在抑制性T 细胞上，能对癌细胞产生杀伤作用，而两者之间具有一定的协同作用，能维持机体免疫平衡[14-16]，反映机体免疫状态情况等。本研究结果显示，观察组患者的CD4+/CD8+、CD8+低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），CD4+、CD3+高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示患者自身细胞免疫紊乱和CD4+、CD3+具有相关性，患者病情越严重，CD8+水平越低。

本研究结果显示，观察组患者结核分枝杆菌T 细胞斑点试验中，结核感染T 细胞斑点试验阳性患者2 例，阳性率为6.67%；对照组患者结核分枝杆菌T 细胞斑点试验中，结核感染T 细胞斑点试验阳性患者11 例，阳性率为36.67%。观察组的结核分枝杆菌T 细胞斑点试验阳性率低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），与李芹等[17]的研究结果一致，提示检测T 淋巴细胞亚群水平对肺结节病的鉴别诊断有重要的临床价值。

综上所述，在肺结节病和肺结核诊断过程中，采用结核分枝杆菌T 细胞斑点试验、肺泡灌洗液T 细胞亚群检测，能对上述疾病有效鉴别，值得在临床中推广运用。

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Differential diagnosis of pulmonary sarcoidosis and pulmonary tuberculosis by T cell spot test and T cell subsets of alveolar lavage fluid

DENG Qun LIU Jian-feng YAO Jia-hui-zi HUANG Jian▲
Department of Tuberculosis, Jiangxi Chest Hospital, Jiangxi Province, Nanchang 330006, China

[Abstract] Objective To study the differential diagnosis of pulmonary sarcoidosis and pulmonary tuberculosis by T cell spot test and T cell subsets of alveolar lavage fluid. Methods A total of 60 patients with pulmonary diseases admitted to the Department of Tuberculosis, Jiangxi Chest Hospital from March 2019 to March 2020 were selected as the research objects. According to the different types of disease, they were divided into observation group (pulmonary sarcoidosis, 30 cases) and control group (pulmonary tuberculosis, 30 cases). Mycobacterium tuberculosis T cell spot test and alveolar lavage fluid T-cell subsets were performed to compare the positive rate and levels of CD4+/CD8+, CD8+,CD4+ and CD3+ between the two groups. Results In the mycobacterium tuberculosis T-cell spot test in the observation group, there were 2 tuberculosis infection T-cell spot test positive patients, the positive rate was 6.67%. In the mycobacterium tuberculosis T-cell spot test of the control group, 11 patients with tuberculosis infection t-cell spot test were positive, the positive rate was 36.67%. The positive rate of mycobacterium tuberculosis T-cell spot test in the observation group was lower than that in the control group, and the difference was statistically significant (P＜0.05). CD4+/CD8+ (1.31±0.07) and CD8+ ([27.41±6.71] %) in observation group were lower than those in control group ([2.91±0.15]and [32.11±7.61] %), and the differences were statistically significant (P＜0.05). CD4+([63.51±7.26] %) and CD3+([88.79±5.31] %) were higher than those in the control group ([41.27±3.1], [76.19±6.21] %), and the differences were statistically significant (P＜0.05). Conclusion In the diagnosis of pulmonary sarcoidosis and pulmonary tuberculosis, mycobacterium tuberculosis T-cell spot test and alveolar lavage fluid T-cell subgroup detection can be used to identify these diseases effectively.

[Key words] Mycobacterium tuberculosis T cell spot test; T cell subsets in alveolar lavage fluid; Pulmonary sarcoidosis; Pulmonary tuberculosis

[中图分类号] R521

[文献标识码] A

[文章编号] 1674-4721（2021）10（c）-0154-03

[基金项目]江西省卫生厅科技计划项目（20165512）。

（收稿日期：2021-04-06）