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Toll样受体（TLR）家族以及CD14是两种重要的模式识别受体，在清除病原体的过程中发挥作用，其基因多态性与感染相关[1]。TLR2本质是细菌脂蛋白的受体，最初被当作介导脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）的细胞信息转导物质[2]。CD14是LPS的受体，但因CD14缺少跨膜区域，不能经过膜传递信息。在天然免疫中，CD14需要TLRs来协同发挥其功能[3]。肺炎链球菌可引起侵袭性或非侵袭性疾病[4]。研究显示每年儿童发生侵袭性肺炎球菌疾病机率为0.63‰[5]。多项TLR2和CD14基因多态性与肺炎链球菌的相关性研究结果并不一致[6-8]，为提供TLR2和CD14基因多态性与肺炎链球菌病易感性关系的证据，现搜集文献进行Meta分析，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

使用计算机检索以下电子数据库：PubMed、CN KI、万方、VIP 等。检索词：Streptococcus pneumoniae、肺炎球菌、TLR、CD14。搜索的文章不需要限制语言的类型。检索文献时间限定为从建库至2017年6月1日。

1.2 文献纳入和排除标准

纳入标准：①公开发布的文献全文；②文献包括独立病例对照试验设计；③对照组的基因型频率均与Hard-Weinberg平衡一致；④文献中包含完整的基因型频率数据。排除标准：①重复出版文献或者仅有摘要的会议论文；②研究不是独立的病例控制；③受试者不是肺炎链球菌肺炎；④个案报道。

1.3 质量测评以及数据提取

质量评估由2名评估者根据搜索条件进行。2名评估者根据队列研究评估文件的质量。从每个研究人群中选择NOS偏倚风险评估标准。如果有争议，予咨询通讯作者讨论并确定。阅读全文后以下信息被提取：①一般信息，包括主题，摘要，作者和出版时间；②受试者的基本特征，包括各基因多态性对应的基因型频率。

1.4 统计学方法

使用Review Manager 5.3软件进行Meta分析。P＞0.1，I2＜50%，采用固定效应模型。反之，采用随机效应模型。漏斗图用来评估潜在发表偏倚。

2 结果

2.1 文献检索结果

对照组全部均为健康人群，纳入论文的对照组符合Hardy-Weinberg定律。最终纳入TLR2与肺炎链球菌病相关的论文为3篇，样本量总计为951例，其中研究组298例，对照组653例。R为显性等位基因，Q为隐性等位基因，RR及RQ表示显性基因型，QQ为隐性基因型（表1）。纳入CD14与肺炎链球菌病相关的论文为2篇，样本量总计为674例，其中研究组199例，对照组475例，C为显性等位基因，T表示隐性等位基因，CC及CT表示显性基因型，TT为隐性基因型（表 2）。

表1 纳入TLR2文献基本特征（例）

表2 纳入CD14文献基本特征（例）

2.2 Meta分析结果

显性等位基因vs.隐性等位基因时，Q=24.67，P＜0.0001，I2=84%，异质性高，采用随机效应模型得到OR=0.76（95%CI=0.40～1.46），Z=0.82，P=0.41，差异无统计学意义（图1），即未见TLR2 Arg753Gln+CD14-159C/T多态性与肺炎链球菌病易感性相关。

采用相同方法分析显性基因型（RR/RQ+CC/CT）vs.隐性基因型时（QQ+TT），OR=0.70，95%CI=0.34～1.44，P=0.33，差异无统计学意义（图2），未见TLR2Arg753Gln+CD14-159C/T多态性与肺炎链球菌病易感性相关。

漏斗图评估潜在发表偏倚，结果提示，未发现显著偏倚（图 3）。

3 讨论

肺炎链球菌可定植于正常人鼻咽部，严重感染时可经血流播散导致脓毒症、腹膜炎、脑膜炎等肺炎链球菌疾病[10]。基于南亚国家的研究表明侵袭性细菌性疾病中约12.8%是由肺炎链球菌引起，且大部分发生于5岁以下的儿童，病死率高[11]。个体对肺炎链球菌的易感性与细菌LPS相关的免疫反应相关[12]。Tomlinson等[13]使用表面脂蛋白缺陷的肺炎球菌突变株验证得出：脂蛋白是TLR介导的肺炎链球菌免疫应答的关键决定因素。CD14及Toll样受体是两种重要的模式识别受体，在介导免疫反应并清除病原体上发挥一定作用[14]。目前研究证实，LPS介导的免疫体系激活过程中，LPS 结合蛋白（LPS blinding protein，LBP）以及CD14是最重要环节。CD14是LPS以及LBP的受体，但由于CD14缺少跨膜区以及胞内结构区域，所以无法通过细胞膜进行信息传递。CD14功能需要TLRs来共同介导细胞信号转导[3]。TLR2可识别革兰阳性菌（如肺炎链球菌）的主要致病因素——细胞壁成分肽聚糖PGN与脂磷壁酸LTA[15]，从而激活细胞内信号传导机制，CD14在这过程并未发挥作用，但由于在不借助外力的情况下TLR2识别抗原效率低下，在CD14的协助下效率能增加百倍以上[16]。TLR2和CD14的协同作用不仅存在于革兰阳性菌感染，其多态性与炎症性肠病[17]、口腔肿瘤[18]和哮喘[19]等疾病的易感性亦相关。研究表明肺炎链球菌感染时，TLR2基因敲除小鼠较野生型小鼠更易发生败血症或脑膜炎 [20]，提示TLR2和CD14基因态性可能与肺炎链球菌易感性相关。

图1 TLR2+CD14显性等位基因vs.隐性等位基因的森林图

图2 TLR2+CD14显性基因型vs.隐性基因型的森林图

图3 漏斗图评价TLR2+CD14纳入文献的发表偏倚

Moens最早研究TLR多态性与侵袭性肺炎链球菌病相关性，发现TLR2和TLR4基因多态性与侵袭性肺炎链球菌病不相关，但该研究未将TLR信号转导通路上的多态性位点纳入，故研究有其局限性。其后 Yuan[7]和 Tellería-Orriols[8]的研究更深入，研究对象增加为TLR2，TLR4和CD14的多态性，但仍未发现TLR2、CD14基因多态性与肺炎链球菌病的相关性。本Meta分析纳入3篇文献，最终得到结论：不论是等位基因还是各类基因型的OR值95%CI均经过1，其P值均>0.05，表明TLR2基因Arg753Gln和CD14启动子-159C/T多态性与肺炎链球菌病易感性不相关。

本文不足之处：①纳入对象少，总样本量欠缺。②一种疾病的易感性与多种基因多态性位点相关。即使研究综合了TLR2与CD14的多态性位点，但没有考虑TLR信号转导通路上的其他位点，如TNF-a、IL-6、IL-10等基因多态性位点。③疾病的发生是由于基因和环境的共同作用，研究缺乏基因-基因和基因-环境相互作用的数量。以上缺陷导致本Meta分析的可信度受到一定影响。期待今后更多设计良好的研究得出更切实的结论。

[参考文献]

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