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宫颈癌在疾病进展中以渐进性呈现，宫颈上皮内瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是其发展至癌变的先兆性表现，根据宫颈病变程度可分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级，其中CIN Ⅲ级具有高度癌变的潜能，在病变过程中，肿瘤细胞的增殖、分化占据重要位置[1]。临床研究显示，信号转导与转录因子（signal trans ducer and activator of transcription 3，STAT3）、表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor，EGFR）在肿瘤细胞中的表达与其正常表达存在明显差异，提示其可能与肿瘤发生、进展密切相关[2]。鉴于此，本研究探讨CIN 患者组织中STAT3、EGFR 表达变化及其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集辽阳市中心医院2018年12月～2019年12月收治的260 例CIN 患者的临床资料，均经临床病理组织检查确诊，根据宫颈病变情况分为CIN Ⅰ级组（轻度非典型增生，102 例）、CIN Ⅱ级组（中度非典型增生，89 例）、CIN Ⅲ级组（重度非典型增生和原位癌，69 例）。CINⅠ级组中，年龄为23～65 岁，平均（44.28±5.48）岁；体重指数（BMI）20.1～24.8 kg/m2，平均（22.45±1.15）kg/m2。CIN Ⅱ级组中，年龄25～64 岁，平均（44.59±5.27）岁；BMI 20.8～25.2 kg/m2，平均（23.06±1.58）kg/m2。CIN Ⅲ级组中，年龄23～65 岁，平均（44.22±5.38）岁；BMI 20.2～25.8 kg/m2，平均（23.11±1.31）kg/m2。纳入标准：①所有患者在样本收集前均未行放化疗、激素治疗；②未见其他恶性肿瘤疾病，无严重心、肝、肾等重要器官障碍，无免疫性疾病；③所有患者临床资料完整，并经患者同意翻阅临床资料。三组的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

采用Western blot 对所有患者的STAT3、EGFR表达水平进行检测，所有患者均取适量组织，加入蛋白裂解液1 mL，采用匀浆器在4℃下进行匀浆，以12 000 r/min 离心30 min，按操作规范提取蛋白，将蛋白裂解液与细胞裂解液按1∶9 比例混合，搅匀后取上层清液，采用紫外分光光度计（北京中西远大科技有限公司，型号：CN61M/752N）对蛋白浓度进行检测。分离蛋白采用SDS-PAGE 凝胶电泳，然后采用PVDF 转膜，5%脱脂奶粉进行过夜处理，将一抗（武汉博士德生物公司）加入，孵育2 h 后，将生物素标志的二抗（武汉博士德生物公司）加入，孵育1 h。内参照采用GAPDH，同时采用胶片条带进行扫描分析，目的蛋白的表达量为蛋白积分光密度和GAPDH 的积分光密度比值。

1.3 观察指标

采用Western blot 对三组宫颈组织的STAT3、EGFR 表达水平进行检测并比较；绘制ROC 曲线图，分析STAT3、EGFR 表达量及其联合检测诊断CIN 程度的价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0 统计学软件处理数据，计量资料用均数±标准差（

±s）表示；重复测量采用重复测量的方差分析，两组比较采用独立样本t 检验；计数资料用百分率（%）表示，采用χ2 检验，绘制ROC 曲线并计算曲线下面积（AUC），其中AUC 值＞0.90 表示诊断性能较高，＞0.70～0.90 表示有一定的诊断性，0.50～0.70表示诊断性能较差，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组宫颈组织STAT3、EGFR 表达水平的比较

Western blot 检测结果显示，CINⅢ级组的STAT3、EGFR 表达水平高于CIN Ⅱ级组及CINⅠ级组，CINⅡ级组的STAT3、EGFR 表达水平高于CINⅠ级组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 三组宫颈组织STAT3、EGFR 表达量的比较（

±s）

与CIN Ⅲ级组比较，*P＜0.05；与CIN Ⅱ级组比较，#P＜0.05

2.2 STAT3、EGFR 表达量及其联合检测诊断CIN 程度的价值分析

绘制ROC 曲线图，结果显示，STAT3、EGFR 诊断CIN 程度的AUC 分别为0.807、0.835，具有一定诊断价值；联合检测AUC 为0.903，且其特异性、灵敏度均高于单一检测，提示联合检测诊断性能高（表2；图1，封三）。

表2 STAT3、EGFR 表达量及其联合检测诊断CIN 程度的价值分析

3 讨论

宫颈癌是严重威胁女性身心健康的恶性肿瘤疾病，有研究指出，早期进行干预治疗有利于改善预后，提高患者生存率[3-4]。CIN 是诱发宫颈癌的主要因素之一，临床根据宫颈病变情况将其分为3 个等级，其中Ⅲ级为高级别宫颈鳞状上皮内瘤变，是宫颈癌变先兆症状之一，尽早进行治疗有利于预防疾病发展至宫颈癌[5-6]。临床研究显示，STAT3 是一种可发挥信号转导、转录调控作用的因子，EGFR 是一种存在于细胞膜表面的糖蛋白受体，其表达水平与细胞恶性转化进程、肿瘤的发生和进展密切相关[7-8]。

STAT3 可对生物体中多种蛋白的表达进行调控，从而对细胞增殖、分化、凋亡及免疫逃逸功能产生影响[9]。有研究显示，其在多种肿瘤组织中均表现出持续性激活状态，提示其持续性激活在肿瘤细胞的恶性转化过程中可能占据重要位置[10]。STAT3 与肿瘤关系最为密切，其在正常细胞中的信号转导中激活较为快速、短暂，故在其表现出持续性激活状态时，提示其可能参与肿瘤的发生与进展[11-12]。本研究结果显示，CINⅢ级的STAT3 表达水平高于CIN Ⅱ级及CIN Ⅰ级；ROC 曲线图结果显示，STAT3 诊断CIN 程度的AUC为0.807，具有一定诊断价值，可见STAT3 表达在宫颈组织病变分级中占据重要位置，提示STAT3 表达与宫颈癌细胞侵袭有关。

EGFR 对细胞增殖、分化具有重要作用。研究指出，其在多种癌症细胞中均表现出较高的表达水平，而肿瘤细胞中EGFR 过度表达易导致细胞不断增殖，从而对肿瘤细胞的凋亡产生抑制作用[13]；同时，其对肿瘤新生血管的生成具有促进作用，进而促进肿瘤细胞的侵袭、转移、发展[14-15]。本研究结果显示，CIN Ⅲ级的EGFR 表达水平高于CIN Ⅱ级及CIN Ⅰ级；ROC曲线图结果显示，EGFR 诊断CIN 程度的AUC 为0.835，具有一定诊断价值，提示EGFR 表达与宫颈病变进展密切相关。

相关研究指出，肿瘤的发生与进展是多种内在、外在因素共同发挥作用的结果。本研究中，STAT3 在CIN Ⅲ级中持续性激活，提示其可作为早期宫颈癌预测的敏感指标之一；EGFR 表达在CIN Ⅲ级中呈现高水平表达，提示其在宫颈癌早期病变组织中具有较好的预测价值。STAT3、EGFR 联合检测的AUC 为0.903，且其特异性、灵敏度均较单一检测高，提示联合检测诊断性能高，STAT3、EGFR 在宫颈组织病变发展过程中共同发挥作用[16]。

综上所述，STAT3、EGFR 表达量均与CIN 程度有关，联合检测其水平具有较高的诊断价值，可早期预测临床宫颈癌病变。

图1 ROC 曲线图（见内文第63页）

[参考文献]

[1]关鑫，刁海丹.EGFR 和PKB 在宫颈癌中的表达和意义[J].肿瘤学杂志，2017，23（9）：798-801.

[2]冯苗苗，李道成，沈宏伟，等.信号转导与转录因子3 和表皮生长因子受体在宫颈不同病变组织中的表达及其临床意义[J].现代生物医学进展，2019，19（22）：4264-4268.

[3]韦娟冰，林静.F10 基因siRNA 干扰对宫颈癌细胞侵袭和凋亡的影响及机制研究[J].中国免疫学杂志，2019，35（13）：1584-1589.

[4]陈永发，杨文，潘兴喜，等.EGFR、VEGF、Ki-67、PTEN 在宫颈癌组织中的表达及其临床意义[J].癌症进展，2019，17（12）：1465-1468，1472.

[5]洪莉，杨将，邢辉，等.信号转导和转录活化因子3 和碱性螺旋-环-螺旋转录因子1 在卵巢恶性上皮肿瘤中的表达[J].中国医药导报，2017，14（24）：118-121.

[6]马丽娜，孙笑，王丽华.1 型胰岛素样生长因子受体和表皮生长因子受体在子宫内膜癌中的临床价值[J].检验医学，2019，34（10）：918-922.

[7]韩琛，姜永杰，王恒孝.信号转导与转录激活因子3 在宫颈癌发生发展中的作用机制研究进展[J].中国免疫学杂志，2019，35（14）：1778-1783.

[8]郑晓霞，孙树兰，苏晋，等.表皮生长因子受体和环氧合酶-2 在宫颈癌中的表达及临床诊断意义[J].国际免疫学杂志，2017，40（2）：161-164.

[9]曹宁，夏百荣，娄阁.HPV 蛋白、miRNAs 和外泌体在宫颈癌炎症作用中的研究进展[J].实用肿瘤学杂志，2020，34（3）：282-285.

[10]徐书方，刘立秋，张玉清，等.miR-152 在IL-6 诱导宫颈癌Hela 细胞增殖和侵袭中的作用及其机制[J].中国免疫学杂志，2020，36（11）：1338-1342.

[11]李芳，张飞燕，郭晓丹，等.STAT3 在宫颈上皮内病变和宫颈癌中的表达及与高危型HPV 感染的关系[J].河北医药，2020，42（4）：569-572，576.

[12]姚文娟，宋会双，史玉卿，等.宫颈腺癌中HPV、IL-6、STAT3 的表达及其相关性[J].实用癌症杂志，2020，35（2）：178-181.

[13]张少娟，严莉，曲洪滨.宫颈癌组织miR-135a-5p、GATA3、STAT3 表达变化及其临床意义[J].山东医药，2019，59（31）：61-63，67.

[14]郑伟，张晗雪，曹荣.宫颈癌组织中STAT3、HMGB1 的表达及临床意义[J].中国医药导报，2019，16（29）：104-107，189.

[15]张沛，岳青芬，侯青霞，等.过表达miR-488-5p 通过靶向TEM8 降低宫颈癌C33A 细胞的增殖和迁移能力[J].中国肿瘤生物治疗杂志，2018，25（12）：1270-1275.

[16]柴芝红，应灵潇，潘一红，等.STMN1 在宫颈癌中表达的临床意义及抑制其表达对宫颈鳞癌SiHa 细胞活力和凋亡的影响[J].中国病理生理杂志，2018，34（6）：1119-1123，1128.

Expression changes and clinical significance of STAT3 and EGFR in cervical intraepithelial neoplasia

GAO Yan-hua
Department of Pathology, Liaoyang Central Hospital, Liaoning Province, Liaoyang 111000, China

[Abstract]Objective To investigate the expression changes and clinical significance of signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) and epidermal growth factor receptor (EGFR) in patients with cervical intraepithelial neoplasia (CIN). Methods The clinical data of 260 patients with CIN admitted to Liaoyang Central Hospital from December 2018 to December 2019 were retrospectively collected. According to the cervical lesions, they were divided into the CIN class Ⅰgroup (mild atypical hyperplasia, 102 cases), the CIN class Ⅱgroup (moderate atypical hyperplasia, 89 cases) and the CIN class Ⅲgroup (severe atypical hyperplasia and carcinoma in situ, 69 cases). The expression levels of STAT3 and EGFR were compared among the three groups, and the ROC curve was drawn to analyze the value of STAT3 and EGFR expression and their combined detection in the diagnosis of CIN. Results Western blot analysis showed that the expression levels of STAT3 and EGFR in the CIN class Ⅲgroup were higher than those in the CIN class Ⅱgroup and the CIN class Ⅰgroup and the differences were statistically significant (P＜0.05). AUC of STAT3 and EGFR in diagnosing CIN was 0.807 and 0.835 respectively, which had certain diagnostic value. The AUC of combined detection was 0.903, and the specificity and sensitivity of combined detection were higher than those of single detection, which indicated that the diagnostic performance of combined detection was high. Conclusion The expression levels of STAT3 and EGFR are all related to the degree of cervical intraepithelial neoplasia. Combined detection of their levels has high diagnostic value and can be used for early prediction of clinical cervical cancer.

[Key words]Cervical intraepithelial neoplasia; Signal transducer and activator of transcription 3; Epidermal growth factor receptor; Correlation