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感染多重耐药菌是临床导致患者死亡、增加医疗成本、住院时间的重要因素之一[1]。多重耐药菌多为条件致病菌，是指对常用的多种抗微生物药物同时出现耐药性，其致病机制主要为外排膜泵基因突变。另外,产生超广谱酶及外膜渗透性的改变也可致病[2]，沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸菌属、粘质沙雷菌、阴沟杆菌、大肠杆菌、肺炎杆菌等革兰阴性杆菌占较大比例。临床上抗微生物药物的滥用、不合理应用会增加微生物的耐药性，延误病情。探讨医疗机构的微生物检验的多重耐药情况十分重要，故本研究分析本院2014～2017年微生物检验中的多重耐药情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 菌株来源

选取2014～2017年我院送检的临床各科室标本12306份，科室分布：肿瘤科2306份，骨外科2300份，烧伤科2100份，心胸外科2000份，呼吸内科2200份，消化内科1400份。2014年临床标本3076份，2015年临床标本3078份，2016年临床标本3076份，2017年临床标本3076份。由法国生物梅里埃公司ATBTM VITEK 2-Compact全自动药敏检测仪和细菌鉴定，根据《全国临床检验操作规程》进行细菌分离鉴定。

1.2 培养基及药敏纸片

采用英国Oxoid公司生产的血平板、M-H平板及抗菌药物。

1.3 药敏试验方法

采用法国生物梅里埃VITEK 2-Compact全自动药敏检测仪和细菌鉴定进行药敏试验和菌株鉴定，按照2012年美国临床实验室标准委员会（CLSI）标准评估，按照原卫生部办公厅《关于抗菌药物临床应用管理有关问题的通知》预警细菌耐药情况。

1.4 质控菌株

采用ESBLs纸片法筛选及确证试验进行肺炎克雷伯菌ATCC700603及大肠埃希菌ZTCC25922阴性及阳性质控菌；药敏试验质控菌为标准质控菌株铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603（产超广谱β内酰胺酶阳性质控菌株），大肠埃希菌ATCC25922、粪肠球菌ATCC29212，金黄色葡萄球菌ATCC25923。

1.5 多重耐药情况评估标准

按照原卫生部办公厅《关于抗菌药物临床应用管理有关问题的通知》预警细菌耐药情况评估，目标细菌停用为耐药率＞75%，参照药敏为耐药率50%～75%，临床慎用为耐药率40%～＞50%，引起警惕为耐药率30%～＞40%，耐药率＜30%者用“-”表示[3]。

2 结果

2.1 送检标本病原菌检出情况

送检标本12 306份，病原菌检出2000份，病原菌阳性检出率为16.3%，其中检出病原菌前三位的送检标本分别为血液标本412份（26.9%）、分泌物标本280份（17.5%）、痰液标本 304 份（17.0%）（表 1）。

表1 送检标本病原菌检出情况[n（%）]

2.2 送检标本多重耐药情况的病室分布分析

检出多重耐药菌分布的科室分别为呼吸内科136株（33.7%）、心胸外科 120株（29.8%）、骨外科 30株（7.4%）、肿瘤科 43 株（10.7%）、骨外科 40 株（9.9%）、烧伤科 23株（5.7%）、消化内科 11株（2.8%），共 403株。

2.3 病原菌多重耐药率分析

本研究病原菌耐药预警情况分析显示，耐药最严重为革兰阴性菌的鲍曼不动杆菌、其次为阴沟肠杆菌、大肠埃希菌，而革兰阳性菌种耐药最多者为表皮葡萄球菌及金黄色葡萄球菌，具体见表2。

表2 病原菌多重耐药率分析（%）

3 讨论

细菌的耐药性为抗菌环境选择性压力及抗菌药物选择性压力导致病原菌改变，且具有交叉感染的特点[4-5]，因此，需有效控制耐药病原菌的产生，加强管理抗菌药物的临床应用，严格控制明确感染源[6-7]。同时医务人员特别是危急重症科医务人员切断感染途径，加强手卫生规范[8-9]。对于2014～2017年我院微生物检验中的多重耐药情况分析，病原菌尤其是条件致病菌，各种抗菌药物因与其有接触，在病原菌细胞内的整合子、转座子、染色体、质粒等有多重耐药基因的集聚，在革兰阴性菌、革兰阳性菌、不同种病原菌间存在多次反复交换，耐药基因得到较长时间的存留[10-11]。

本研究探讨2014～2017年我院微生物检验中的多重耐药情况分析，结果显示：送检标本12 306份，病原菌检出2000份，病原菌阳性检出率为16.3%，其中检出病原菌前三位的送检标本分别为血液标本412份（26.9%）、分泌物标本 280份（17.5%）、痰液标本304份（17.0）。检出多重耐药菌分布的科室分别为呼吸内科136株（33.7%）、心胸外科 120株（29.8%）、骨外科30株（7.4%）、肿瘤科 43株（10.7%）、骨外科 40株（9.9%）、烧伤科 23株（5.7%）、消化内科 11株（2.8%），共403株。本研究病原菌耐药预警情况分析显示，耐药最严重为革兰阴性菌的鲍曼不动杆菌、其次为阴沟肠杆菌、大肠埃希菌，而革兰阳性菌种耐药最多者为表皮葡萄球菌及金黄色葡萄球菌，与秦小军等[12]的研究结果大体一致。本研究结果显示，检出病原菌最多的送检标本为血液标本，其次为痰液标本，检出多重耐药菌最多的科室为呼吸内科，多重耐药菌种最多的是革兰阴性菌，提示对临床需合理指导用药，提高病原学诊断的准确性，正确评估多重耐药菌的预警信息[13-14]。从细菌的耐药预警信息分析，明确目标细菌，按照预警信息选择合适的抗菌药物治疗，降低病原菌的多重耐药性[15]。

综上所述，控制及预防医院感染、抗菌药物的合理应用是提高医疗质量、降低病原菌耐药性的有效措施。

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[Abstract]Objective To analyze the multi-drug resistance of the pathogenic bacteria during the microbiological test in our hospital in 2014-2017.Methods A total of 12 306 specimen delivered from 2014 to 2017 in our hospital were selected.The Bio Mérieux VITE2-Compact drug sensitivity analyzer and the microbiological identification instrument were used to take the drug sensitivity test and identification.The multi-drug resistance of the microbiological strains taken in 2014-2017 were evaluated.Results For 12 306 specimen,there were 2000 samples of pathogenic bacteria;the positive detection rate of pathogenic bacteria was 16.3%of which the top three samples included 412 blood specimen (26.9%),280 secretion specimen (17.5%)and 304 sputum specimen (17.0%).There were 403 samples of multi-drug resistant pathogenic bacteria included 136 strains(33.7%)in the respiratory medicine department,120 strains(29.8%)in the cardio-thoracic surgery department,30 strains(7.4%)in the orthopedic surgery department,43 stains(10.7%)in the oncology department,40 strains(9.9%)in the orthopedic surgery department and 23 strains(5.7%)in the burns department and 11 strains(2.8%)in the gastroenterology department.According to the drug resistance analysis of the pathogenic bacteria,the Acinetobacter baumanmii of gram-negative bacteria had the highest drug resistance,followed by Enterobacter cloacae and Escherichia coli.The gram-positive bacteria of Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus had the highest drug resistance.Conclusion During the microbiological test in 2014-2017,the gram-negative bacteria have the highest multi-drug resistance.The control and prevention of the nosocomial infection and the reasonable application of the anti-bacterial agents are beneficial to improve the medical treatment quality and reduce the drug resistance of the pathogenic bacteria.