曾伟荣　蔡桂丰　阮永铭　赵　琴

广东省珠海市妇幼保健院生殖中心，广东珠海　519000

［摘要］目的 探讨体外受精-胚胎移植重复周期的次数对患者临床结局影响及其原因，研究反复体外受精-胚胎移植失败的相关因素。方法 选取2015年1～12月在本院生殖中心接受体外受精-胚胎移植治疗的469例患者作为研究对象，按重复次数将其分为A组（326例）和B组（143例）。A组为重复周期次数为1次的患者，B组为重复周期次数≥2次的患者。比较两组的年龄、不孕年限、HCG日内膜厚度、Gn用量、卵泡数、获卵数、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率。结果A组的年龄和Gn用量小于B组，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组的卵泡数、获卵数、临床妊娠率高于B组，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组的不孕年限、HCG日内膜厚度与B组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组的卵裂率和优质胚胎率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 在不同重复次数的周期中，年龄的差异直接影响临床结局，适当改善Gn用量，优化胚胎实验室的环境和技术可能会改善反复体外受精-胚胎移植失败患者的临床结局。

［关键词］重复辅助生殖周期；体外受精-胚胎移植；临床妊娠率

常规体外受精（in vitr o fertilization，IVF）周期中，首次治疗的患者失败比例高达40%～70%［1］，有很多患者需经历几个周期才能获得理想的结果，这给患者造成很大的精神和经济压力。目前，关于影响体外受精-胚胎移植（IVF-ET）反复失败结局的因素尚不清楚。本研究通过比较1次IVF-ET妊娠与2次以上妊娠患者的临床结局，探讨影响重复周期IVF-ET结局的因素，为提高重复IVF-ET的妊娠率提供有效的依据。

1.1　一般资料

选取2015年1～12月在珠海市妇幼保健院生殖中心接受IVF治疗的469例重复周期次数≥1并采用长方案的患者作为研究对象，将重复周期次数为1次的326例患者作为A组，重复周期次数≥2次的143例患者作为B组。纳入标准：①年龄30～40岁；②排除微刺激和拮抗剂方案；③重复1次以上的促排卵周期；④行IVF、补救性卵泡质内单精子注射（RICSI）、卵泡质内单精子注射（ICSI）受精方式的患者；⑤排除未移植周期的患者。两组的年龄、基础卵泡数、基础卵泡刺激素（FSH）、身体质量指数（BMI）、不孕年限等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有患者均签订知情同意书，并上报本院医学伦理委员会批准。

1.2　方法

1.2.1　治疗方案　所有患者于排卵后7 d左右开始短效GnRH-a0.05mg或0.1mg/d皮下注射，或长效GnRH-a 1.500～1.875 mg肌内注射；如B超发现有 ＞10 mm的囊肿则需穿刺并送病理检查；14 d后抽血复查激素，降调标准为雌二醇（E2）＜50 pg/ml，黄体生成素（LH）＜5 m IU/ml，B超子宫内膜＜5 mm；如未达标准，则适当延长时间启动。胚胎移植后14 d查尿或血HCG，若阳性则在4～6周行B超检查，见孕囊判断为临床妊娠。

1.2.2　受精　手淫法取精至无菌杯，用密度梯度离心法洗涤精子，根据精子当日情况行IVF或ICSI受精。

1.2.3　胚胎观察及临床妊娠诊断标　受精后16～20 h观察受精情况，出现两个原核（2PN）和两个极体为正常受精。取卵后48 h或72 h行胚胎移植术，按原核和胚胎形态学评分标准（Ⅰ级和Ⅱ级胚胎为优质胚胎，Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ胚胎为可利用胚胎选择胚胎），胚胎移植后14 d血β-HCG＞5 U/L为生化妊娠，移植后4～6周B超见妊娠囊为临床妊娠。

1.3　观察指标

比较不同受精方式在获卵数、卵裂率、正常受精率、优质胚胎率、移植周期妊娠率上的差异。正常受精率=2原核（PN）/获卵数×100%；优质胚胎率=优质胚胎数/2PN卵裂数×100%；妊娠率=临床妊娠周期数/移植周期数×100%。

1.4　统计学处理

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计量资料以表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

A组的年龄和Gn用量小于B组，卵泡数、获卵数、临床妊娠率高于B组，差异有统计学意义（t= 6.39，5.04，7.22，χ2=4.17，P＜0.05）。A组的不孕年限、HCG日内膜厚度与B组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组的卵裂率和优质胚胎率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。

虽然现代辅助生殖技术得到了长足的发展，但如何提高反复IVF-ET失败患者的受孕率仍然是一个难题。国外有资料报道，第2次IVF-ET周期的成功率仅为26%～35%［2］。另有研究显示，对于优质胚胎冷冻的IVF-ET周期来讲，第1周期与其后的周期妊娠率相似［3］。其他临床研究结果显示，行IVF助孕的妇女第1周期的受孕率最高，第2周期以后逐渐降低，后稳定在一个平台期［4］。本研究结果显示，重复周期为1次妇女的卵泡数、获卵数、临床妊娠率均高于重复周期2次以上妇女，这与其他研究结果基本一致［5-8］。

对于准备重复周期的患者，临床医生需要考虑很多方面的因素，如患者的年龄和卵巢储备功能、HCG日子宫内膜的厚度、上周期患者的Gn用量和获卵数目、获卵率、卵裂率、优质胚胎率等［6-10］。目前，如何提高重复周期患者的临床结局仍存在分歧，有学者认为不同的促排卵方案是重复周期的关键因素［11-12］；也有学者认为优化实验室的环境、挑选优质胚胎和胚胎潜能的评估、各种胚胎的操作技术至关重要［13］；亦有学者认为先进行D3的移植，让胚胎促进子宫内膜的容受性后再进行D5的移植，通过二次移植可提高重复周期的妊娠率［14］。

本研究结果显示，年龄、获卵数、Gn的用量、HCG日子宫内膜的厚度对于反复周期的临床结局至关重要。随着患者年龄的升高、不孕年限的增加，其所对应的卵巢储备功能、获卵数、胚胎质量和妊娠率均下降，卵泡的老化和非整倍体胚胎均明显增加。有研究指出，随着年龄的增加，女性卵巢中的卵泡加速闭锁，卵泡数量和获卵数减少导致妊娠率的下降，与本文结果基本一致［15-19］。Gn的用量随着重复周期次数的增加而增加，但获卵数却随周期递减，说明卵巢储备功能呈下降趋势，并且产生外源性Gn的自身抗体，阻止了激素的效应［17-19］。HCG日内膜厚度随周期数的增加而变薄，说明子宫内膜的容受性正在下降。

关于反复IVF-ET失败患者的处理意见目前尚存在一定争议，有学者认为促排卵方案是影响IVFET反复助孕结局的重要因素，另外的一些学者则认为囊胚移植可以较好地改善反复失败患者的妊娠结局，因此挑选更好的胚囊，改善子宫内膜的容受性至关重要，但也有学者认为胚囊移植不能改善助孕的结局。目前，输卵管内胚胎移植、低分子肝素改善微循环、人血丙种球蛋白免疫保护、中药辅助治疗等方法对反复IVF-ET失败患者的助孕效果得到了肯定。

综上所述，改善重复周期患者的治疗结局应根据患者的具体情况来调整合理的治疗方案，优化胚胎实验室的环境和技术，这将有望进一步提高重复周期患者的妊娠率，减轻患者痛苦。

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Analysis of the clinical outcomes of in vitro fertilization and embryo transfer cycles

ZENGWei-rong CAIGui-Feng LU Yong-Ming ZHAO-Qin
Reproductive Center，Maternal and Childrens Health Care Hospital of Zhuhai City in Guangdong Province，Zhuhai 519000，China

［Abstract］Objective To explore the influence of the frequency of the repeated cycles of in vitro fertilization and embryo transfer on the clinical outcome of the patients and its causes，to study the related factors of failure of recurrent in vitro fertilization and embryo transfer.Methods 469 caseswho received in vitro fertilization and embryo transfer in the reproductive center of our hospital from January to December in 2015 were selected and divided into the group A　（326 cases）and group B（143 cases）according to the repeat frequency.Group A was repeated cycle 1，while group B was repeated cycle greater than or equal to 2.The age，duration of infertility，HCG thickness of the endometrium，GN dosage，the number of follicles，oocytes and cleavage rate，high quality embryo rate and clinical pregnancy rate was compared between two groups.Results The age and the amount of Gn in group A was less than that group B，with significant difference　（P＜0.05）.The number of follicles，the number of eggs，the clinical pregnancy rate in group A was higher than that oin group B，with significant difference　（P＜0.05）.There was no significant difference in the duration of infertility，HCG thickness of the endometrium between group A and group B（P＞0.05）.There was no significant difference in the oocytes and cleavage rate，high quality embryo rate between the two groups（P＞0.05）.Conclusion In the cycle of different repetition frequency，the difference of age directly affects the clinical outcome，The clinical pregnancy outcome of repeated in vitro fertilization and embryo transfer failure in patientsmay be improved by proper improving the amount of Gn，optimizing the environment and technology of the embryo lab.

［Key words］Repeated assisted reproductive technology cycles；In vitro fertilization and embryo transfer；Clinical pregnancy rate

［中图分类号］R715.5

［文献标识码］A

［文章编号］1674-4721（2016）09（b）-0074-03

（收稿日期：2016-07-12本文编辑：祁海文）