脂蛋白磷脂酶A2活性与妊娠期糖尿病及妊娠结局的相关性分析
李　慧　廖碧翎　周　平　饶美兰　洪淑贞
广东省妇幼保健院妇产科，广州　510010
［摘要］目的 探讨脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）活性与妊娠期糖尿病（GDM）及妊娠结局的相关性。方法 选取2013年1月～2014年1月在我院分娩的150例孕产妇为研究对象，其中正常对照组50例，GDM者100例，根据血糖控制情况分为控制良好组50例和控制不良组50例。对比三组孕妇的外周血Lp-PLA2活性，并对妊娠结局状况进行统计分析。结果 血糖控制不良组患者的外周血Lp-PLA2活性显著高于血糖控制良好组和对照组（P＜0.05），血糖控制良好组和对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；多因素回归分析显示，孕周、是否合并GDM与Lp-PLA2活性并无显著相关，血糖控制情况与Lp-PLA2活性有显著相关；妊娠结局对比显示，血糖控制不良组的总体不良妊娠结局显著高于血糖控制良好组和对照组（P＜0.05），血糖控制不良组和血糖控制良好组在早产、胎膜早破发生率上均显著高于对照组（P＜0.05），且血糖控制不良组早产发生率高于血糖控制良好组（P＜0.05）。结论GDM孕妇的血糖控制情况与Lp-PLA2活性有显著相关，血糖控制不良孕妇的Lp-PLA2活性显著增高，且不良妊娠结局发生率升高，提示Lp-PLA2活性可能与GDM血管病变发生有所相关。
［关键词］妊娠期糖尿病；血糖控制；妊娠结局；脂蛋白磷脂酶A2活性
妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）是常见的妊娠期并发症，和许多不良妊娠结局密切相关，GDM患者存在胰岛素抵抗、高脂血症、脂代谢紊乱等多种现象，由此导致血管内皮损伤是引发不良妊娠结局的重要原因［1-2］。脂蛋白磷脂酶A2（lipoprotein phospholipase A2，Lp-PLA2）是一种新型炎症标记因子，近年来在内科疾病的诊断上有着重要的意义［3］，目前研究［4］认为脂代谢紊乱是导致活性增高的主要原因。相关文献［5］研究显示，Lp-PLA2活性的增高可能导致胰岛素抵抗增加，而胰岛素抵抗又会引起Lp-PLA2合成增加，从而形成恶性循环。本文就Lp-PLA2活性与GDM的相关性以及对妊娠结局的影响进行了分析，现报道如下。
1　资料与方法
1.1一般资料
选取2013年1月～2014年1月在我院分娩的150例孕产妇为研究对象，年龄21～42岁，平均（25.9± 2.4）岁，其中正常对照组50例，GDM 100例，根据血糖控制情况把GDM孕妇分为控制良好组50例和控制不良组50例。GDM诊断标准参照2011年美国糖尿病协会最新的GDM诊断指南［6］，排除孕前糖尿病史患者，本次研究所有患者均签署知情同意书，且经医院伦理委员会审批通过。
1.2方法
所有孕妇隔夜禁食，至少空腹＞10 h，于清晨采集静脉血8 ml，放置于EDTA抗凝管（上海新睿生物科技有限公司生产）中保存，在4℃条件下置于低温高速离心机中进行离心，调节转速为2500 r/min，离心10 min，取上层血浆保存在-80℃条件下。采用酶联免疫法测定Lp-PLA2活性，试剂盒由上海Bio-SWAMP公司提供，在酶标包被板上设标准品孔，进行标准品的稀释剂加样（稀释后各孔加样量均为100 μl，活性分别为1000，500，250，62.5，0 U/L）。分别设空白孔及待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔先加样品40 μl，然后再加生物素标记的抗 LP-PLA2抗体10 μl。加样将样品加于酶标板孔底部，轻轻摇晃混匀，用封板膜封板后置37℃温育30 min。洗涤5次后拍干，于每孔加入酶标试剂50 μl，空白孔除外。再次温育洗涤后，进行显色15 min。加入终止液，以空白孔调零，450 nm波长依序测量各孔的吸光度（OD）值。测定在加终止液后15 min内进行。
1.3观察指标
对比三组患者的Lp-PLA2活性，并对比三组不良妊娠结局情况，包括巨大儿、生长受限、胎膜早破、早产等。
1.4统计学方法
采用SPSS 20.0软件对数据进行处理，多组间计量资料对比采用方差分析，两组间计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以孕周、GDM、血糖控制作为自变量进行回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2　结果
2.1三组Lp-PLA2活性的比较
血糖控制不良组、血糖控制良好组、对照组的Lp-PLA2活性分别为（274.3±22.7）ng/ml、（186.9±18.6）ng/ml、（179.3±17.6）ng/ml，血糖控制不良组患者的外周血Lp-PLA2活性显著高于血糖控制良好组和对照组（P＜0.05），血糖控制良好组和对照组之比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。
2.2 Lp-PLA2活性的回归分析
多因素回归分析显示，孕周、是否合并GDM与Lp-PLA2活性并无显著相关，血糖控制情况与Lp-PLA2活性有显著相关（表1）。
表1　Lp-PLA2活性的回归分析

2.3三组孕妇不良妊娠结局的比较
妊娠结局对比显示，血糖控制不良组的总体不良妊娠结局显著高于血糖控制良好组和对照组 （P＜0.05），血糖控制不良组和血糖控制良好组在早产、胎膜早破发生率上均显著高于对照组（P＜0.05），且血糖控制不良组早产发生率高于血糖控制良好组 （P＜0.05）（表2）。
表2　三组孕妇不良妊娠结局的比较［n（%）］

 
与对照组比较，*P＜005；与血糖控制良好组比较，△P＜0.05
3　讨论
Lp-PLA2能够和血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）相结合，导致PAF失活，因此也被称为血小板活化因子乙酰水解酶，其活性部位主要由丝氨酸、组氨酸和天冬氨酸构成，由巨噬细胞分泌产生［7］。在机体外周血中Lp-PLA2主要是以和脂蛋白颗粒相结合的方式存在，相关研究［8］发现Lp-PLA2能够促进动脉粥样硬化发生，可与氧化卵磷脂反应产生促炎性介质，加速单核细胞向内膜的聚集，从而促进巨噬细胞的合成，巨噬细胞吞噬低密度脂蛋白产生大量泡沫细胞，泡沫细胞聚集进而引发动脉粥样硬化。胰岛素是体内调节代谢的重要激素，在糖代谢和脂代谢中均有重要作用，胰岛素抵抗指的是靶组织对胰岛素的敏感性降低，必须维持高水平胰岛素才能达到正常的糖耐量标准［9-10］。正常孕妇胎盘合成的雌激素、孕激素、催乳素及胎盘胰岛素酶均具有一定的胰岛素拮抗作用，从而使母体的胰岛素敏感性降低，产生胰岛素抵抗现象，这种情况在孕晚期达到峰值，这是一种正常的生理反应，仍有一部分孕妇发生GDM，表现为病理性的胰岛素抵抗［11］。胰岛素抵抗会导致机体处于轻微应激反应状态，血管内皮细胞发生损伤，代谢功能障碍，凝血系统异常激活，Lp-PLA2水平增高。Lp-PLA2水平上升所产生的炎性因子又会刺激脂肪和肌肉组织，加剧胰岛素抵抗现象，增加血管内皮细胞的损伤程度，形成恶性循环［12］。从本研究结果看，血糖控制不良组孕妇的Lp-PLA2活性水平显著高于其他两组，血糖控制良好组与对照组相比差异无统计学意义；多因素回归结果显示，GDM并非Lp-PLA2活性增加的独立危险因素，而血糖控制则会影响Lp-PLA2的活性水平，说明GDM患者的Lp-PLA2活性水平是与血糖控制情况显著相关的，这个研究结果与Catarino等［13］的结论相一致。
大量研究［14-16］显示GDM会增加不良妊娠结局发生率，从本研究结果来看，血糖控制不良组的总体不良妊娠结局显著高于血糖控制良好组和对照组（P＜0.05），血糖控制不良组和血糖控制良好组在早产、胎膜早破发生率上均显著高于对照组（P＜0.05），说明GDM患者即使有效控制血糖也同样存在不良妊娠结局的可能；GDM患者间对比显示，血糖控制不良组早产发生率高于血糖控制良好组（P＜0.05），说明Lp-PLA2活性的增高会导致早产率的升高。也有学者［15］认为，Lp-PLA2活性增高可能导致胎儿宫内生长受限的发生率升高，主要是考虑Lp-PLA2活性上升会引起血管病变，血管内皮细胞受损、功能异常可导致凝血系统被激活，影响母体与胎儿间营养物质的交换，从而影响胎儿的生长发育，但这一点并未在本研究数据中体现出来，考虑原因可能与样本量较小有关，尚需进一步研究证实。
综上所述，GDM孕妇的血糖控制情况与Lp-PLA2活性显著相关，血糖控制不良孕妇的Lp-PLA2活性显著增高，且不良妊娠结局发生率升高，提示Lp-PLA2活性可能与GDM血管病变发生相关。
［参考文献］
［1］Moses RG.Gestational diabetes mellitus：implications of an increased frequency with IADPSG criteria［J］.Diabetes Care，2012，35（3）：461-462.
［2］杨冰，王卫淑，裴志强，等.脂蛋白相关磷脂酶A2与2型糖尿病及血管并发症相关性研究［J］.中华实用诊断与治疗杂志，2011，25（1）：24-27.
［3］麦彩园，段冬梅，雷琼，等.脂蛋白相关磷脂酶A2与妊娠期糖尿病患者产后糖代谢异常的相关性［J］.中华糖尿病杂志，2014，6（9）：645-649.
［4］王文迪，杜鹃.妊娠期糖尿病孕妇脂蛋白相关磷脂酶A2活性的变化及临床意义［J］.中国医科大学学报，2014，43 （8）：738-739.
［5］Nelson TL，Kamineni A，Psaty B，et al.Lipoprotein-associated phospholipase A2and future risk of subclinical disease and cardiovascular events in individuals with type 2 diabetes：the cardiovascular health study［J］.Diabetologia，2011，54（2）：329-333.
［6］Noto H，Chitkara P，Raskin P.The role of lipoprotein-associated phospholipase A2in the metabolic syndrome and diabetes［J］.J Diab Complications，2006，20（6）：343-348.
［7］曹亁，任丽，李晓东.胰岛素抵抗下脂蛋白相关磷脂酶A2介导的炎症因子的表达与动脉硬化关系［J］.山西医药杂志，2011，40（3）：225-229.
［8］邢媛，张聪.孕晚期妊娠糖尿病脂联素、瘦素、抵抗素水平与胰岛素抵抗的相关性研究［J］.实用临床医药杂志，2014，18（17）：76-77.
［9］金镇，迟鑫姝，滕卫平，等.血糖控制满意的妊娠期糖尿病孕妇血清性激素结合球蛋白水平与妊娠结局的关系［J］.中华妇产科杂志，2011，46（6）：422-426.
［10］周强，陈波，黄海樱，等.抵抗素联合胰岛素抵抗指数在2型糖尿病诊断中的价值［J］.中国热带医学，2013，13（6）：728-729.
［11］赖丽萍，陆泽元，李翠吟，等.孕晚期妊娠糖尿病脂联素、瘦素与胰岛素抵抗的相关性［J］.实用预防医学，2012，19 （8）：1135-1137.
［12］宋耕，常乐，杨慧霞，等.妊娠糖尿病妇女产后转归的随访性研究［J］.中华糖尿病杂志，2012，4（7）：208-211.
［13］Catarino C，Rebelo I，Belo L，et al.Fetal lipoprotein changes in pre-eclampsia［J］.Acta Obstet Gynecol Scand，2014，87 （6）：628-34.
［14］Six DA，Derails EA.The expanding superfamily of phospholipase A2enzymes：classification and characterization［J］. Biochim Biophys Acta，2000，1488（1-2）：1-19.
［15］Ankumah NA，Cantu J，Jauk V，et al.Risk of adverse pregnancy outcomes in women with mild chronic hypertension before 20 weeks of gestation［J］.Obstet Gynecol，2014，123 （11）：966-972.
［16］詹洪晶.妊娠期糖尿病患者妊娠结局32例临床分析［J］.中国现代医生，2013，51（29）：131-132.
Analysis of the relationship between the activity of lipoprotein phospholipase A2and gestational diabetes mellitus and pregnancy outcome
LI HuiLIAO Bi-ling　ZHOU Ping　RAO Mei-lan　HONG Shu-zhen
Department of Gynecology and Obstetrics，Guangdong Provincial Maternity and Child Health Care Hospital，Guangzhou 510010，China
［Abstract］Objective To explore the relationship between the activity of lipoprotein phospholipase A2（Lp-PLA2）and gestational diabetes mellitus　（GDM）and pregnancy outcome.Methods Altogether 150 pregnant women who gave birth in our hospital from January 2013 to January 2014 were selected as research object and divided into three groups，including 50 cases healthy in control group，each 50 cases of GDM in good glycemic control group and poor glycemic control group according to blood glucose control.The peripheral blood Lp-PLA2activity of pregnant women in three groups was compared and the statistics on the state of pregnancy outcomes were analyzed.Results The activity of peripheral blood Lp-PLA2in poor glycemic control group was significantly higher than that of good glycemic control group and control group（P＜0.05），no significant difference existed between good glycemic control group and control group （P＞0.05）.Multivariate regression analysis showed that there was no significant correlation between the gestational weeks，whether combination with GDM and Lp-PLA2activity；while，the control of blood glucose and Lp-PLA2activity were significantly related to pregnancy outcome.Through comparison of pregnancy outcomes in three groups，the overall adverse pregnancy outcome of poor glycemic control group was significantly higher than that of good glycemic control group and control group　（P＜0.05）；Incidence of preterm labor and premature rupture of membranes of poor glycemic control group and good glycemic control group were significantly higher than those of control group　（P＜0.05），and the incidence of preterm labor of poor glycemic control group was higher than that of good glycemic control group　（P＜0.05）.Conclusion The glycemic control of pregnant women with GDM is significantly correlated with the activity of Lp-PLA2.The activity of Lp-PLA2in poor glycemic control pregnant women increases significantly，and the incidence of adverse pregnancy outcomes also increases，which indicates that the activity of Lp-PLA2may be related to vascular complications of GDM.
［Key words］Gestational diabetes mellitus；Glycemic control；Pregnancy outcome；Lipoprotein phospholipase A2activity
［中图分类号］R714.256
［文献标识码］A
［文章编号］1674-4721（2016）07（a）-0109-03
［作者简介］李慧（1977-），女，山东省泰安市人，本科，副主任医师
（收稿日期：2016-05-18本文编辑：方菊花）