新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）属于新生儿常见疾病之一，其主要病因为各种因素引起的围生期缺氧窒息，使新生儿脑部缺氧、脑部血流量减少，导致胎儿或新生儿不同程度的脑损伤[1-3]。该病的病死率和致残率都比较高[4]，严重者可能出现生长发育落后、智能低下、情感障碍、行为异常甚至癫痫、脑瘫等后遗症[5-6]，近年来关注的重点在于HIE患儿早期脑损伤程度的判断及预后的评估，以利于及早进行临床干预，降低伤残率，减少后遗症的发生。目前HIE的诊断及轻重程度的判断主要是根据病史、临床表现和影像学表现，如头颅CT或磁共振成像（MRI），临床表现易受主观因素的影响，头颅CT 及MRI 虽然存在客观性，但不宜早期床边检查监测，且对HIE 早期预测的灵敏度也有局限性[7]，不利于及时判断病情及动态监测病情的变化；治疗方面，主要是药物的支持、对症处理，严重者采用亚低温、干细胞等治疗改善HIE的预后[8-9]，但由于病情严重程度的判断没有生化指标，临床上常常不能及时有效地对患儿进行个体化评估，因此个体化治疗很难进行[10]，直接影响治疗效果和预后，故临床上需要一个客观、早期的指标来反映HIE的病情及预后。有研究报道，血清S100B蛋白浓度的升高与脑损伤程度及预后紧密相关[11]。本研究分析血清S100B蛋白浓度在不同程度HIE患儿中的差异及临床意义，为HIE的早期诊断、早期干预提供依据，现报道如下。

选取2017年1～12月我院新生儿科收治的150例HIE患儿作为试验组，根据出生时评分、生后意识障碍、肌张力异常、原始反射异常、颅内压升高情况、脑干症状等临床表现及出生72 h后头颅CT或MRI结果将其分为重度HIE组（40例），中度HIE组（50例），轻度HIE组（60例）、选取同期正常健康足月新生儿60例作为对照组，均无缺氧窒息、出血、感染、遗传代谢及神经系统疾病等病史，其母孕期健康分娩过程无异常。对照组中，男28例，女32例；胎龄（38.4±0.7）周；体重（3254±347）g。轻度HIE组中，男33例，女27例；胎龄（38.5±0.9）周；体重（3240±383）g。中度HIE组中，男27例，女23例；胎龄（38.4±0.8）周；体重（3205±398）g。重度HIE组中，男21例，女19例；胎龄（38.5±0.6）周；体重（3226±402）g。各组的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。所有患儿家属均对本研究知情且签署知情同意书。

纳入标准：①所有患儿均符合邵肖梅主编的第5版《实用新生儿学》对新生儿HIE的诊断标准[12]；②患儿均于出生后24 h 内入住我科。

排除标准：①患先天性代谢性者；②先天畸形者；③神经系统发育异常者；④感染性疾病者；⑤产伤所致的颅内出血者；⑥不能坚持随访12个月者。

试验组患儿于出生后第1、3、7天采股静脉血2 ml，标本用离心机离心（3000 r/min，15 min），保留血清500 μl 于-80℃低温冰箱中保存待测S100B蛋白。标本溶血者除外。标本采集期间均无感染、低蛋白血症。重症高胆红素血症等合并症、对照组足月新生儿于出生后第1天采股静脉血2 ml，离心、低温处理同试验组、仪器使用Multiskom Ascent型号酶标仪，B600D型高速离心机，37℃恒温孵育箱（芬兰雷博公司）、S100B蛋白采用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（Adlitteram Diagnostic Laboratories，Inc.，美国）检测。

所有HIE患儿采用电子信息联系及定期门诊复诊等方法完成随访，1～2个月随访1次，随访12个月。随访内容主要包括听力筛查、视力筛查及智能测试，智能测试根据Gesell 发育量表的评估结果，将发育商（DQ）<85分者分为有后遗症组，DQ≥85分者分为无后遗症组。

采用SPSS 18.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，符合正态分布的采用独立样本t 检验或单因素方差分析，非正态分布资料采用Mann-Whitney U 检验；计数资料用率表示，两组间比较采用χ2 检验，以P<0.05 为差异有统计学意义。

三组HIE患儿出生后第3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于出生后第1天，差异有统计学意义（P<0.05）。三组HIE患儿出生后第1天的血清S100B蛋白浓度均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。重度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于中度HIE组和轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）；中度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。

表1 各组出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较（ng/ml，±s）

 

与本组出生后第1天比较，aP<0.05；与对照组同期比较，bP<0.05；与轻度HIE组同期比较，cP<0.05；与中度HIE组同期比较，dP<0.05；“-”表示无数据

随访12个月后的HIE患儿中，有41例患儿出现后遗症，其中脑瘫6例，癫痫5例，听力障碍、视力障碍、智力低下、生长发育落后（DQ<85分）30例。有后遗症组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于无后遗症组，差异有统计学意义（P<0.01）（表2）。

表2 有、无后遗症组患儿出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较（ng/ml，±s）

新生儿HIE 可导致患儿智力发育迟缓、生长发育落后等后遗症，影响患儿的生活质量，目前临床上缺乏敏感的实验室指标，对于病情严重程度的评估也缺乏必要的客观性指标[13-14]。相关研究显示，血液中存在着某些生物标志物与HIE的发生发展密切相关，可以用来早期预测HIE的发生、早期判断脑损伤的轻重[15]，其中报道较多的是S100B蛋白。

S100B蛋白广泛存在于哺乳动物的中枢神经系统，属于钙离子结合蛋白，亦被认为是钙传感器蛋白，多通过与钙结合发挥其生理作用，可100%溶解于中性饱和硫酸铵，是神经系统的特异性蛋白之一，主要分布于中枢神经系统的神经胶质细胞，周围神经系统的雪旺氏细胞中亦多见。S100B蛋白产生后作用于神经元及其生长环境、在人体脑组织内S100B蛋白主要由脑内的神经胶质细胞产生，与人体各组织相比，其在脑组织的浓度最高，S100B蛋白的排泄主要通过肾脏，临床上主要考虑脑脊液标本留取对患儿损伤大，且HIE患儿往往尿较少，不易留取尿液标本，故血液标本最常用、通常健康者血清S100B蛋白浓度很低，当脑损伤发生时，脑脊液中S100B蛋白的浓度升高，脑损伤同时可破坏血脑屏障，使其通透性增加，S100B蛋白从脑脊液进入血液[16]，从而导致血液中S100B蛋白浓度升高，因此，在神经系统损伤早期、影像学未出现异常且临床上尚未出现相应症状体征时，可以通过检测血液中的S100B蛋白浓度来预测，并且可作为判断脑损伤程度的指标。本研究结果显示，三组HIE患儿出生后第1天的血清S100B蛋白浓度均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），提示S100B蛋白参与了HIE 脑损伤过程。本研究结果还显示，三组HIE患儿出生后第3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于出生后第1天，差异有统计学意义（P<0.05）；重度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于中度HIE组和轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）；中度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）；有后遗症组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于无后遗症组，差异有统计学意义（P<0.01），与吴松笛等[17]的大鼠缺血再灌注实验结果相一致，提示S100B蛋白参与了HIE的发病过程，且在早期浓度已明显升高，其用于早期诊断HIE及早期评估预后的敏感性强，HIE 病情较轻者或者病情渐恢复则其浓度下降，原因是S100B蛋白的半衰期短，若血清中S100B蛋白持续升高或下降后再升高，则应注意可能是在原本脑损伤的基础上又发生其他脑损伤。

综上所述，通过本研究对HIE患儿血清S100B蛋白浓度的早期检测及动态观察，血清中S100B蛋白浓度与HIE患儿脑损伤程度的轻重及HIE 预后的评估有较高的临床实用价值，值得临床推广和应用。

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Application of serum S100B protein in hypoxic-ischemic encephalopathy

HUANG Xiao-ling LIN Yue-qing ZHOU Bing-xin SHEN Fei-min▲
Department of Neonatology,Zhangzhou Affiliated Hospital of Fujian Medical University,Fujian Province,Zhangzhou 363000,China

[Abstract] Objective To explore and analyze the application effect and clinical significance of serum S100B protein in hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) in neonates and provide clinical basis for the assessment of HIE condition and prognosis.Methods A total of 150 HIE children admitted to the neonatology department of our hospital from January to December 2017 were selected as the experimental group.The experimental group was divided into the severe HIE group (40 cases),the moderate HIE group (50 cases) and the mild HIE group (60 cases) according to the severity of the condition.A total of 60 normal neonates were selected as the control group.Serum samples of different groups were collected on the 1st,3rd and 7th days after birth,and serum samples of the control group were collected on the 1st day after birth.Serum S100B protein concentration was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA),and the difference of serum S100B protein concentration between the experimental group and the control group was compared.According to the assessment results of Gesell development scale,all the HIE children were divided into the group with sequelae (41 cases) and the group without sequelae (109 cases),and the serum S100B protein concentrations of the two groups on 1st,3rd and 7th days were compared respectively.Results The serum S100B protein concentration of experimental group on the 1st day after birth was higher than that of the control group,and the difference was statistically significant (P<0.05).The serum S100B protein concentration of experimental group on the 3rd and 7th days after birth were higher than those on the 1st day,and the differences were statistically significant (P<0.05).The serum S100B protein concentration of severe HIE group on the 1st,3rd and 7th days after birth were higher than those of the moderate HIE group and the mild HIE group,and the differences were statistically significant (P<0.05).The serum S100B protein concentration of moderate HIE group on the 1st,3rd and 7th days after birth were higher than those of the mild HIE group,and the differences were statistically significant (P<0.05).The serum S100B protein concentration of group with sequelae on the 1st,3rd and 7th days after birth were higher than those of the group without sequelae,and the differences were statistically significance (P<0.01).Conclusion Serum S100B protein concentration in HIE children is higher than that in normal neonates,and the serum S100B protein concentration of children with sequelae is higher than that of children without sequelae.Therefore,detection of serum S100B protein concentration is conducive to the early diagnosis and prognosis evaluation of neonatal HIE disease.

[Key words]Serum S100B protein;Hypoxic-ischemic encephalopathy;Neonates;Early diagnosis;Prognostic evaluation

（收稿日期：2020-02-10）