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江苏省苏州市吴江区第一人民医院病理科，江苏苏州　215200

［摘要］目的探讨胃腺癌中P53、HER2和Ki-67的表达及其与临床病理特征和侵袭转移的关系。方法收集本科2012年11月～2015年12月病理学确诊为胃腺癌的组织标本142例，采用免疫组化EliVision法检测其P53、HER2和Ki-67的表达，并分析其与临床病理特征和侵袭转移的关系。结果P53、HER2和Ki-67在胃腺癌中表达率分别为70.42%，83.10%和32.39%；P53在肿瘤直径，分化程度，Lauren分型，淋巴结转移和脉管癌栓组中表达差异有统计学意义（P＜0.05）；HER2在不同分化程度，Lauren分型，浸润深度，淋巴结转移和脉管癌栓组表达差异有统计学意义（P＜0.05）；Ki-67在分化程度，Lauren分型，浸润深度和淋巴结转移组中差异有统计学意义（P＜0.05）。P53与Ki-67高表达呈正相关（P＜0.05）；HER2与Ki-67高表达呈正相关（P＜0.05）。结论联合检测P53、HER2和Ki-67在胃腺癌中的表达有利于对胃腺癌患者的预后评估及个体化的分子靶向治疗提供科学依据。

［关键词］胃腺癌；P53；HER 2；Ki-67；免疫组化

胃癌发病率和死亡率位于恶性肿瘤的第三位［1］，其侵袭、转移是胃癌患者死亡的重要原因。P53基因是一种与人类肿瘤关系最为密切的抑癌基因，其发生缺失或突变后，可导致细胞向恶性转化。人类表皮生长因子受体2（HER2）是由HER2癌基因编码的，具有较强的催化激酶活性，可促进细胞过度增殖［2］，在多种肿瘤中均见异常表达，Ki-67是目前应用最广泛的增殖细胞标志物之一。本文采用免疫组化方法检测胃腺癌中P53、HER2和Ki-67的表达，并探讨其与临床病理特征及侵袭转移的关系，为胃腺癌的诊断、治疗及预后提供客观的参考依据。

1.1　材料

选取苏州市吴江区第一人民医院2012年11月～2015年12月手术切除的胃癌根治标本142例。所有标本术前均未进行放、化疗，其中男性99例，女性43例，年龄32～88岁，平均65.87岁。其中淋巴结转移者79例。

1.2　方法

采用EliVision两步法，组织标本经4%中性甲醛固定24 h，石蜡包埋，连续切片，厚4μm。P53、HER2、Ki-67试剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司。用已知阳性标本作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。

1.3　结果判定

P53以细胞核呈棕黄色或棕褐色为显色，每例随机观察10个高倍视野，计算阳性细胞率，阳性细胞率＞10%为阳性、≤10%或无染色者为阴性。HER2判定参照ToGA研究经验［3］及中国胃癌HER2检测指南（2011）标准［4］，无着色或＜10%肿瘤细胞膜染色（0/阴性）；≥10%肿瘤细胞微弱或隐约可见膜染色（1+/阴性）；≥10%肿瘤细胞呈弱或中度的细胞膜染色（2+/不确定）；≥10%肿瘤细胞呈强的细胞膜染色 （3+/阳性）。0～2+视为HER2阴性，3+视为HER2阳性［5］。Ki-67判定：以细胞核着色为阳性，取任意5个高倍镜视野中阳性细胞所占细胞总数比例的平均值为Ki-67阳性率，分为阳性细胞数＜25%、25%～50%、＞50%共3个等级，其中＞50%判为Ki-67高表达［6］。染色结果均由2位主治以上病理医师双盲评估。

1.4　统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析，计数资料采用χ2检验。相关性分析采用Spearman相关性分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1　P53、HER 2和Ki-67的表达

P53和Ki-67蛋白定位于细胞核，HER2蛋白表达于细胞膜，均呈棕黄或棕褐色颗粒状。P53、HER2 和 Ki-67在胃腺癌中的表达率分别为70.42%、83.10%和32.39%。

2.2　P53、HER 2、Ki-67与临床病理特征的关系

P53、HER2和Ki-67在患者性别、年龄中表达差异无统计学意义（P＞0.05）。P53表达与肿瘤直径、分化程度、Lauren分型、淋巴结转移和脉管癌栓相关（P＜0.05）；HER2蛋白表达与肿瘤分化程度、Lauren分型、浸润深度、淋巴结转移和脉管癌栓组相关（P＜0.05）；Ki-67在肿瘤分化程度、Lauren分型、浸润深度和淋巴结转移组中差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1　P53、HER2、Ki-67与临床病理特征的关系

2.3　P53、HER 2与Ki-67高表达的相关性

经相关分析，胃腺癌中P53与Ki-67高表达呈正相关 （r=0.335，P＜0.05），HER2与Ki-67高表达呈正相关（r=0.408，P＜0.05）。

P53基因是一种抑癌基因，分野生型和突变型两种形式。野生型P53基因位于正常人体细胞中，是细胞生长的负性调节因子和细胞凋亡的重要调控基因［7］，由于其半衰期短，免疫组化很难检测；P53基因突变可导致细胞异常增殖。突变型P53蛋白稳定性增加，能够用免疫组化检测［8］。本研究中P53在胃腺癌的表达率高达70.42%，其与肿瘤直径，分化程度，Lauren分型，淋巴结转移和脉管癌栓相关，提示突变型P53可导致肿瘤细胞无限制增殖，促进微血管增生，从而在胃腺癌的发展和浸润中发挥重要作用［9］。

原癌基因HER2属于生长因子受体，可调节细胞的生长、分化和增殖。HER2基因扩增导致HER2受体蛋白过度表达，随着其阳性表达率的增高，病理分级也随之增高［10］，预后较差。李龙等［11］证实，HER2在胃癌的发生、发展以及浸润、转移中起重要作用，是胃癌的重要预后指标。本文HER2的表达率为83.10%，其表达与肿瘤分化程度，Lauren分型，浸润深度，淋巴结转移和脉管癌栓相关，分化较好的肠型腺癌HER2表达率较高，而低分化的印戒细胞癌表达较低，与相关文献报道相似［12］，但对浸润深度，淋巴结转移和脉管癌栓的关系报道不一，这可能与标本固定、取材及HER2抗体选择等有关。

Ki-67是一种细胞增殖相关的核抗原，其表达随细胞周期的变化而变化，可有效反映肿瘤的增殖活性，与恶性肿瘤的发生、发展及侵袭、转移密切相关［13-14］。刘萍等［15］提示，Ki-67蛋白表达与肿瘤组织学类型及浸润深度有关。本研究发现，Ki-67在胃腺癌中表达率为32.39%%，较文献报道稍高［15］，其表达与肿瘤分化程度，Lauren分型，浸润深度和淋巴结转移显著相关，说明Ki-67高表达者常提示肿瘤分化程度低，易浸润和转移，并发现其表达与HER2呈正相关，表明HER2阳性且Ki-67高表达者预后较差。

综上所述，P53、HER2及Ki-67在胃腺癌组织中表达较高，且P53和HER2蛋白表达与Ki-67高表达均呈正相关，提示P53、HER2及Ki-67蛋白表达的联合检查对胃腺癌患者的预后评估及个体化的精确医疗有重要意义。

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The correlation of P53,HER2 and K i-67 protein expression in gastric cancer

ZHAN Rui
Department of Pathology，the First People＇s Hospital of Wujiang District in Suzhou City of Jiangsu Province，Suzhou 215200，China

[Abstract]Objective To investigate the expression，clinical significance，invasion andmigration of P53，HER2 and Ki-67 in gastric cancers.Methods 142 cases gastric cancerswere collected from November 2012 to December 2015 of department of pathology.Immunohistochemistry was used to detect the expression of P53，HER2 and Ki-67 in 142 cases of gastric cancer.The correlation between their expression and pathologic parameters were analyzed by statistics.Results The positive rate of P53，HER2 and Ki-67 in 142 cases of gastric cancer was 70.42%，83.10%and 32.39%respectively.The differences of the expression of P53 in tumor size，different histological grading group，the Lauren classification，lymph nodemetastasis group and vascular invasion group were statistically significant（P＜0.05）；the expression of HER2 was statistically associated with different histological grading group，the Lauren classification，different depth of invasion，lymph nodemetastasis group and vascular invasion group（P＜0.05）；the expression of Ki-67 was statistically associated with different histological grading group，the Lauren classification，different depth of invasion，lymph nodemetastasis group（P＜0.05）.The expression of P53 was positively correlated with Ki-67（P＜0.05），and so did HER2（P＜0.05）.Conclu-sion Combined detection of P53，HER2 and Ki-67 has very important significance in judging prognosis and guiding clinical treatment of gastric cancer.

[Key words]Gastric cancer；P53；HER2；Ki-67；Immunohistochemistry

［中图分类号］R735.2

［文献标识码］A

［文章编号］1674-4721（2016）09（c）-0153-03

（收稿日期：2016-07-15本文编辑：王红双）

［作者简介］展瑞（1981-），女，汉族，江苏苏州人，主治医师，主要研究方向：肿瘤病理学