吴 坚 温建东 肖林林 薛小燕 段德正

江西省赣州市人民医院药剂科，江西赣州 341000

[摘要]目的探讨阿格列汀联合格列美脲对2型糖尿病大鼠的降糖疗效及对胰岛β细胞功能的影响。方法将50只采用高糖高脂饮食喂养和小剂量注射链脲佐菌素建立的雄性糖尿病大鼠模型随机分为5组，即：2型糖尿病模型对照组（A组），阿格列汀单药组（B组），格列美脲单药组（C组），阿格列汀联合格列美脲组（D组）及阿格列汀联合格列苯脲组对照组（E组），每组各10只大鼠。另取10只正常大鼠作为正常对照组（F组），口服给药，每日固定时间给药1次。观察连续给药28 d后各组大鼠的空腹血糖（FBG）、血浆胰岛素水平（FIns）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）的变化，计算HOMA-βF指数及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果经过28 d的治疗后，A、B、C、D及E组大鼠的 FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR 均高于 F 组，HOMA-βF 低于 F 组，差异均有统计学意义（P<0.01）。B、C、D和E组大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均显著低于A组，HOMA-βF高于A组，差异均有统计学意义（P<0.01）。 C 组大鼠的 FBG、FIns低于 B 组，TG、TC 高于 B 组，差异有统计学意义（P<0.05），D、E 组大鼠的 FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均显著低于B组，HOMA-βF高于B组，差异均有统计学意义（P<0.01）。D、E组大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均低于C组，HOMA-βF高于C组，差异均有统计学意义（P<0.05）。D组和E组大鼠的各指标比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论分别给予阿格列汀单药、格列美脲单药或是联合用药均能显著降低2型糖尿病大鼠的血糖，改善TG、TC其胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗，但联合用药效果优于单药治疗。

随着中国步入老龄化社会，最新流行病学调查显示：2010年中国成年2型糖尿病发病率已为11.6%[1]，患者人数已经位居世界第一，且有快速增加的趋势[2]，糖尿病的防治工作任重道远。糖尿病临床主要表现为：β细胞胰岛素分泌不足及胰岛素抵抗，并常伴有动脉粥样硬化、高血压以及脂代谢异常[3]。以格列美脲为代表的磺脲类口服降糖药是目前临床上广泛用于治疗糖尿病的主要药物类别之一[4]。但随着患者病程的延长，单一用药无法有效控制患者的血糖，指南及临床多采用联合用药，进而进一步控制患者血糖[5]。使用新型降糖药DPP-4抑制剂治疗2型糖尿病是目前较新的方法[6]。关于格列美脲联合西格列汀[5]、沙格列汀[7]及利格列汀[8]用于临床的研究已有报道，但阿格列汀作为DPP-4抑制剂的最新的代表药物[9]，其联合用药的动物研究尚未见，故本研究以2型糖尿病大鼠为研究对象，观察阿格列汀联合格列美脲的降糖疗效及胰岛β细胞功能的影响，现具体报道如下。

SPF 级 8 周龄的雄性大鼠，体重（200±20）g，80只，购于江西中医药大学实验动物中心，合格证号：JZDW 2016-0547。

格列美脲[亚莫利，赛诺菲（北京）制药有限公司，2 mg/片，批号：7BJB038]，阿格列汀片（尼欣那，武田药品工业株式会社，25 mg/片，批号：AM324）均购于我院药剂科。链脲佐菌素（STZ，美国Sigma公司，批号：F-0711），鼠胰岛素酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒购于上海宝曼生物科技有限公司，实验动物高脂饲料购买于江西中医药大学。

BeckmanAU5800全自动生化分析仪（贝克曼公司），高速冷冻离心机（德国SIGMA 3-18K），美国强生血糖仪。

选取空腹血糖正常大鼠70只，予以高糖高脂联合链脲佐菌素（45 mg/kg，ip）[10]，72 h 后空腹测尾静脉血糖，以血糖≥11.1 mmol/L为造模成功。选取造模成功的2型糖尿病大鼠50只，随机分为2型糖尿病模型组（A组），阿格列汀单药组（B组，每天给药5mg/kg），格列美脲单药组（C组，每天给药0.5 mg/kg）[11]，阿格列汀联合格列美脲用药组（D组，每天分别给药2.5 mg/kg及0.25 mg/kg），阿格列汀联合格列苯脲用药组（E组，每天分别给药2.5 mg/kg及0.25 mg/kg），每组各 10只，另取 10只空腹血糖正常的大鼠作为正常对照组（F组），给予生理盐水。于每天固定时间给予相应药物，连续给药28 d。

观察连续给药28 d后大鼠的空腹血糖（FBG）、血浆胰岛素水平（FIns）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）的变化，计算HOMA-βF指数及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。实验结束后，大鼠禁食8 h以上，采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖（FBG），采用10%水合氯醛3 ml/kg，ip麻醉，取腹主动脉血，离心，取血清采用Beckman X20全自动生化分析仪检测FIns、TG、TC。 HOMA-βF=20×FIns/（FBG-3.5）[12]。 HOMA-IR=FIns×FBG/22.5[13]。

采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

经过28 d的治疗后，A、B、C、D及E组大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR 均高于 F 组，HOMA-βF 低于F 组，差异均有统计学意义（P<0.01）。B、C、D 和 E 组大鼠的 FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR 均显著低于 A 组，HOMA-βF高于A组，差异均有统计学意义（P<0.01）。C组大鼠的FBG、FIns低于B组，TG、TC高于B组，差异有统计学意义（P<0.05），D、E 组大鼠的 FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR 均显著低于 B 组，HOMA-βF 高于B组，差异均有统计学意义（P<0.01）。D、E组大鼠的 FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR 均低于 C 组，HOMA-βF高于C组，差异均有统计学意义（P<0.05）。D组和E 组大鼠的 FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR、HOMA-βF比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

近年来，随着对2型糖尿病发病机制的深入研究，针对不同的致病环节，新的治疗2型糖尿病的药物不断涌现并逐渐广泛应用于临床，其疗效得到了证实。阿格列汀为最新上市的DPP-4抑制剂的代表药物，是通过选择性抑制二肽基肽酶-4，减少体内GIP和GLP-1的失活，从而控制血糖[14]。在有效控制血糖的同时，阿格列汀亦有改善患者体重和LDL-C、HDL-C、TG的作用，特别是在TC的改善方面效果非常显著[15]。格列美脲（亚莫利）作为第三代磺脲类口服降糖药，其生理性——血糖依赖性促胰岛素分泌，低血糖发生率低。确切的胰外增敏作用，有效改善胰岛素抵抗，节约内源性胰岛素分泌[16]，对患者体重影响趋中，另其给药方式为1次/d，患者依从性好，进而被临床上推广应用[17]。

虽然新药层出不穷，目前尚没有一种有效的药物或手段能完全治愈2型糖尿病，临床中往往多采用“阶梯式疗法”[18]，采用药物联合应用方式来帮助患者控制血糖。本研究以2型糖尿病大鼠为研究模型，考察阿格列汀联合格列美脲的降糖疗效及对胰岛β细胞功能的影响，结果表明：阿格列汀或格列美脲无论是单药还是联合用药都能显著降低2型糖尿病大鼠的血糖，改善TG、TC、胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗，格列美脲单药治疗降糖效果优于阿格列汀单药治疗，但TG、TC改善相对弱于阿格列汀组，二者联合用药效果优于单药治疗。本研究以动物模型为研究对象，为阿格列汀联合格列美脲用于临床治疗2型糖尿病患者提供了参考依据。

综上所述，阿格列汀联合格列美脲对2型糖尿病大鼠的降糖疗效良好，值得临床推广应用。

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Effect of Alogliptin combined with Glimepiride in diabetes rats and its influence on islet β cells function

WU Jian WEN Jian-dong XIAO Lin-lin XUE Xiao-yan DUAN De-zheng
Department of Pharmacy,Ganzhou People′s Hospital,Jiangxi Province,Ganzhou 341000,China

[Abstract]ObjectiveTo investigate the hypoglycemic effects and the function of islet β cells of Alogliptin combined with Glimepiride in type 2 diabetes mellitus rats.Methodsfifty rats of type 2 diabetes mellitus which were induced through high-sucrose and high-fat diet combined with low-dose abdominal injection of Streptozotocin were randomly divided into five groups:model group(group A),Alogliptin group(group B),Glimepiride group(group C),Alogliptin combined with Glimepiride group (group D),Alogliptin combined with Glibenclamide (group E),10 rats in each group.Another 10 normal rats were selected as normal group(group F).The fasting blood glucose(FBG),level of plasma insulin(FIns),total cholesterol(TC)and triglyceride(TG)levels were detected in rats after treated for 28 days,the HOMA-βF index and insulin resistance index(HOMA-IR)were calculated.ResultsAfter 28 d treatment,the FBG,TG,TC,Fins and HOMAIR of the rats in group A,B,C,D and E were all higher than those in group F,the HOMA-βF was lower than group F,and the differences were statistically significant(P<0.01).The FBG,TG,TC,FIns,and HOMA-IR of rats in group B,C,D and E were significantly lower than those in group A,and HOMA-βF was higher than group A,and the differences were statistically significant(P<0.01).The FBG and FIns of rats in group C were lower than those in group B,TG and TC were higher than those in group B,the differences were statistically significant(P<0.05).The FBG,TG,TC,Fins and HOMA-IR of rats in group D and E were significantly lower than those of group B,HOMA-βF was higher than group B,and the differences were statistically significant(P<0.01).The FBG,TG,TC,FIns and HOMA-IR of the rats in group D and E were lower than those in group C,HOMA-βF was higher than that in group C,and the differences were statistically significant(P<0.05).There was no statistically significant difference between D and E groups(P>0.05).ConclusionAlogliptin,Glimepiride single or combined can significantly reduce the blood glucose of type 2 diabetic rats,improve TG,TC,the function of islet β cell and insulin resistance,but combined effect is better than single drug therapy.

[Keywords]Alogliptin;Glimepiride;Type2diabetesmellitus rats;Islet β cell function

（收稿日期：2017-09-04 本文编辑：孟庆卿）