彭丽萍

江西省萍乡市人民医院血液内科，江西萍乡 337000

[摘要]目的观察伴有DNMT3A基因突变与不伴有DNMT3A基因突变的MDS患者应用地西他滨治疗的效果。方法将2013年1月～2017年6月于我院接受治疗的20例伴有DNMT3A基因突变的MDS患者作为研究组，抽取同期接受治疗但不存在DNMT3A基因突变的20例MDS患者作为对照组，均接受地西他滨治疗，观察两组患者接受地西他滨治疗后的病情改善情况。结果研究组的临床总有效率（65%）显著高于对照组（35%），差异有统计学意义（P＜0.05）。研究组患者治疗前的DNMT3A基因表达显著高于对照组（P＜0.05），经过治疗后研究组的DNMT3A基因表达显著下降（P＜0.05）。两组患者的药物不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论地西他滨用于伴有DNMT3A基因突变的MDS患者治疗，可以取得较好的治疗效果，针对伴有DNMT3A基因突变的MDS患者可优先选择地西他滨进行治疗。

骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）是一种发病于造血干细胞，可进一步转化为急性白血病的恶性血液系统疾病，临床检查患者主要以骨髓造血功能失效或造血干细胞异常增生为主，患者骨髓细胞增生、红细胞下降、幼稚细胞与成熟细胞形态表现异常[1-2]。随着临床对肿瘤基因表达研究的逐渐深入，发现DNA甲基化异常参与MDS的发病与进程，DNMT3A是其甲基化进程中关键的基因表达标志物之一，在MDS的发病、病情进展与预后效果评估中均有着重要作用[3-4]。地西他滨是FDA于2006年批准用于治疗MDS的去甲基化药物，自批准上市以来，在治疗MDS过程中的作用疗效已获得临床医生的认可[5]。本研究选取我院收治的伴有DNMT3A基因突变的MDS患者作为研究对象，旨在观察对伴有DNMT3A基因突变的MDS患者应用地西他滨治疗的效果，现报道如下。

选取2013年1月～2017年6月在我院接受治疗的20例伴有DNMT3A基因突变的MDS患者作为研究对象，临床检查行骨髓细胞学及病理组织检查，同时联合染色体核型分析与流式细胞学检查，临床诊断均符合MDS相关确诊标准，且均伴有DNMT3A基因突变，其中男9例，女11例；年龄18～62岁，平均（37.54±7.73）岁。抽取同期接受治疗但不存在DNMT3A基因突变的20例MDS患者作为对照组，男11例，女9 例；年龄 20～60 岁，平均（37.47±7.68）岁。 排除标准：合并患有肝、肾、心脏等重要器官组织严重疾病患者；有肿瘤病史、急性非淋巴细胞白血病（AML）或接受过地西他滨、阿扎胞苷治疗者；合并精神疾病或神经系统等存在沟通障碍疾病者。本次研究经医院医学伦理委员会批准，入选患者均知情同意此次研究，两组患者的性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

注明PCR具体方法，补充PCR反应体系、条件，补充实验涉及的主要仪器及试剂的生产商、型号等。

1.2.1 PCR扩增 患者禁食12 h后，于次日早晨静卧1 h平静后，采静脉血（抽取5 ml肘静脉血），置于未加抗凝剂的洁净玻璃试管内，提取血液标本基因组DNA后，置于-20℃冰箱中冻存。使用PCR扩增仪进行梯度PCR扩增，引物设计由Mass ARRAY Assay Design 4.0 Software软件进行，反应体系如表1。反应条件：首先在50℃条件下反应1 min，将温度升高至95℃之后将DNA链变性30 s，然后将反应温度设置为56～60℃持续50 s，第三步将DNA链式聚合酶在72℃的反应温度条件下反应30 s合成互补链，总共进行了35个循环。

1.2.2 治疗方法 给予患者地西他滨（正大天晴药业集团股份有限公司，国药准字H20143382，产品规格：50 mg）进行治疗，每天1次，每次给予20 mg/m2地西他滨静脉滴注1 h，连续给药治疗5 d，此为1个治疗周期，每隔4周重复用药进行治疗，连续接受4个周期治疗。此外，经患者同意留取治疗前后患者骨髓液标本，利用PCR法对DNMT3A基因表达以及MDS甲基化程度进行分析检测，治疗期间如出现体温＞39℃，行病原学检测并给予抗生素进行治疗；血红蛋白＜60 g/L，给予输注红细胞悬液；血小板＜20×109/L或有出血表现时输注血小板。

观察两组患者接受地西他滨治疗后病情改善情况，对比分析地西他滨在治疗伴有DNMT3A基因突变MDS患者的疗效。疗效依据MDS国际工作组（简称IWG）推行的2006版评估标准，将各组患者临床疗效分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、稳定（SD）、疾病进展（PD）4 项，总有效率（ORR）=（CR＋PR＋SD）例数/总例数×100%[6]。

采用SPSS 18.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料以率表示，采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

研究组伴有DNMT3A基因突变的MDS患者经地西他滨治疗后，13例患者的临床症状以及血液学得到显著改善或稳定，有7例患者血细胞数量显著降低，病情进一步加重，治疗失败，其中4例患者血细胞数量显著减少，输血次数、输血量明显增加，3例患者短期病情进展为AML，预后极差，其中有2例患者分别死于颅内出血、重症肺炎，其临床总有效率为65%；对照组经地西他滨治疗后7例患者的临床症状与血液学均得到显著改善或稳定，有13例患者血细胞数量显著降低，病情进一步加重，治疗失败，其中8例患者血细胞数量显著减少，输血次数、输血量明显增加，5例患者短期病情进展为AML，预后极差，其中有2例患者分别死于颅内出血、重症肺炎，其临床总有效率为35%。研究组的临床总有效率（65%）显著高于对照组（35%），差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

研究组患者治疗前的DNMT3A基因表达显著高于对照组（P＜0.05），经过治疗后研究组的DNMT3A基因表达显著下降（P＜0.05），对照组治疗前后的DNMT3A基因表达比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表3）。

两组患者治疗期间骨髓抑制持续时间及感染、肝肾损伤、胃肠道反应、口腔黏膜炎等的发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表4）。

在MDS病情进展期间患者极易因出血、感染等情况死亡，晚期可恶化发展为白血病，高危MDS患者有极高的风险恶化发展成AML，一旦恶化发展为AML，常规化疗疗效不佳，且存在副作用明显，极易发生严重不良并发症，患者有较高的死亡率[7]。临床关于MDS的发病原因尚不明确，有研究报道显示，DNA甲基化异常导致抑癌基因沉默失活与MDS发病有着密切关系[8]，而且，目前对于MDS发病相关突变基因的研究逐渐成为国内外临床医生关注的热点之一[9]。

DNMT3A基因突变是近年来在MDS患者中发现的与表观遗传调节有关的突变，该基因的突变影响DNA甲基化水平，因此该基因突变可能在MDS患者发病过程中起着非常重要的作用[10-13]。地西他滨是与5-氮杂胞嘧啶相似的2-脱氧胞苷类似物，是一种甲基化抑制剂，可逆转DNA的甲基化过程，从而使许多失活的基因重新表达[13]，自批准用于治疗MDS、AML等恶性血液病后，取得了一定临床疗效，自2009年8月于国内上市后，逐步被应用于血液肿瘤的治疗，且在治疗MDS时可获得40%～60%的临床疗效[14-15]，但这部分MDS患者是否存DNMT3A基因突变，目前这方面的临床观察较少。本研究结果显示，研究组的临床总有效率（65%）显著高于对照组（35%）（P＜0.05），研究组患者治疗前的DNMT3A基因表达显著高于对照组（P＜0.05），研究组治疗后的DNMT3A基因表达显著下降（P＜0.05），两组患者的药物不良反应发生率无明显差异（P＞0.05），两组患者的药物不良反应发生率比较无明显差异（P＞0.05），提示地西他滨用于伴有DNMT3A基因突变的MDS患者疗效比不伴有DNMT3A基因突变的MDS患者效果更佳。

综上所述，地西他滨用于伴有DNMT3A基因突变的MDS患者治疗，可以取得较好的治疗效果，针对伴有DNMT3A基因突变的MDS患者可优先选择地西他滨进行治疗。

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Clinical study of Decitabine in the treatment of myelodysplastic syndrome accompanied with DNMT3A gene mutation

PENG Li-ping
Department of Hematopathology,People′s Hospital of Pingxiang City in Jiangxi Province,Pingxiang 337000,China

[Abstract]ObjectiveTo observe the effect of Decitabine in the treatment of myelodysplastic syndrome(MDS)patients with or without DNMT3A gene mutation.MethodsFrom January 2013 to June 2017,20 MDS patients with DNMT3A gene mutation

receivedtreatment in our hospital were selected as the research group.Meanwhile,20 MDS patients without DNMT3A gene mutation was selected as the control group.All patients were treated with Decitabine,and the improvement of the two groups of patients after receiving capecitabine treatment was observed.ResultsThe total clinical effectiveness rate was 65%in the research group,which was significantly higher than that in the control group(35%),with significant difference(P＜0.05).Before treatment,DNMT3A gene expression in the research group was greatly higher than that in the control group(P＜0.05),and the expression of DNMT3A after treatment was markedly decreased(P＜0.05).There was no significant difference in the incidence rate of adverse drug reactions between the two groups(P＞0.05).ConclusionDecitabine in the treatment of MDS with DNMT3A gene mutation can obtain a great effect.For MDS patients with DNMT3A gene mutation,Decitabine is a preferred choice for the treatment.

（收稿日期：2017-09-05 本文编辑：祁海文）