郝　瑜1，3　刘晓雯2　董　竟2　崔　彬2　焦玉莲2　周隆善4　种宗雷4　赵跃然1，2▲
1.山东省医学科学院基础医学研究所，济南250012；2.山东大学附属省立医院，济南250012；
3.山东省聊城市人民医院检验科，山东聊城252000；4.山东省聊城市人民医院神经外科，山东聊城252000

[摘要]目的探讨FK506结合蛋白51 （FKBP51）在脑胶质细胞瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取本院2013年1月～2015年1月的223例脑胶质瘤患者作为研究对象，选取同期来自于颅脑损伤手术患者的23例正常脑组织进行对照研究。采用免疫组织化学法检测FKBP51的表达水平，分析其表达水平与脑胶质瘤病理组织类型和病理分级的关系。结果脑胶质瘤的FKBP51阳性率显著高于正常脑组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。不同病理类型脑胶质瘤组织的FKBP51阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。恶性的胶质母细胞瘤FKBP51的表达水平显著高于良性的星形细胞瘤，差异有统计学意义（P＜0.05）。FKBP51的表达水平与脑胶质瘤分级呈正相关（r=0.30，P＜0.05）。结论FKBP51表达与脑胶质瘤的病理类型和临床病理分级具有相关性，有可能作为脑胶质瘤标志物用于临床病理特征分析和预后判断。

[关键词] FK506结合蛋白51；表达；脑胶质瘤；病理分级

脑胶质瘤是发病率、病死率最高的中枢神经系统原发性肿瘤，恶性程度高，生存率低。不同病理组织类型和分级与脑胶质瘤的预后密切相关，如星形细胞瘤的生存期为5～10年，间变性星形细胞瘤的生存期为2～3年，胶质母细胞瘤的生存期仅为12～15个月，但相同病理类型的脑胶质瘤预后也有较大差异，目前尚缺乏判断其预后的标志物。FK506结合蛋白51 （FK506 binding protein 51，FKBP51）属于亲免素家族，广泛表达于多种肿瘤组织。作为致癌或抑癌基因，其参与肿瘤发生发展和化疗敏感性的调节[1]。目前，有关FKBP51表达与脑胶质瘤病理分级关系的研究较少。本研究采用免疫组织化学法检测FKBP51在脑胶质瘤组织中的表达，探讨其表达水平与脑胶质瘤病理组织分型和分级的关系，旨在为临床诊断和治疗提供理论依据。

1.1　一般资料

选取本院2013年1月～2015年1月的223例脑胶质瘤患者作为研究对象，男性117例，女性106例；年龄5～75岁，平均（44.0±6.9）岁；病理组织分型：胶质母细胞瘤62例，星形细胞瘤134例，少突星形/胶质细胞瘤16例，室管膜瘤/间变室管膜瘤11例；病理组织分级：Ⅰ/Ⅱ级133例，Ⅲ/Ⅳ级90例。选取同期来自于颅脑损伤手术患者的23例正常脑组织进行对照研究，男性11例，女性12例；年龄8～72岁，平均（45.0± 7.5）岁。

1.2　材料

脑胶质瘤及正常脑组织组合芯片由西安艾丽娜生物科技有限公司提供；抗体人FKBP51抗体[FKBP51（D-4）：sc-27154]购自Santa公司；即用型免疫组化E1iVisionTMp1us试剂盒（KIT-9902）和DAB显色系统（液体DAB酶底物显色试剂盒，DAB-0031/ 1031）均购自福州迈新生物技术有限公司。

1.3　实验方法

采用免疫组化（IHC）的E1iVisionTM法检测FKBP51抗体在脑胶质瘤及正常脑组织组合芯片中的表达情况。实验中对组织芯片依次行常规脱蜡水化、抗原修复、3%H2O2-甲醇封闭内源性过氧化物酶、滴加FKBP51（1∶25）、DAB显色、苏木素复染、常规脱水封片等处理。另外，实验设检测片和阴性对照，阴性对照片与检测片操作方法相同，一抗改用同种的IgG，其余条件均相同。

1.4　FKBP51阳性的判定标准

根据芯片染色强度进行FKBP51阳性的判定：不着色为阴性（-），着浅棕色为弱阳性（+），着棕色为阳性（++），着棕褐色为强阳性（+++）。

1.5　统计学处理

采用SPSS 22.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料采用x2检验或Ridit分析，相关性采用Spearman相关分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1　两组FKBP51阳性率的比较

脑胶质瘤的FKBP51阳性率显著高于正常脑组织，差异有统计学意义（P=0.045）（表1、图1）。

表1　两组FKBP51阳性率的比较（n）

 

与正常脑组织比较，*P＜0.05

 

图1　FKBP51在脑胶质瘤组织中的表达（DAB显色，×200）
A：阴性；B：弱阳性；C：阳性；D：强阳性

2.2　不同病理类型脑胶质瘤组织FKBP51阳性率的比较

不同病理类型脑胶质瘤组织FKBP51的阳性率比较，差异有统计学意义（x2=21.84，P＜0.05）。恶性的胶质母细胞瘤FKBP51的表达水平显著高于良性的星形细胞瘤，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2　不同病理类型脑胶质瘤组织FKBP51阳性率的比较（n）

 

与星形细胞瘤组比较，*P＜0.05

2.3　FKBP51表达水平与脑胶质瘤病理分级的相关性分析

Spearman等级相关分析显示，FKBP51的表达水平与脑胶质瘤分级成正相关（r=0.30，P＜0.05）（表3）。

表3　FKBP51表达水平与脑胶质瘤病理分级的相关性分析（n）

脑胶质瘤是最常见的成人颅内肿瘤，恶性程度高，占原发性颅内肿瘤的50%～60%，多见于30～40岁的成人[2]。研究显示[3]，近年来其发病率呈上升趋势。虽然关于本病的诊疗技术在不断进步，但由于其浸润性生长[4]以及对放化疗不敏感等恶性生物学特征，脑胶质瘤的生存率和预后仍未得到明显改善[5]。尽管发现多种分子如p53、表皮生长因子受体（epiderma1 growth factor receptor，EGFR）和Ki-67等参与脑胶质瘤的发生、发展[6-7]，但其发病机制尚不清楚，尤其是缺乏与脑胶质瘤恶性生物学行为相关的特异性标志物[8]。

FKBP51属于大分子亲免素家族，表达于多种组织细胞和肿瘤[9]。FKBP51作为分子伴侣参与类固醇接受体复合物的形成，调节组织细胞对类固醇激素的应答；调节丝/苏氨酸蛋白激酶（AKT）和核因子（NF）-κB信号通路的活性，参与细胞增殖和凋亡的调控；促进微管相关蛋白去磷酸化，增加微管系统的稳定性[10]。新近研究显示[11]，FKBP51可能参与肿瘤细胞发生、发展和放化疗敏感性的调控。FKBP51在前列腺癌、淋巴瘤、头颈部肿瘤、黑素瘤中的表达水平高于相应的正常组织，而在胰腺癌、结肠癌、睾丸癌中的表达则明显下调。上调FKBP51表达能抑制胰腺癌细胞生长，增加化疗敏感性[12]。推测在不同组织类型的肿瘤中，高表达或低表达的FKBP51可通过不同的信号通路促进或抑制肿瘤的生长，其有可能作为预测肿瘤化疗敏感性的预后生物标志物和肿瘤治疗的新靶点[13]。本研究结果显示，FKBP51在脑胶质瘤细胞中的表达水平明显高于正常脑组织（P=0.045），且恶性的胶质母细胞瘤表达水平明显高于良性的星形细胞瘤（P= 0.002），提示FKBP51可能参与脑胶质瘤的发生、发展，并与其恶性生物学行为相关。病理分级是反映脑胶质瘤分化程度和预后的重要指标[14-16]，本研究结果显示，FKBP51表达水平与脑胶质瘤的病理分级呈正相关，即FKBP51表达水平越高，脑胶质瘤的分级越高，进一步证实了FKBP51可能参与脑胶质瘤增殖和侵袭等恶性生物学行为的调控。

综上所述，FKBP51在脑胶质瘤细胞的表达上调，且与肿瘤临床病理分级相关，提示有可能作为其预后判断的生物学标志物和治疗靶点，但FKBP51作为分子伴侣调控机体类固醇激素应答、细胞增殖凋亡等多种信号通路活化和微管系统稳定，参与机体多种生理病理过程及脑胶质瘤增殖凋亡和侵袭转移的病理机制尚需进一步探讨。

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Expression and clinical significance of FK506 binding protein 51 in brain glioma tissue

HAO Yu1，3LLU Xiao-wen2DONG Jing2CUI Bin2JIAO Yu-lian2ZHOU Long-shan4ZHONG Zong-lei4ZHAO Yue-ran1，2▲
1.Institute of Basic Medicine,Shandong Academy of Medica1 Sciences,Jinan 250012,China；2.Province Hospita1 Affi1iated to Shandong University,Jinan 250012,China；3.C1inica1 Laboratory,Peop1e’s Hospita1 of Liaocheng City in Shandong Province,Liaocheng　252000,China；4.Department of Neurosurgery,Peop1e’s Hospita1 of Liaocheng City in Shandong Province,Liaocheng 252000,China

[Abstract] Objective To exp1ore the expression and c1inica1 significance of FK506 binding protein 51 （FKBP51) in brain g1ioma tissue. Methods 223 cases of brain g1ioma from January 2013 to January 2015 in our hospita1 were se-1ected as the research group,23 cases of norma1 brain tissues from patients with brain injury was se1ected as the contro1 group.The expression 1eve1 of FKBP51 was tested by using immunohistochemica1 method,and the re1ationship between its expression 1eve1 and g1iomas histopatho1ogic types and patho1ogy grade was ana1yzed. Results The positive rate of FKBP51 in g1ioma tissue was higher than that in norma1 brain tissue,with significant difference （P＜0.05).There were significant difference in the positive rate of FKBP51 in different patho1ogica1 types of brain g1ioma tissues （P＜0.05).The expression 1eve1 of FKBP51 in ma1ignant g1iob1astomas was higher than that in benign astrocytoma,with significant difference （P＜0.05).The expression 1eve1 of FKBP51 had positive re1ationship with patho1ogy grade （r=0.30，P＜0.05). Conclusion The expression of FKBP51 is re1ated to histopatho1ogic types and patho1ogy grade of g1ioma,it may be as g1ioma markers for ana1ysis c1inicopatho1ogic feature and judgement prognosis.

[Key words] FK506 binding protein 51；Expression；Brain g1ioma；Patho1ogy grade

[中图分类号] R739.41　

[文献标识码] A　

[文章编号] 1674-4721（2016）03（b）-0012-03
▲通讯作者

收稿日期：（2015-12-04　本文编辑：祁海文）