血清游离脂肪酸、血栓调节蛋白在妊娠期高血压疾病患者中的表达及其相关性分析
李 娜 梁景梅 刘云霞
广东省中山市东凤人民医院妇产科，广东中山 528425
广东省中山市东凤人民医院妇产科，广东中山 528425
［摘要］目的探讨游离脂肪酸和血栓调节蛋白在妊娠期高血压疾病患者中的表达及其相关性。 方法选择本院2013年1月～2014年11月收治的100例孕妇作为研究对象，按照有无妊娠期高血压疾病分为观察组（妊娠期高血压）和对照组（正常妊娠孕妇），各50例。两组均采用酶联兔疫吸附试验法检测血清中的游离脂肪酸和血栓调节蛋白水平。比较两组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平，对血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白的相关性进行分析。 结果观察组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组不同孕周的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平随着孕周的增加也逐渐增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。血栓调节蛋白与血清游离脂肪酸水平呈正相关（r=0.6604，P＜0.05）。 结论妊娠期高血压疾病的发病与游离脂肪酸浓度偏高及血栓调节蛋白水平有关，血栓调节蛋白水平与游离脂肪酸浓度呈正相关。
［关键词］游离脂肪酸；血栓调节蛋白；妊娠期；酶联免疫分析法
妊娠期高血压疾病是妊娠期常见的并发症，具有高发病率，临床表现为高血压和蛋白尿［1-2］。研究［3-4］显示，游离脂肪酸在高浓度情况下经一系列作用可损伤血管的内皮细胞，导致孕产妇妊娠期血压升高，同时可使血栓调节蛋白在血浆中的水平升高。本研究选取本院的妊娠期高血压疾病孕妇作为研究对象，探讨游离脂肪酸和血栓调节蛋白在妊娠期高血压疾病患者中的表达及其相关性。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年1月～2014年11月本院收治的50例妊娠期高血压疾病孕妇作为观察组，同时选取同期的50例正常妊娠孕妇作为对照组。根据妊娠期高血压疾病的诊断及分类标准［5］，观察组均符合诊断标准。排除标准：①存在严重妊娠合并症；②近两周内有服用药物，如皮质醇类、降压类药物等；③出现胎膜早破情况；④妊娠期间吸烟、喝酒。观察组的年龄为（24.2± 6.3）岁；孕周为（30.3±1.3）周；初产妇35例，经产妇15例。对照组的年龄为（25.6±5.8）岁，孕周为（29.5± 2.1）周；初产妇36例，经产妇14例。两组的年龄、孕周、经产妇及初产妇等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。
1.2 方法
两组均在产前空腹状态下测定血压，次日空腹状态下抽取5 m1肘静脉血于促凝管中，置于2000 r/min的离心机进行10 min离心，操作完成后，上层清亮液体为血清，将血清进行分离并置于-80℃环境下保存。采用酶联兔疫分析方法测定血清中的游离脂肪酸和血栓调节蛋白水平，将准备好的血清分为6份，每份150 μ1，分别加入相同倍数且浓度梯度为30、60、120、240、480 μ1的标准品进行混合稀释，取25 μ1上述混合溶液置于酶标板并使用封板膜封板，在37℃的温育箱下温育30 min后，将酶标板取出并取出封板膜。将废液除去并甩干，每孔加入已稀释1倍的浓缩洗涤液，洗涤5次，每次均需静置30 s后除去洗涤液，操作完成后进行拍干，除空白孔外均加入50 μ1酶标试剂，使用封板膜封板，在37℃的温育箱下温育30 min后，每孔均分别加入A、B显示剂各50 μ1，在避光的37℃温育箱下显色15 min后，在每孔加入终止剂后15 min并进行空白孔调零的基础上，在450 nm波长下按顺序测出各孔的吸光度值并记录。
1.3 观察指标
比较两组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平以及两组不同孕周血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白随孕周变化的情况，并对血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白的相关性进行分析。
1.4 统计学处理
采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以.jpg)
±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。2 结果
2.1 两组血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平的比较
观察组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。
表1 两组血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平的比较（.jpg)
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2.2 两组不同孕周血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平的比较
观察组不同孕周的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平随着孕周的增加也逐渐增高，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。
表2 两组不同孕周患者血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平的比较（.jpg)
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与对照组同时间段比较，*P＜0.05
2.3 血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白的相关性分析
血栓调节蛋白与血清游离脂肪酸水平呈正相关（r=0.6604，P＜0.05）。
3 讨论
妊娠期高血压疾病会损害孕妇很多器官功能，甚至会导致死亡，一般发病时间在妊娠20周以后［6］，严重危害到孕产妇及围生儿的生命质量，是母婴死亡率增加的原因之一。其发病机制尚不清楚，很多国内外学者认为其病因与氧化应激、兔疫适应不良及营养缺乏等诸多因素有关。目前，血管内皮细胞受到损伤及全身小动脉因系统炎性反应出现痉挛被认为是该病的基本病变［7-9］。
游离脂肪酸是一种在血清中未能与甘油、胆固醇等发生酯化的非酯化性脂肪酸，在人体内极其活跃，能反映出人体内代谢是否出现紊乱及紊乱程度［10-13］。由于妊娠期间雌激素及孕酮升高，导致三酰甘油的降解速度加快，肝脏代谢内源性脂质能力降低，进而使其合成能力增强，再加上孕妇饮食中的膳食营养不均衡，热量摄入过多，血脂水平高于非孕期，随着孕周增加血脂水平仍不断升高，导致游离脂肪酸浓度增高，进而损害内皮细胞。
本研究结果显示，观察组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平显著高于对照组，两组的血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白水平随着孕周的增加也逐渐增高，差异有统计学意义（P＜0.05）；血清游离脂肪酸与血栓调节蛋白的相关系数为0.6604，呈正相关，提示妊娠期高血压疾病的发病与游离脂肪酸浓度偏高及血栓调节蛋白水平有关，且随着游离脂肪酸水平的升高，血清调节蛋白水平也升高。其原因主要是游离脂肪酸在高浓度情况下会使血管内皮细胞的氧化应激作用增强，使得内皮源性一氧化氮生成减少，减弱了保护内皮细胞兔受氧化应激损害的作用，增加了内皮细胞内三酰甘油的堆积，致使组织出现缺血，进而激活白细胞，使内皮细胞受到损伤，血压升高，进一步发展为高血压［14-15］。内皮细胞受损后，血栓蛋白被释放到血液中，使血浆中血栓蛋白的水平升高。血栓蛋白水平与因高浓度游离脂肪酸受损的内皮细胞程度呈正相关，进而血栓调节蛋白与血清游离脂肪酸呈正相关，且妊娠期高血压疾病的发病与游离脂肪酸浓度偏高及血栓调节蛋白水平存在一定关系，这与陆志明等［16］的研究结果相似。
游离脂肪酸升高导致内皮细胞受损的作用机制可能有以下几点：①通过激活蛋白激酶进而抑制内皮源性一氧化氮合酶的活性，使得对内皮细胞起保护作用的一氧化氮生成量减少，导致内皮细胞损伤；②游离脂肪酸能通过肿瘤坏死因子增强内皮细胞的胞内炎性反应，进而诱导内皮细胞发生凋亡；③β氧化会使孕妇体内的脂质过氧化物增加，释放的氧自由基导致内皮细胞受损；④氧化应激作用增强使血管局部受损，进而诱导内皮细胞凋亡等。内皮细胞受损可使白细胞被激活，进而使得血栓蛋白释放入血，导致血浆中的血栓蛋白水平升高，且随着孕周的增加而逐渐升高，呈现正相关，可反映血管内皮细胞受损程度［17］。
综上所述，妊娠期高血压疾病的发病与游离脂肪酸浓度偏高及血栓调节蛋白水平有关，且血栓调节蛋白与血清游离脂肪酸呈正相关。
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Expression and correlation analysis on serum free fatty acid and thrombo-modulin in patients with hypertensive disorder complicating pregnancy
LI Na LIANG Jing-meiLIU Yun-xia
Department of Gynaeco1ogy and Obstetrics，Dongfeng Peop1e＇s Hospita1 of Zhongshan City in Guangdong Province，Zhongshan 528425，China
Department of Gynaeco1ogy and Obstetrics，Dongfeng Peop1e＇s Hospita1 of Zhongshan City in Guangdong Province，Zhongshan 528425，China
[Abstract]Objective To exp1ore the expression and corre1ation on serum free fatty acid （FFA）and thrombomodu1in （TM）in patients with hypertensive disorder comp1icating pregnancy.Methods 100 pregnant women in our hospita1 from January 2013 to November 2014 were se1ected and divided into the observation group（hypertensive disorder comp1icating pregnancy）and the contro1 group （hea1thy pregnant women），50 cases in each group.The 1eve1 of serum FFA and TM in the two groups were detected by ELISA and then compared，the corre1ation between serum FFA and TM was ana1yzed.Results The 1eve1 of serum FFA and TM in the observation group was higher than that in the contro1 group，with significant difference （P＜0.05）.The 1eve1 of serum FFA and TM in the different gestationa1 weeks in the observation group was higher than that in the contro1 group，with significant difference （P＜0.05）.The 1eve1 of serum FFA and TM in the two groups gradua11y increased a1ong with the increase of gestationa1 weeks，with significant difference （P＜0.05）. There was a positive corre1ation between TM and serum FFA（r=0.6604，P＜0.05）.Conclusion The incidence of hypertensive disorder comp1icating pregnancy is associated with high FFA 1eve1 and TM 1eve1，and the TM 1eve1 has a positive corre1ation with the concentration of FFA.
[Key words]Free fatty acid；Thrombomodu1in；Gestation period；Enzyme 1inked immunoassay
［中图分类号］R714.24+6［文献标识码］A
［文章编号］1674-4721（2016）05（b）-0069-03
（收稿日期：2016-02-16本文编辑：祁海文）