聂建芳

南昌市第三医院口腔科，江西南昌 330009

[摘要]目的 探讨免疫制剂盐酸左旋咪唑配合外用贝复济治疗复发性口腔溃疡的临床效果。方法 选取2014年1月～2015年12月我院接诊的复发性口腔溃疡患者130例，按就诊前后随机分成观察组和对照组，各65例，观察组采用盐酸左旋咪唑片配合贝复济无菌喷雾剂外用，对照组单纯采用盐酸左旋咪唑。通过治疗前后血清T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+细胞；血清辅助性T淋巴细胞（helper T cell，Th），Th1（IFN-γ、TNF-α、IL-2）和Th2 （IL-4、IL-6、IL-10）类细胞因子的表达水平及临床疗效的比较，分析盐酸左旋咪唑片配合贝复济外用的临床效果。结果 观察组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+治疗前后检测结果比较，差异有统计学意义 （P＜0.01），对照组治疗前后比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。观察组辅助T淋巴细胞、Th1（IFN-γ、TNF-α、IL-2）、Th2（IL-4、IL-6、IL-10）、IFN-γ/IL-4治疗前后检测结果比较，差异均有统计学意义 （P＜0.01），对照组治疗前后IL-6比较，差异有统计学意义 （P＜0.01），其他指标比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组治疗后INF-α、IL-6、比较，差异无统计学意义（P＜0.05），其他差异均有统计学意义（P＜0.05）。观察组临床总有效率为92.08%，复发率为9.23%，对照组有效率为73.85%，复发率为36.92%，两组总疗效比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 盐酸左旋咪唑片配合贝复济外用能有效改善复发性口腔溃疡患者T淋巴细胞亚群及血清辅助性T淋巴细胞的表达，提高复发性口腔溃疡的治疗效果，降低复发率。

[关键词]复发性口腔溃疡；左旋咪唑；贝复济；T淋巴细胞亚群；辅助T淋巴细胞；临床疗效

复发性口腔溃疡又称复发性阿弗他性口炎，是口腔黏膜中最常见的疾病。口腔溃疡的典型特征为浅表性、疼痛性、复发性[1]，常好发于唇、颊、舌侧黏膜。患病因素有遗传、过敏、药物、激素、焦虑、免疫异常等，其中20%源于患者T细胞介导的免疫反应引起[2]。本病一年四季均能发生，10 d左右可以自愈，据统计患病率达20%，在特定人群中可高达60%，儿童发病率约15%，成年人发病率约85%[3]。

复发性口腔溃疡发病机制尚未明确，由于反复发作，溃疡疼痛引起患者饮食困难，对患者的日常生活、营养状况、工作、学习造成不良的影响，同时外界反复刺激所致的口腔溃疡存在癌变的风险。虽然临床上治疗该病的方法很多，但目前还无比较理想的方法[4]。本研究根据该病发病原理，采用免疫制剂左旋咪唑配合贝复济（rb-bFGF）外用，观察其临床疗效，探索一种复发性口腔溃疡比较好的治疗方法。

1.1一般资料

选取2014年1月～2015年12月来我院就诊的复发性口腔溃疡患者130例，按就诊前后随机分成观察组与对照组，各65例，观察组中男23例，女42例；年龄（24.71±8.14）岁；病程（5.51±3.32）年。对照组中男25例，女40例；年龄（25.12±7.54）岁，病程（6.07± 3.16）年，两组性别、年龄、病程等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。具有可比性。

1.2入选标准

①口腔表面出现渗出以及灼痛的感觉，大小不等的圆形、椭圆形溃疡；②间歇性地发作；③单发或多发性，经常发生在唇、脸颊以及舌头等处，数目 1～5个，直径≥5 mm；④局部疼痛，溃疡充血，边缘整齐，基部不硬，中心稍凹，其上覆以灰黄色或浅黄白色纤维素性假膜；⑤多数患者无全身的表现，但是溃疡直径一般在10～30 mm深及黏膜下层甚至肌层，治好后会留下瘢痕；⑥所有患者均为口腔溃疡反复发作＞1年，发病间隔时间＜1个月，其中轻型发作≤72 h，重型抽血时口内至少存在1个月以上溃疡；⑦签署知情同意书；⑧经院医学伦理委员会批准。

1.3排除标准

①白血病、贫血、消化性溃疡、克隆病、急性感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤患等；②妊娠期妇女；③24 h内使用镇痛药，1个月内使用抗生素，3个月内使用免疫制剂；④3个月内吸烟者、嗜酒者。

1.4方法

观察组采用盐酸左旋咪唑片（武汉新赢和医药化工有限公司，片剂25 mg/片），3次/d，50 mg/次，连服2 d后停5 d，连续2周。rb-bFGF无菌喷雾剂（含bFGF 36 000 AU），4次/d，1～2喷/次。对照组只采用盐酸左旋咪唑片，用法同上。连续2周进行疗效评价。

1.5观察指标与评价方法

比较血清T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+细胞；血清辅助性T淋巴细胞（helper T cell Th）Th1 （IFN-γ、TNF-α、IL-2）和Th2（IL-4、IL-6、IL-10）类细胞因子的表达水平。 清晨9点以前空腹抽外周静脉血5 ml，1500 r/min离心15 min后提取上清液，迅速置于-80℃低温冰箱保存。采用流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+细胞和IFN-γ,TNF-α,IL-2、IL-4、IL-6、IL-10。试剂盒购自Beckman Coulter,Inc.中国有限公司，操作步骤按试剂盒说明书进行。根据患者溃疡面的恢复情况，具体如下。①显效：溃疡面消退＞60%，口腔溃疡基本愈合。②有效：溃疡面消退30%～60%，口腔溃疡虽然时有复发，但数量减少，程度减轻。③无效：口腔溃疡症状及溃疡无明显好转，溃疡面无消退或加重。总有效率=（显效+有效）例数/总例数×100%。

1.6统计学处理

采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料采用 χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群检测结果的比较

观察组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+治疗前后的检测结果比较，差异均有统计学意义（P＜0.01），对照组治疗前后比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。两组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）（表1）。2.2两组患者治疗后前辅助T淋巴细胞检测结果的比较

表1 两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群检测结果的比较（±s）

 

与对照组比较，#P＜0.05

观察组辅助T淋巴细胞Th1（IFN-γ、TNF-α、IL-2）、Th2（IL-4、IL-6、IL-10）、IFN-γ/IL-4治疗前后检测结果比较，差异均有统计学差异（P＜0.01），对照组治疗前后IL-6比较，差异有统计学意义（P＜0.01），其他差异均无统计学意义（P＞0.05）。两组治疗后INF-α、IL-6比较，差异无统计学意义（P＞0.05），其他差异均有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 两组患者治疗后前辅助T淋巴细胞检测结果的比较（pg/ml±s）

 

与对照组治疗后比较，☆P＜0.05

2.3两组患者治疗后临床效果的比较

两组临床疗效观察结果显示，观察组总有效率为92.08%，复发率为9.23%，对照组有效率为73.85%，复发率为36.92%，差异有统计学意义（P＜0.05）（表3）。

表3 两组患者治疗后临床疗效的比较[n（%）]

 

与对照组比较，*P＜0.05

复发性口腔溃疡在一般人群中的发病率≤10%，在特定人群中，其发病率达50%～60%[5]。目前复发性口腔溃疡的病因尚不甚清楚，因此治疗原则是防止继发感染，减轻疼痛与促进愈合、缩短疗程[6]。复发性口腔溃疡的病因不明，大多学者认为复发性口腔溃疡病因与免疫功能紊乱有关，T细胞介导的免疫反应被认为与该病发病机制密切相关[7]。近来一些研究表明[8-12]，复发性口腔溃疡是一种自身免疫性疾病，其病理过程与机体本身免疫，Th1/Th2失衡、CD4-、CD25-Foxp3-Trey减少、细胞因子分泌紊乱、膜抗体形成、变态反应等一系列免疫紊乱反应有关。1969年，Lehner等首次发现复发性口腔溃疡前驱期病损部位有大量T淋巴细胞浸润，溃疡前期以T辅助细胞占多数，溃疡期转为以细胞毒T细胞为主，愈合期又以T辅助细胞为主。

本研究结果表明，采用盐酸左旋咪唑片配合外用rb-bFGF无菌喷雾剂治疗复发性口腔溃疡的观察组，治疗前后T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+，辅助性T淋巴细胞IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ/IL-4均有统计学差异。单纯盐酸左旋咪唑片治疗的对照组，除IL-6治疗前后有统计学差异外，其他均无统计学意义。该研究进一步证明复发性口腔溃疡中的细胞介导免疫反应与T淋巴细胞群及辅助T淋巴细胞有关。T淋巴细胞亚群的研究发现，复发性口腔溃疡患者CD3+、CDQ+、CDa+以及CDQ+/CDa+亚群均有不同程度的变化，这些变化可能是导致复发性口腔溃疡发生的诱因[13-14]。辅助T淋巴细胞分为Th1与Th2，Th1细胞主要产IFN-γ、TNF-α、IL-2，介导细胞免疫应答。Th2细胞主要产生IL-4、IL-6、IL-10，介导体液免疫应答。本研究结果显示，Th1与Th2观察组均有较大的变化，对照组虽然Th1 与Th2的变化无统计学差异，但治疗前后还是有一定变化，且两组Th1与Th2与正常人有明显的差异，与Al-Samadi等[15]发现复发性口腔溃疡患者溃疡形成主要取决于Th1型细胞免疫应答的激活，以及Th1/Th2免疫失衡的结果一致。

本研究临床疗效观察发现，观察组总有效率为92.08%，复发率为9.32%，对照组总有效率为73.85%，复发率为36.92%。两组均采用了免疫制剂左旋咪唑片，观察组加用了rb-bFGF无菌喷雾剂外用，有效率竟然高出对照组，与rb-bFGF外用效果有关。rb-bFGF为碱性成纤维细胞生长因子，是一种广泛存在于人体脑内和神经等组织的生物活性物质，具有调节蛋白和化学趋化,促进修复和再生的作用，对伤口愈合过程中所有相关细胞的促有丝分裂原，调节蛋白和化学趋化、促进组织损伤的修复，改善局部血液循环加速创面愈合有促进作用[16-17]。

左旋咪唑在治疗复发性口腔溃疡中是通过诱导Ⅰ类细胞因子的释放来激发细胞免疫、降低血清IgE的浓度，增加干扰素的生成量提高机体免疫力。进一步研究发现，左旋咪唑在提高脾细胞干扰素表达的同时，还能调节Ⅰ类细胞因子和Ⅱ类细胞因子的相对关系，从而调节免疫反应的平衡，从而改善复发性口腔溃疡的发病过程中Th1、Th2细胞功能失平衡现象[18]。左旋咪唑还可显著促进外周血T淋巴细胞增殖，使CD4+/CD8+淋巴细胞比值明显升高[19-20]。但单纯用左旋咪唑治疗复发性口腔溃疡效果不及左旋咪唑配合外用rb-bFGF无菌喷雾剂治疗，可见在治疗复发性口腔溃疡的过程中，除改善机体免疫功能外，消炎、促进溃疡愈合也是非常重要的一步。左旋咪唑片配合外用rb-bFGF无菌喷雾剂治疗既改善了患者免疫功能，又促进溃疡面的愈合，因此治疗效果优于单纯左旋咪唑的治疗。

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Efficacy analysis of immunosuppressive agents with topical Recombinant bovine basic fibroblast growth factor on recurrent oral ulcers

NIE Jian-fang
Department of Stomatology,the Third Hospital of Nanchang City in Jiangxi Province,Nanchang 330009,China

[Abstract]ObjectiveTo analyze clinical efficacy of recurrent oral ulcers treated by immune agents Levamisole hydrochloride with topical rb-bFGF(recombinant bovine basic fibroblast growth factor).Methods130 patients with recurrent oral ulcers from January 2014 to December 2015 in our hospital were randomly divided into observation group and control group according to treatment around,65 cases in each group.The patients in observation group were treated by Levamisole hydrochloride tablets with rb-bFGF sterile topical sprays,patients in control group were treated by Lvamisole hydrochloride.CD3+,CD4+,CD8+cells in T lymphocytes;helper T lymphocytes（helper T cell Th）,Th1（IFN-γ,TNF-α, IL-2）,Th2（IL-4,IL-6,IL-10）in the serum and the clinical efficacy were compared before and after treatment,the clinical effects of Levamisole hydrochloride tablets with rb-bFGF topical was analyzed for patients with recurrent oral ulcers.ResultsCD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+of T lymphocytes in patients of observation group were significant differenres before and after treatment（P＜0.01）,no significant difference in the control group after treatment（P＞0.05）.After treatment,CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+were significant differences between two groups（P＜0.05）.The helper T lymphocytes, Th1（IFN-γ,TNF-α,IL-2）,Th2（IL-4,IL-6,IL-10）,IFN-γ/IL-4 in observation group were significant differences before and after treament（P＜0.01）,in addition to IL-6 was significant differece in the control group（P＜0.01）,others were no significant differences（P＞0.05）.After treatment,INF-α,IL-6,were no significant differences,others were significant differenles （P＜0.05）.Clinical total effective rate was 92.08%,the recurrence rate of 9.23%in observation group,the control group was 73.85%,the recurrence rate of 36.92%,there was significant difference between two groups（P＜0.01）.ConclusionTreatment by Levamisole hydrochloride tablets with b-bFGF topical can effectively improve T lymphocyte subsets and serum helper T lymphocytes expressing for the patients with recurrent oral ulcers and reduce their the recurrence rate.

[Key words]Recurrent oral ulcers;Levamisole;Recombinant bovine basic fibroblast growth factor(rb-bFGF);T lymphocyte subsets;Helper T lymphocytes;Clinical efficacy

[中图分类号]R781.9

[文献标识码]A

[文章编号]1674-4721（2016）12（c）-0091-04

（收稿日期：2016-10-13本文编辑：顾雪菲）