吴 嘉

中国人民解放军第一八四医院病理科，江西鹰潭 335000

[摘要]目的 探讨Fas相关死亡结构域蛋白在乳腺癌中表达的临床病理特点。方法 选择2013年2月～2017年2月我院收治的行乳腺肿瘤手术治疗患者的人体石蜡包埋组织标本148例，其中乳腺良性病变26例（A组），无淋巴结转移乳腺癌58例（B组），淋巴结转移乳腺癌64例（C组）。所有标本均实施免疫组化检查，分析Fas相关死亡结构域蛋白表达。结果Fas相关死亡结构域蛋白表达于乳腺癌癌细胞胞浆内和乳腺良性病变上皮细胞内。B组中Fas相关死亡结构域蛋白表达较弱，染色范围较小，染色深度均较低；A组、C组中Fas相关死亡结构域蛋白表达较弱，染色深度强。A、B、C三组Fas相关死亡结构域蛋白阳性表达率分别为88.5%（23/26）、46.6%（27/58）、65.6%（42/64），A组高于B组、C组，差异有统计学意义（P＜0.05）。在乳腺癌患者中，淋巴结转移、确诊年龄与Fas相关死亡结构域蛋白表达有关 （P＜0.05），但临床分期、组织学类型与Fas相关死亡结构域蛋白表达无关 （P＞0.05）。结论 Fas相关死亡结构域蛋白与乳腺癌淋巴结转移、确诊年龄有着密切的关系，但与临床分期、组织学类型无关，需引起高度关注。

[关键词]Fas相关死亡结构域蛋白；乳腺癌；淋巴结转移；临床病理

乳腺癌患病率较高，会给患者身心健康和生命安全带来严重影响[1]。当前，临床上多采用手术方法进行治疗，但部分患者最终预后不良[2]。而且，对于大部分初诊时无远处转移的乳腺癌患者来说，影响其预后的关键是淋巴结转移[3]，而导致乳腺癌患者出现淋巴结转移的因素较多，包括细胞黏附异常、上皮间质转化、基质金属蛋白酶异常表达等。近年来，有研究发现，在多种恶性肿瘤发生与发展过程中，Fas相关死亡结构域蛋白发挥着重要的作用，且与乳腺癌转移和预后密切相关[4]。基于此，本研究深入探讨了Fas相关死亡结构域蛋白在乳腺癌中表达的临床病理特点，现报道如下。

选择2013年2月～2017年2月我院收治的行手术治疗的乳腺肿瘤患者的人体石蜡包埋组织标本148例，包括乳腺良性病变26例（A组），无淋巴结转移乳腺癌58例 （B组），有淋巴结转移乳腺癌64例（C 组）。 A 组患者年龄 30～72 岁，平均（48.6±10.2）岁；其中乳腺增生性病变14例，纤维腺瘤12例。B组患者年龄 32～78 岁，平均（49.8±10.5）岁；浸润性导管癌48例，浸润性小叶癌10例。C组患者年龄38～74岁，平均（52.0±9.8）岁；浸润性导管癌52例，浸润性小叶癌12例。

1.2.1 仪器与试剂 Fas相关死亡结构域蛋白抗体购自Abcam公司；Polymer Kit-0015 DAB显色试剂盒购自福建迈新生物技术公司；格兰仕微波炉。

1.2.2 免疫组化检查 常规石蜡切片，以3%过氧化氢进行20 min孵育，PBS冲洗，做微波抗原修复，随后PBS洗3次；滴加封闭血清，做20 min孵育处理，随后滴加Fas相关死亡结构域蛋白抗体，工作浓度为1∶100，4℃条件下， 孵育过夜，PBS 洗 3 次；DAB 溶液显色，以清水冲洗，苏木精复染脱水封片，置于光镜下观察。阴性对照组采用PBS液替代Fas相关死亡结构域蛋白抗体。由两名经验丰富的病理科医师共同阅片。计算总体免疫染色得分，计算方法为阳性细胞阳性百分比计分和阳性细胞染色深度计分的乘积，阴性为0分，阳性为1～4分。其中，阳性细胞阳性百分比评分标准：阳性率为 0～＜5%记 0分；5%～25%记 1分；＞25%～50%记2分，＞50%～75%记3分，＞75%记4分。阳性细胞染色深度评分标准：无染色或边缘变色记0分；阳性细胞呈浅黄色记1分；黄色记2分，棕褐色记3分。总体免疫染色得分≤4分为低表达，6、8、9、12分均为高表达[5]。

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

乳腺癌癌细胞胞浆内和乳腺良性病变上皮细胞内均存在Fas相关死亡结构域蛋白表达。B组中Fas相关死亡结构域蛋白表达较弱，染色范围较小，染色深度较浅；A组、C组中Fas相关死亡结构域蛋白表达较弱，染色深度强，A组、B组、C组Fas相关死亡结构域蛋白阳性表达率分别为88.5%（23/26）、46.6%（27/58）、65.6%（42/64）。 A 组高于 B 组、C 组，差异有统计学意义（χ2=13.09、4.81，P=0.000、0.028）。

在122例乳腺癌患者中，淋巴结转移、确诊年龄与Fas相关死亡结构域蛋白表达有关（P＜0.05），但临床分期、组织学类型与Fas相关死亡结构域蛋白表达无关（P＞0.05）（表1）。

表1 乳腺癌中Fas相关死亡结构域蛋白与病理指标的关系分析[n（%）]

乳腺癌是常见的女性恶性肿瘤。当前，随着医学技术的快速发展，越来越多的乳腺癌被及时发现，而且，早期诊断和早期治疗降低了病死率[6]。但是，乳腺癌转移仍是导致患者死亡的一个重要因素[7-9]。所以，临床上采取积极措施，探索与乳腺癌转移相关的生物标志物，从而采取积极措施控制病情进展，改善患者预后，就显得至关重要。

Fas相关死亡结构域蛋白最早是在1995年由Chinnaiyan等筛选出来的，是能与Fas分子胞内段死亡域相互作用的新蛋白[10-12]。Fas相关死亡结构域蛋白包括C端的死亡结构域和N端的死亡效应域[13-15]。有研究发现，在Fas、DR3等凋亡信号途径中，Fas相关死亡结构域蛋白是必需蛋白，特别是在Fas凋亡信号途径中，Fas相关死亡结构域蛋白以其C端死亡结构域直接结合Fas死亡结构域，互相作用，显露出死亡效应域，随后作用于无活性的Caspase-6酶原，使之活化，引发Caspase级联反应，致使细胞凋亡[16]。而细胞凋亡失控在胃癌、非小细胞肺癌、肝癌等肿瘤的发生与发展中发挥着重要的作用[17]。但是，临床上尚未明确Fas相关死亡结构域蛋白与肿瘤细胞转移发生关系的具体作用机制和临床病理意义[18]。

本研究发现，Fas相关死亡结构域蛋白表达于乳腺癌癌细胞胞浆内和乳腺良性病变上皮细胞内。且A组Fas相关死亡结构域蛋白阳性表达率高于B组、C组（P＜0.05）。由此可知，乳腺癌患者Fas相关死亡结构域蛋白阳性表达与其淋巴结转移有关。本研究还深入分析了乳腺癌中Fas相关死亡结构域蛋白与病理指标相关性。结果显示，在乳腺癌患者中，淋巴结转移、确诊年龄与Fas相关死亡结构域蛋白表达有关（P＜0.05），但临床分期、组织学类型与Fas相关死亡结构域蛋白表达无关（P＞0.05）。进一步证实了乳腺癌患者Fas相关死亡结构域蛋白阳性表达与其淋巴结转移的关系。本研究局限之处在于未明确Fas相关死亡结构域蛋白影响乳腺癌淋巴结转移的作用机制，今后仍需进行深入分析。

综上所述，Fas相关死亡结构域蛋白与乳腺癌淋巴结转移有着密切的关系，需引起高度关注。

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Clinicopathological study of Fas-related death domain protein expression in breast cancer

WU Jia
Department of Pathology,No.148 Hospital of the Chinese People′s Liberation Army,Jiangxi Province,Yingtan 335000,China

[Abstract]Objective To explore the clinicopathological features of Fas-related death domain proteins expression in breast cancer.Methods From February 2013 to February 2017,148 cases of paraffin-embedded tissue specimens from patients undergone tumor surgeries were selected.There were benign breast lesions in 26 cases(group A),breast cancer without lymph node metastasis in 58 cases(group B),and breast cancer with lymph node metastasis in 64 cases(group C).All specimens were performed with immunohistochemical examinations in order to analyze the proteins expression of Fas-related death domain.Results It was detected that Fas-related death domain proteins were expressed in the intracytoplasm of breast cancer cells and epithelial cells of benign breast lesions.In group B,the expression of Fas-related death domain proteins was weak and dyeing range and depth were small compared with those in groups of A and C,which were in slight expression and deep dyeing.The positivity expression rates of Fas-related death domain proteins in groups of A,B,and C were 88.5%(23/26),46.6%(27/58),and 65.6%(42/64)respectively.The positivity expression rate in group A was higher than that in groups of B and C with statistical differences(P＜0.05).For breast cancer patients,lymph node metastasis and age with a definite diagnosis were associated with Fas-related death domain protein expression(P＜0.05).However,the clinical stage and histological type were not related to the expression of Fas-related death domain protein (P＞0.05).Conclusion The expression of Fas-related death domain proteins is closely related to the lymph node metastasis and age with a definite diagnosis of breast cancer,but it has nothing to do with the clinical stage and histological type,to which should be paid high attention.

[Key words]Fas-related death domain protein;Breast cancer;Lymph node metastasis;Clinical pathology

[中图分类号]R365

[文献标识码]A

[文章编号]1674-4721（2017）10（a）-0004-03

（收稿日期：2017-07-21 本文编辑：任 念）