龚 觅1路 颖2

1.深圳市第三人民医院肝病研究所，广东深圳 518040；2.解放军第四零一医院检验科，山东青岛 266071

[摘要]目的探讨肺外结核应用T细胞斑点试验检测的诊断价值。方法选取我院2013年1月～2016年8月收治的200例疑似肺外结核患者作为研究对象，所有患者均接受结核抗体检测、T细胞斑点试验，以临床确诊结果作为对照，计算并比较结核抗体检测、T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度。结果T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度分别为96.45%、93.55%、96.00%，与结核抗体检测的诊断灵敏度（53.85%）、特异度（64.52%）、准确度（55.50%）比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。T细胞斑点试验诊断肺外结核的结果与临床确诊结果之间的一致性为Kappa=0.725，而结核抗体检测与临床确诊结果之间的一致性为Kappa= 0.435。结论采用T细胞斑点试验可对肺外结核完成快速、准确的诊断，在肺外结核诊断中具有显著的诊断价值，可作为肺外结核的重要辅助诊断方法。

[关键词]肺外结核；诊断；T细胞斑点试验

结核病属于临床上最为常见的慢性传染病之一，肺外结核主要是指发生在肺外的结核病变的统称，包括淋巴结核、结核性脑膜炎、结核性腹膜炎等多种类型，其起病较为隐匿，加上发生在肺外部位，临床症状不典型，在临床诊断过程中容易出现漏诊和误诊，对患者的病情控制较为不利[1-2]，因此，临床上应积极寻求对肺外结核可准确、快速诊断的方法。T细胞斑点试验（T-spot.TB试验）是近年来应用于结核病诊断中的一种新型检测手段，本研究对我院的疑似肺外结核患者进行回顾性研究，对其诊断资料进行分析，旨在探讨T细胞斑点试验对肺外结核的诊断价值，现报道如下。

1.1 一般资料

选取我院 2013年 1月～2016年 8月收治的200例临床症状疑似肺外结核患者作为研究对象，其中男性125例，女性75例；年龄8～79岁，平均（41.05± 16.81）岁。经痰涂片结核杆菌培养、X线胸片、实验室检查，最终确诊为肺外结核的患者共有169例，包括58例淋巴结核、41例结核性胸膜炎、39例结核性腹膜炎、31例结核性脑膜炎。所有患者的临床资料（包括诊断资料）均保存完整，未出现缺失。

1.2 方法

所有患者均接受结核抗体检测、T细胞斑点试验，其中，结核抗体检测主要是对血清标本中的38 kDIgG进行测定，采集患者的清晨空腹静脉血液作为标本，以3500 r/min的速度进行离心处理，取血清，采用结核分枝杆菌抗体胶体金检测试剂盒进行检测，检测步骤严格按照试剂盒说明进行操作，如采用葡萄球菌A蛋白胶体金缀合物标记后，结核IgG显示为红色即为阳性；T细胞斑点试验主要是对外周血抗凝全血中的结核特异抗原活化效应T细胞进行测定；采集患者的外周静脉血液5 ml置于肝素抗凝管中，采用密度梯度离心法对血液标本中的单个核细胞进行分离，采用T-spot.TB试剂盒，分别在4个孔中加入阴性对照、阳性对照、抗原A、抗原B，再分别加入单个核细胞进行孵育，16～20 h后进行PBS洗涤，再分别加入抗干扰素抗体进行2 h孵育，PBS洗涤，显色，对斑点数进行计算，如阴性对照孔内斑点数为0～5个且抗原A和抗原B孔内斑点数超出阴性对照≥7个，或阴性对照孔内斑点数＞5个且抗原A和抗原B孔内斑点数至少为阴性对照孔的2倍，即可判定为阳性[3]。

1.3 观察指标

对两种检测方法的诊断结果进行分析，以临床确诊结果作为对照，计算并比较结核抗体检测、T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度，其中，灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性），特异度=真阴性/（真阴性+假阳性），准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数；计算结核抗体检测、T细胞斑点试验与肺外结核临床确诊结果之间的一致性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行分析，计数资料以百分数表示，采用χ2检验，诊断结果之间采用Kappa一致性检验，Kappa＜0.4表示一致性较差，Kappa为0.4～0.7表示一致性中等，Kappa＞0.7表示一致性良好，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 结核抗体检测、T细胞斑点试验对肺外结核诊断结果的比较

T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度分别为96.45%、93.55%、96.00%，与结核抗体检测的诊断灵敏度（53.85%）、特异度（64.52%）、准确度（55.50%）比较，差异有统计学意义（P＜0.05）（表 1、表2）。

2.2 结核抗体检测、T细胞斑点试验与肺外结核临床确诊结果之间的一致性分析

T细胞斑点试验诊断肺外结核的结果与临床确诊结果之间的一致性Kappa=0.725，而结核抗体检测与临床确诊结果之间的一致性Kappa=0.435。

结核病是临床上十分常见的一种慢性传染病，主要由结核分枝杆菌感染所致，病变多位于肺内，同时，也可累及全身各个系统和器官，临床上根据结核病患者的病灶分布位置，将结核病分为肺结核、肺外结核[4-6]。肺外结核主要包括淋巴结核、结核性胸膜炎、结核性腹膜炎、结核性脑膜炎等，其起病相对较为隐匿，发病时由于分布位置的区别，存在不同的临床症状，且症状不具有典型性，导致肺外结核容易被误诊为其他病变，耽误患者治疗结核病的最佳时机，治疗效果欠佳，对患者病情控制十分不利[7-8]，因此，临床上应对肺外结核的早期诊断方法进行积极研究和探讨。

目前，临床上诊断肺外结核的方法主要为痰涂片结核杆菌培养，但由于痰涂片结核杆菌培养的灵敏度较低，对结核分枝杆菌的检出率较低，无法对活菌、死菌以及非结核分枝杆菌进行区分，往往需要结合临床病史、影像学检查、实验室检查进行综合诊断，部分患者由于缺乏警惕性，其病史收集并不全面，诊断较为困难，同时，痰涂片结核杆菌培养所需时间较长，不利于及时对患者进行诊断[9-10]。结核抗体检测是肺外结核的常用血清学检测手段，主要是利用38 kD抗原对结核IgG抗体进行检测，但在发病早期对肺外结核进行诊断，容易出现漏诊，导致部分肺外结核患者未能得到及时的治疗，以至于病情恶化，引发严重后果[11]。

T细胞斑点试验是一种新型的结核分枝杆菌感染检测方法，可对外周血中单个核细胞受到抗原刺激后释放的细胞因子进行有效检测，从而对患者机体内是否存在结核分枝杆菌感染进行判断，是当前临床诊断结核分枝杆菌感染最灵敏的一种方法[12-13]。T细胞斑点试验可在结核分枝杆菌感染早期阶段对结核特异抗原活化效应T细胞进行测定，灵敏度较高，可对肺外结核病变情况予以灵敏反映，减少漏诊，且检测耗时相对较短，通常在24 h内可得到检测结果，有利于对患者病情做出快速诊断，使患者尽早得到较为明确的诊断结果，并及时实施有效治疗，避免病情恶化[14-15]。本研究结果显示，T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度分别为96.45%、93.55%、96.00%，均高于结核抗体检测结果（P＜0.05），提示T细胞斑点试验对肺外结核具有较高的灵敏度、特异度，在诊断肺外结核时作为参考，可有效减少因结核抗体检测而出现的漏诊、误诊，为肺外结核的临床治疗提供科学依据；T细胞斑点试验诊断结果与肺外结核临床确诊结果之间的一致性Kappa=0.725，而结核抗体检测与临床确诊结果之间的一致性Kappa= 0.435，提示T细胞斑点试验对肺外结核的诊断结果与临床确诊结果较为一致，且其一致性优于结核抗体检测，在一定程度上反映了T细胞斑点试验对肺外结核的诊断准确度，提示在有条件进行T细胞斑点试验时，可将T细胞斑点试验诊断肺外结核的结果作为参考，以更加准确地判断肺外结核。

综上所述，采用T细胞斑点试验可对肺外结核完成快速、准确的诊断，在肺外结核诊断中具有显著的诊断价值，可作为肺外结核的重要辅助诊断方法。

[1]田洹，胡文斌，毛艳军，等.结核感染T细胞斑点试验对肺外结核诊断的临床意义[J].国际检验医学杂志，2016，37（1）：114-115.

[2]Cho OH，Park KH，Kim SM，et al.Diagnostic performance of T-SPOT.TB for extrapulmonary tuberculosis according to the site of infection[J].J Infection，2011，63（5）：362-369.

[3]刘晓莺，樊海燕，叶绥艳，等.T细胞斑点试验在肺外结核诊断中价值[J].现代仪器与医疗，2016，22（4）：53-55.

[4]Lee YM，Park KH，Kim SM，et al.Risk factors for false-negative results of T-SPOT.TB and tuberculin skin test in extrapulmonary tuberculosis[J].Infection，2013，41（6）：1089-1095.

[5]钟一鸣，谷秀梅，刘文恩，等.T细胞斑点试验辅助诊断不同部位肺外结核感染的应用[J].中华医院感染学杂志，2014，24（17）：4415-4417.

[6]王成勇，潘士虎，刘敏，等.结核感染T细胞斑点试验与荧光定量 PCR在肺外结核诊断中的应用[J].国际检验医学杂志，2015，36（14）：1998-1999.

[7]孙雯雯，肖和平，吴福蓉，等.结核感染T细胞斑点试验在临床诊断为肺外结核患者中的价值评价[J].中国防痨杂志，2015，37（7）：784-789.

[8]舒晋峰，许小敏.结核感染T细胞斑点试验对肺外结核诊断价值探讨[J].中国微生态学杂志，2013，25（12）：1444-1446，1450.

[9]王立红，付秀华，张桂芝，等.结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值[J].中国防痨杂志，2013，35（12）：992-996.

[10]应晓，王振华，吴惠芬，等.T细胞斑点试验在肺结核诊断中的应用价值[J].检验医学，2016，31（5）：433-434.

[11]陶学芳，王建华，李永兴，等.结核感染T细胞酶联免疫斑点试验在肺结核及肺外结核诊断中的价值[J].浙江预防医学，2012，24（11）：4-7.

[12]于丹，刘宁.结核感染T细胞斑点试验在疑似结核病患者诊断中的价值[J].热带医学杂志，2016，16（1）：45-47，54.

[13]崔鲂，杨玲，孟江萍，等.结核感染T细胞斑点试验及结核抗体在肺外结核病诊断中的临床意义[J].西部医学，2014，26（1）：103-104，107.

[14]刘红，黄永杰，王静，等.结核感染T细胞斑点试验在疑似结核病患者诊断中的价值研究[J].中华结核和呼吸杂志，2014，37（3）：192-196.

[15]Soysal A，Toprak D，Koc M，et al.Diagnosing latent tuberculosis infection in haemodialysis patients：T-cell based assay（T-SPOT.TB）or tuberculin skin test?[J].Nephrol Dial Transplant，2012，27（4）：1645-1650.

Application value of T cell spot test in the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis

GONG Mi1LU Ying2
1.Hepatology Institute,the Third People′s Hospital of Shenzhen City,Shenzhen 518040,China;2.Department of Clinical Laboratory,the 401stHospital of PLA,Shandong Province,Qingdao 266071,China

[Abstract]ObjectiveTo discuss the diagnostic value of T cell spot test in the diagnosis of pulmonary tuberculosis.Methods200 cases of suspected pulmonary tuberculosis from January 2013 to August 2016 in our hospital were selected as the object of study review,all patients were detected by T cell spot test and tuberculosis antibody detection, clinical diagnosis result was set as reference,the diagnostic sensitivity,specificity and accuracy of extrapulmonary tuberculosis were calculated and compared between tuberculosis antibody and T cell spot test.ResultsThe diagnostic sensitivity,specificity and accuracy of T cells spot test in extrapulmonary tuberculosis were 96.45%,93.55%and 96.00%,and compared with the sensitivity(53.85%),specificity(64.52%)and accuracy(55.50%)in the diagnosis of tuberculosis antibody detection,the difference was statistically significant(P＜0.05).The consistency between the results of the T cell spot test for the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis and the clinical outcome was Kappa=0.725,and the agreement between the results of TB antibody detection and clinical diagnosis was Kappa=0.435.ConclusionThe T cell spot test can be used for rapid and accurate diagnosis of pulmonary tuberculosis,it has significant diagnostic value in the diagnosis of pulmonary tuberculosis,which can be used as an important auxiliary diagnosis method for the diagnosis of pulmonary tuberculosis.

[Key words]Pulmonary tuberculosis;Diagnosis;T cell spot test

[中图分类号]R446.1

[文献标识码]A

[文章编号]1674-4721（2017）02（c）-0123-03

（收稿日期：2017-01-18 本文编辑：祁海文）